ID8細胞係（小鼠卵巢上皮癌細胞）

ID8細胞係是從(cong) 晚期傳(chuan) 代的C57BL/6小鼠卵巢表麵上皮細胞（MOSEC）中建立的10個(ge) 克隆係之一。這些克隆係中的任何一個(ge) 通過腹膜內(nei) 注射至C57BL/6小鼠體(ti) 內(nei) 都會(hui) 導致腹膜腫瘤和腹水的形成。ID8細胞在這10個(ge) 克隆係中表現出最高的腫瘤負荷，被廣泛應用於(yu) 卵巢癌研究。
ID8細胞係因其生理和生物學特性與(yu) 人類上皮性卵巢癌的高度相似性，常被用於(yu) 同基因小鼠模型研究。

ID8細胞係特性特征

• 自發永生化: ID8細胞係具有自發永生化的特性。

• 腫瘤形成: ID8細胞通過腹膜內(nei) 注射到C57BL/6小鼠中會(hui) 導致腹膜腫瘤和腹水的形成。
  

• 生物發光成像: 有些ID8細胞係通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因（ID8-Luc），可用於(yu) 生物發光成像研究。這些細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶，用於(yu) 活體(ti) 動物成像實驗。

• 基因表達: ID8細胞係在基因表達上與(yu) 人類上皮性卵巢癌非常相似，適用於(yu) 研究卵巢癌的發生、發展和轉移。

ID8細胞係參數表

ID8小鼠卵巢上皮癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將凍存的ID8細胞迅速從(cong) 液氮中取出，立即放入37°C水浴中快速解凍（約1-2分鍾）。

• 解凍後用75%酒精消毒凍存管外壁，然後在無菌操作台上打開凍存管，將ID8細胞懸液轉移到含有10mL完全培養(yang) 基的離心管中。

• 1000rpm離心5分鍾，棄去上清，加入新鮮培養(yang) 基重懸ID8細胞，轉移到T25培養(yang) 瓶中。

細胞培養

• 將ID8細胞培養(yang) 瓶放入37°C，5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 每天觀察ID8細胞生長狀態，及時更換培養(yang) 基（一般每2-3天更換一次）。

細胞傳代

• 當ID8細胞匯合度達到80-90%時，進行傳(chuan) 代。

• 吸去舊培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液洗滌ID8細胞一次。

• 加入適量的0.25%胰蛋白酶消化液，37°C消化1-2分鍾，輕輕敲打培養(yang) 瓶底部使ID8細胞脫落。

• 加入完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打ID8細胞使其分散均勻。

• 按照1:3至1:5的比例進行傳(chuan) 代，將ID8細胞懸液分裝到新的T25培養(yang) 瓶中，加入新鮮培養(yang) 基。

注意事項

• 細胞汙染：收到ID8細胞後請拍照，3天內(nei) 如果發現汙染，請及時拍照與(yu) 供應商聯係；在每次操作前後都要進行嚴(yan) 格的無菌操作，防止ID8細胞汙染。

• 細胞狀態觀察：每次傳(chuan) 代前後都要在顯微鏡下觀察ID8細胞狀態，確保ID8細胞生長良好。記錄ID8細胞的形態變化和生長情況，確保實驗的可重複性。

• 培養(yang) 基更換：定期更換培養(yang) 基，避免ID8細胞因營養(yang) 不足或廢物積累而影響生長。

• 培養(yang) 基和試劑：使用新鮮配製的完全培養(yang) 基（DMEM+10%FBS+1%P/S）。確保所有使用的試劑和培養(yang) 基都是無菌的。

• 細胞觀察：每天觀察ID8細胞生長狀態，及時發現異常；使用低倍鏡（4或5X物鏡）判斷ID8細胞傳(chuan) 代密度，10X和20×物鏡觀察細胞形態。

• 傳(chuan) 代操作：當ID8細胞匯合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代；傳(chuan) 代過程中要注意無菌操作，避免引入汙染。

• 細胞複蘇：複蘇後24小時觀察ID8細胞貼壁情況，及時更換新鮮培養(yang) 基。

• 培養(yang) 條件：保持正確的培養(yang) 條件：37°C，5% CO₂。

• 定期檢測：定期進行支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測，確保ID8細胞無汙染。

• 記錄保存：保存ID8細胞狀態的照片和記錄，以便追蹤ID8細胞生長情況。

• 及時處理異常：如發現汙染，立即隔離受汙染的ID8細胞，並對培養(yang) 環境進行徹底消毒。

• 培養(yang) 瓶處理：收到ID8細胞後，用75%酒精消毒培養(yang) 瓶表麵。

• 試劑預熱：使用前將培養(yang) 基等試劑預熱至室溫或37°C。