
MIA PaCa2細胞(人胰腺癌細胞)
- 來源:胰腺;人胰腺導管腺癌細胞
- 細胞特征:半貼半懸 , 上皮樣貼壁細胞,伴有圓形漂浮細胞
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S
- 其他:MIA PaCa-2細胞對天冬酰胺酶表現出敏感性
MIA PaCa-2細胞係是從(cong) 一名65歲的白種男性胰腺癌患者的腫瘤組織中分離並建立的上皮細胞係。MIA PaCa-2細胞係的建立始於(yu) 1975年,由A. Yunis等人完成,並於(yu) 1977年正式確立。
MIA PaCa-2細胞是一種低分化的二倍體(ti) 人源胰腺癌細胞係,顯示出近三倍體(ti) 的染色體(ti) 組成,模態染色體(ti) 數為(wei) 61,單細胞內(nei) 通常存在16到20條標記染色體(ti) ,同時也有少數正常染色體(ti) 缺失的現象。
MIA PaCa-2細胞生物學特征:約40小時的細胞倍增時間和約19%的軟瓊脂集落形成效率。此外,該細胞係對天冬酰胺酶表現出敏感性。
MIA PaCa-2細胞係的基因表達特征
細胞角蛋白表達:MIA PaCa-2細胞表達細胞角蛋白5.6(Cytokeratin 5.6)和AE1/AE3。
粘附分子表達:表達E-鈣粘蛋白(E-cadherin),這是一種重要的細胞粘附分子。
細胞骨架蛋白表達:表達波形蛋白(vimentin),這是一種中間絲(si) 蛋白,常見於(yu) 間質細胞。
神經內(nei) 分泌標誌物表達:表達嗜鉻粒蛋白A(chromogranin A)和突觸素(synaptophysin),這些是神經內(nei) 分泌細胞的標誌物。
受體(ti) 表達:表達生長抑素受體(ti) 2(SSTR2)和神經降壓素受體(ti) 1(NTR1)。
不表達的蛋白:值得注意的是,MIA PaCa-2細胞不表達神經元黏附分子(neural cell adhesion molecule, NCAM)。
其他表達:MIA PaCa-2細胞還表達人集落刺激因子I(CSF-I)和纖溶酶原激活劑。
酶表達:顯示出G6PD(葡萄糖-6-磷酸脫氫酶)和B同工酶類型。
MIA PaCa2細胞參數表
細胞名稱 | MIA PaCa2細胞(人胰腺癌細胞) |
別名 | MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2;MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2 |
ATCC編號 | CRL-1420 |
細胞類型/來源 | 人胰腺導管腺癌細胞 |
患者信息 | 65歲高加索男性 |
建立信息 | 1975年由A. Yunis等人建立,1977年正式確立 |
細胞形態/生長特性 | 上皮樣,圓形 / 半貼壁生長 / 低分化 |
生長參數 | 倍增時間:25.7±4.3小時(單層),40小時(軟瓊脂) / 飽和密度:1.5×10^5細胞/cm² / 克隆形成效率:19%(軟瓊脂) |
細胞周期分布 | G0/G1: 60-65%, S: 20-25%, G2/M: 10-15% |
染色體 | 近三倍體,模態數61,16-20條標記染色體/細胞 |
基因突變 | KRAS (G12C), TP53 (R248W), CDKN2A/p16 (缺失) |
培養基/添加物 | DMEM高糖 + 10%胎牛血清 + 2.5%馬血清 + 1%丙酮酸鈉(可選) + 1%青黴素/鏈黴素 |
培養環境 | 37°C, 95%空氣+5% CO2, 70-80%濕度 |
傳代/換液 | 傳代比例1:2至1:6 / 每2-3天換液 |
表達基因/蛋白 | CSF-I, 纖溶酶原激活劑, 細胞角蛋白5.6, AE1/AE3, E-鈣粘蛋白, 波形蛋白, 嗜鉻粒蛋白A, 突觸素, SSTR2, NTR1 |
不表達/酶活性 | 不表達NCAM / G6PD和B同工酶活性 |
信號通路/轉錄因子 | MAPK/ERK和PI3K/AKT通路激活 / NF-κB活性增強 |
致瘤性/轉移潛能 | 在裸鼠中可形成腫瘤 / 較高轉移潛能 |
藥物/放射敏感性 | 對天冬酰胺酶敏感,對吉西他濱有一定耐藥性 / 相對放射抗性 |
代謝特點 | 高葡萄糖消耗和乳酸產生 / 中等穀氨酰胺依賴性 |
免疫相關表達 | MHC I低表達 / PD-L1中等表達 |
凍存/複蘇方法 | 10% DMSO + 90%完全培養基,液氮保存 / 37°C水浴快速解凍 |
檢測與鑒定 | 無菌(細菌、真菌、支原體陰性),HIV/HBV/HCV陰性 / STR分析確認 |
研究應用 | 胰腺癌、藥物篩選、信號通路、耐藥機製、轉移機製研究 |
相關模型 | 3D培養可形成類器官結構 / 可建立皮下和原位異種移植模型 |
應激條件耐受性 | 可耐受24-48小時血清饑餓 / 可在1% O2低氧條件下存活 |
培養教程
MIA PaCa2人胰腺癌細胞培養教程
細胞複蘇
凍存管在37°C水浴中快速解凍(1-2分鍾)。
將細胞懸液轉移到含4-6mL預熱完全培養(yang) 基的離心管中。
以1000rpm離心3-5分鍾,去除上清。
用完全培養(yang) 基重懸細胞,並接種到含6-8mL完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。
傳代
傳(chuan) 代時機: 當細胞密度達到70-90%時進行傳(chuan) 代。
傳(chuan) 代步驟: a. 收集培養(yang) 基中的懸浮細胞。 b. 用PBS洗滌貼壁細胞。 c. 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C下消化1-2分鍾。 d. 加入完全培養(yang) 基終止消化。 e. 輕輕吹打混合細胞。 f. 以1000rpm離心3-5分鍾,去除上清。 g. 用新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞。 h. 按1:3到1:8的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
凍存
凍存液配製: 使用55%基礎培養(yang) 基 + 40%FBS + 5% DMSO的凍存液。
細胞密度調整: 調整細胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。
凍存過程: 緩慢降溫後轉入液氮保存。
注意事項
首次傳(chuan) 代建議使用1:2的比例。
注意收集和保留懸浮細胞。
消化時間不要過長,避免損傷(shang) 細胞。
定期進行細菌、真菌和支原體(ti) 檢測。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D1S1656 | 15,17.3 |
D2S441 | 14 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) |
13 (PubMed=17254797) | |
D6S1043 | 12 |
D7S820 | 12 (KCLB=21420) |
12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=17254797; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) | |
D8S1179 | 16 |
D10S1248 | 14,15 |
D12S391 | 19 |
D13S317 | 12,13 |
D16S539 | 10,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) |
11,13 (PubMed=17254797) | |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 29,31 (PubMed=17254797) |
29,31.2 (ATCC=CRL-1420; CCRID; DSMZ=ACC-733; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
D22S1045 | 16 |
FGA | 22 |
Penta D | 12,16 |
Penta E | 13,18 |
TH01 | 9,10 |
TPOX | 9 |
vWA | 15 |
參考文獻
- 《安徽醫科大學》 2021年
- 摘要:...驗室製備的靶向NRP-2單克隆抗體(NRP-2 mAb)觀察其對胰腺癌細胞增殖、遷移...
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