
m-07e細胞 (人巨細胞白血病細胞)
- 來源:外周血
- 細胞特征:懸浮細胞 , 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+8ng/mL GM-CSF+1% P/S
- 其他:M-07e細胞提供外顯子組和RNA序列數據。
m-07e細胞從(cong) 1987年診斷為(wei) 患有急性巨核細胞白血病(AML M7)的6個(ge) 月大女孩的外周血中建立,是生長因子非依賴性細胞係M-07的亞(ya) 係。
m-07e細胞特性
M-07e細胞對以下細胞因子有增殖反應:GM-CSF、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-15、NGF、SCF、TNF-α、TPO。
M-07e細胞係可在3-4周內(nei) 迅速變得不依賴細胞因子,可能由於(yu) 獨立細胞的生長。
M-07e細胞提供外顯子組和RNA序列數據。
m-07e細胞參數表
中文名稱 | m-07e細胞 (人巨細胞白血病細胞) |
細胞別稱 | M-07E; M-O7e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮細胞 |
培養環境 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37°C |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
完全培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 8ng/mL GM-CSF + 1% P/S |
傳代比例(密度) | 5×10^5-1×10^6 cells/mL |
換液頻次 | 2~3次/周 |
細胞建立 | 建立於1987年,來源於一名6個月大女嬰的外周血,患有急性巨核細胞白血病(AML M7)。 |
細胞背景 | 是生長因子非依賴性細胞係M-07的一個亞係,對多種細胞因子如GM-CSF、IFN和IL家族成員有增生反應。 |
生長特性 | 可能在短時間內(3-4周內)獨立於細胞因子而生長,提供外顯子和RNA序列數據。 |
倍增時間 | ~40小時 |
供體年齡 | 女性,6個月 |
組織來源 | 外周血 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 白血病細胞 |
生物安全等級 | 1 |
抗原表達 | CD3-、CD13+、CD14-、CD19-、CD33+、HLA-DR - |
細胞保藏中心 | DSMZ; ACC-104 |
培養教程
m-07e人巨細胞白血病細胞培養教程
維持M-07e細胞生長
懸浮狀態下生長的M-07e細胞可以通過向培養(yang) 瓶中添加完全培養(yang) 基來維持生長狀態。
一般情況下,M-07e細胞密度維持在1×10^5~1×10^6個(ge) /mL,以維持M-07e細胞的正常生長。
M-07e細胞傳代操作
方法一
收集M-07e細胞懸液到無菌離心管中,1000 rpm離心10分鍾。
棄去上清,加入6-8 mL新鮮培養(yang) 基,重懸M-07e細胞,溫柔吹打。
將M-07e細胞懸液轉移到新T25瓶中,按1:2~1:5的比例進行傳(chuan) 代。
方法二:
可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yang) 基後,將剩餘(yu) M-07e細胞懸液重懸。
將M-07e細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8mL培養(yang) 基的皿中或瓶中。
M-07e細胞凍存步驟
將培養(yang) 瓶內(nei) 的M-07e細胞懸液用吸管完全吸出,轉移到無菌離心管中。
進行M-07e細胞計數,1000 rpm離心10分鍾,棄去上清。
加適量M-07e細胞凍存液重懸細胞。
將M-07e細胞懸液分裝到1mL凍存管中,4℃預冷30分鍾。
將凍存管轉入程序降溫盒中,在-80℃過夜。
之後將凍存管快速轉移到液氮中保存。
M-07e細胞複蘇步驟
將含有1mL M-07e細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000 rpm條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有M-07e細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜,或將M-07e細胞懸液加入10cm皿中,加入約8mL培養(yang) 基,培養(yang) 過夜。
第二天換液並檢查M-07e細胞密度。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 19,25 |
D3S1358 | 16,19 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 13 (DSMZ=ACC-104) |
13,16 (CCRID=1101HUM-PUMC000112) | |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15,20 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30,32.2 |
FGA | 18,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 12,14 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |
參考文獻
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