
AGS細胞(人胃腺癌細胞)
- 來源:胃;胃癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:Ham's F-12+10% FBS+1% P/S
- 其他:AGS細胞的植板率為(wei) 34%
AGS人胃腺癌細胞是1979年從(cong) 一名54歲未經治療的白人女性胃腺癌患者的胃組織中分離。
AGS細胞是一種超二倍體(ti) 人類細胞係,模式染色體(ti) 數為(wei) 49,約60%的細胞顯示此特征。多倍體(ti) 率為(wei) 3.6%。細胞核型分析顯示,AGS細胞中存在特定的染色體(ti) 異常,包括der(8)t(1;8)(q12;p23)、der(19)t(19;?)(q13.6;?),以及無法確定來源的微小染色體(ti) M3和M12。N20染色體(ti) 通常有三個(ge) 副本,而X染色體(ti) 、N8和N18染色體(ti) 各有一個(ge) 副本,N14染色體(ti) 偶爾會(hui) 出現三份副本。
AGS細胞不僅(jin) 適用於(yu) 常規的二維培養(yang) ,還能夠用於(yu) 三維細胞培養(yang) ,是進行轉染實驗的理想宿主。AGS細胞廣泛應用於(yu) 胃癌、癌症生物學和藥物開發領域。
AGS細胞(人胃腺癌細胞)特性特征
植板率:AGS細胞的植板率為(wei) 34%。
致瘤性:在無胸腺BALB/c小鼠中,AGS細胞具有成瘤能力。
支原體(ti) 汙染:AGS細胞曾經受到支原體(ti) 汙染,但已被ATCC清除。
病毒感染:後續檢測發現AGS細胞感染了5型副流感病毒(PIV5,前稱SV5)。
AGS細胞(人胃腺癌細胞)參數表
細胞名稱 | AGS細胞(人胃腺癌細胞) |
來源 | 人;女性,54歲;胃,胃腺癌 |
生長特性 | 貼壁生長;上皮細胞樣 |
細胞代數 | 10代以內;植板率34% |
背景介紹 | AGS細胞源自一個未經治療的切除腫瘤碎塊。 |
生物安全等級 | BSL-2 |
致瘤性 | 是,在無胸腺BALB/c小鼠中致瘤 |
細胞保藏中心 | ATCC; CRL-1739; BCRC; 60102; BCRJ; 0311 |
培養基 | Ham's F-12 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:95%空氣 + 5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮儲存 |
倍增時間 | ~20-24小時 |
消化時間 | 2-3分鍾 |
傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
換液頻次 | 2-3次/周 |
支原體汙染 | 無(已清除) |
病毒感染 | 感染了5型副流感病毒(PIV5,前稱SV5) |
研究領域 | 胃癌生物學、藥物開發、3D細胞培養、轉染實驗 |
培養教程
AGS人胃腺癌細胞培養教程
AGS細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出凍存的AGS細胞,迅速轉移至-80℃冰箱內(nei) ,放置幾分鍾以揮發殘留的液氮。
在超淨工作台中,將凍存的AGS細胞迅速放入37℃水浴中,輕輕搖動,直到AGS細胞完全解凍(通常需1-2分鍾)。
解凍後,迅速將AGS細胞懸液轉移到15 mL離心管中,並加入5-10 mL預熱的完全培養(yang) 基,輕輕混勻。
以1000 rpm離心5分鍾,去除上清液。
將AGS細胞重懸於(yu) 2-5 mL完全培養(yang) 基中,並將其轉移至已預溫的培養(yang) 瓶中,輕輕搖勻以確保AGS細胞均勻分布。
AGS細胞培養條件
培養(yang) 基:Ham's F-12,補充10% FBS和1% P/S
培養(yang) 環境:AGS細胞應置於(yu) 37℃、5% CO₂和95%空氣的孵育器中培養(yang) 。
換液頻次:每2-3天更換一次培養(yang) 基,以保證AGS細胞獲得充足的營養(yang) 和維持適宜的pH值。
AGS細胞傳代
胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25% Trypsin-EDTA)
預熱的完全培養(yang) 基
在超淨工作台中,吸棄培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基,用預熱的PBS輕輕洗滌AGS細胞一次以去除殘留的培養(yang) 基和死細胞。
加入2-3 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,均勻覆蓋AGS細胞層,輕輕搖晃培養(yang) 瓶,促進AGS細胞與(yu) 培養(yang) 基質分離。
觀察AGS細胞是否開始脫離培養(yang) 瓶底部,通常需要2-3分鍾。AGS細胞完全脫落後,加入等體(ti) 積的完全培養(yang) 基終止消化。
將AGS細胞懸液轉移至15 mL離心管中,以1000 rpm離心5分鍾。
去除上清液,將AGS細胞重懸於(yu) 適量的完全培養(yang) 基中。按照1:3至1:4的比例將AGS細胞接種到新的培養(yang) 瓶中,並補充足量培養(yang) 基。
AGS細胞凍存
在AGS細胞傳(chuan) 代後,將AGS細胞培養(yang) 至對數生長期,收集AGS細胞並以1000 rpm離心5分鍾。
去除上清液,將AGS細胞重懸於(yu) 凍存液中,確保AGS細胞密度約為(wei) 1×10^6 cells/mL。
將AGS細胞懸液分裝至凍存管中,標記清楚。
將凍存管置於(yu) -80℃冰箱中慢速降溫(通常24小時),隨後轉移至液氮罐中進行長期保存。
注意事項
在整個(ge) 操作過程中,應保持無菌環境,避免AGS細胞汙染。
定期檢查AGS細胞的生長狀態,觀察AGS細胞形態,確保AGS細胞健康。
若發現任何異常情況(如AGS細胞形態改變、細胞增殖減緩等),應及時采取措施處理。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D1S1656 | 14,16 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 20,22 |
D3S1358 | 15.2 (KCLB=21739) |
16 (ATCC=CRL-1739; CCRID; CLS=300408; Technion Genomics Center BCF) | |
D5S818 | 9,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 15 |
D12S391 | 19,20 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13.2,16 |
D21S11 | 29 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 23,24 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 13,16 |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 11,12 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
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