Fu97細胞（人胃癌細胞係）

FU-97細胞是一種來源於(yu) 人類胃癌的上皮樣細胞係，最初分離自一名 66 歲日本女性胃癌患者，其術前血清中甲胎蛋白（AFP）水平高達 2266 ng/mL，並伴有淋巴結及胰腺轉移。Fu97細胞貼壁生長，具有穩定的微衛星狀態（MSS），可高水平分泌 AFP，並已進行外顯子測序、蛋白質組學、DNA 甲基化分析、SNP 陣列、轉錄組分析（微陣列及 RNA-Seq）及反向蛋白質陣列等多組學研究。

FU-97 細胞推薦培養(yang) 於(yu) 高葡萄糖（4.5 g/L）杜爾貝科改良伊格爾培養(yang) 基（DMEM），並需補充 10% 胎牛血清（FBS）及 10 mg/L 胰島素，倍增時間通常在 72 小時左右，不同批次可能在 30-34 小時範圍內(nei) 波動。

Fu97細胞常用於(yu) 胃癌發病機製研究、藥物篩選及抗癌治療探索，例如三氧化二砷對其增殖抑製及凋亡誘導的研究。FU-97 細胞在基因靶向治療研究中也具有重要應用，例如構建針對 STAT3 基因的 siRNA 表達載體(ti) ，可在該細胞中實現高效沉默，探索其在胃癌治療中的潛在作用。

Fu97細胞由 ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell 及 PromoCell 等多個(ge) 國際生物資源庫提供，並廣泛用於(yu) 胃癌相關(guan) 的基礎及轉化研究。

Fu97細胞特性特征

• 細胞形態和生長方式：FU97細胞是上皮樣細胞，貼壁生長。

• AFP表達：產(chan) 生高水平的AFP（甲胎蛋白）。棕黃色顆粒沉著代表甲胎蛋白表達陽性.

• 微衛星穩定性: 穩定 (MSS)

• 對藥物的反應：三氧化二砷(As2O3) 對FU97細胞有體(ti) 外抑製增殖和誘導凋亡的作用。

• 侵襲能力：表達DKK1的AFP陽性胃癌細胞，FU97細胞的侵襲能力會(hui) 增強，傷(shang) 口愈合試驗證實。

• 可用於(yu) 基因治療研究：針對AFP基因的siRNAs表達質粒是可用於(yu) AFP相關(guan) 胃癌的治療物質，能顯著抑製腫瘤細胞生長並能誘導其凋亡，可進一步研究AFP基因的功能及在實驗動物體(ti) 內(nei) 進行基因治療研究。

• 多組學分析：已進行多組學分析，包括深度外顯子分析、深度定量蛋白質組分析、DNA甲基化分析、SNP陣列分析、轉錄組分析（通過微陣列和RNAseq）以及反向蛋白質陣列的蛋白質表達分析。

• STAT3抑製：靶向STAT3基因的siRNA表達載體(ti) ，在胃癌細胞係FU97中表達STAT3特異性siRNA分子，可特異性抑製STAT3基因的表達。

• 凋亡：轉染後48h，Annexin V/PI雙染色法檢測FU97凋亡結果顯示，pDonor Vector-AFP1/2/3的％Gated分別為(wei) 46.69％、42.79％、38.48％，而空白對照為(wei) 23.31％，說明排除壞死細胞外，有相當一部分為(wei) 晚期凋亡細胞，且pDonor Vector-AFP1作用後誘導的晚期凋亡細胞最多

Fu97人胃癌細胞係參數表

Fu97人胃癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 預熱37℃水浴鍋。
  

• 在超淨工作台內(nei) 準備好完全培養(yang) 基。

• 取出FU97細胞凍存管，75%酒精消毒後迅速放入37℃水浴鍋解凍。

• 輕輕搖晃凍存管，使FU97細胞迅速解凍（約1-2分鍾）。
  

• 立即用1mL移液槍吸取細胞懸液，轉移至含9mL完全培養(yang) 基的15mL離心管。

• 1200 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 重新加入10mL新鮮培養(yang) 基，輕輕重懸FU97細胞。

• 將細胞轉移至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 每2~3天更換一次新鮮培養(yang) 基，確保FU97細胞正常生長。
  

• 觀察細胞生長狀態，FU97細胞達80-90%匯合時進行傳(chuan) 代。
  

• 吸去舊培養(yang) 基，PBS洗滌2次。

• 加入適量0.25%胰酶（含EDTA），室溫消化約1-2分鍾，輕敲瓶壁助細胞脫落。

• 加入完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打混勻FU97細胞。

• 1200 rpm離心5分鍾，棄去上清，重懸細胞。

• 1:3~1:5比例進行傳(chuan) 代，重新加入新鮮培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• FU97細胞生長狀態良好時（對數生長期），可進行凍存。
  

• 收集細胞，1200 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，加入凍存液（90% FBS+10% DMSO），混勻FU97細胞。

• 4℃放置10分鍾。
  

• -20℃放置1小時。

• -80℃保存24小時後轉移至液氮長期儲(chu) 存。

• 按照1×10⁶~5×10⁶個(ge) 細胞/mL的濃度分裝至凍存管。

• 逐步降溫

注意事項

• 操作時保持無菌，避免FU97細胞汙染。

• 胰酶消化時間不宜過長，以免損傷(shang) FU97細胞。

• 凍存液需現配現用，確保FU97細胞存活率。

• 定期監測FU97細胞狀態，確保細胞形態及增殖能力正常。