Panc 05.04細胞（人胰腺癌細胞）

Panc 05.04人胰腺癌上皮細胞係於(yu) 1995年從(cong) 一名77歲白人女性胰腺腺癌患者的原發腫瘤中分離，廣泛應用於(yu) 癌症研究，特別是胰腺癌的分子機製和藥物篩選。Panc 05.04細胞由ATCC（美國典型培養(yang) 物保藏中心）提供，標識號為(wei) CRL-2557。Panc 05.04細胞表現為(wei) 上皮樣形態，貼壁生長。

Panc 05.04細胞特性特征

• K-ras基因在12號密碼子處發生GGT->GAT突變，導致天冬氨酸替代甘氨酸、表達K-ras癌基因

• 抗原表達：MHC I類+；MHC II類-   B型血；Rh+

• 基因表達：細胞角蛋白7；細胞角蛋白18；K-ras+；MHC I類+；MHC II類；B型血；Rh+

• Panc 05.04細胞在裸小鼠或SCID小鼠體(ti) 內(nei) 具有致瘤性

• Panc 05.04細胞鋪覆效率為(wei) 100%

• 一般保持10代以內(nei) 以確保遺傳(chuan) 穩定性

Panc 05.04細胞參數表

Panc 05.04人胰腺癌細胞培養教程

細胞接收後的初步處理

• 狀態檢查：收到Panc 05.04細胞後，首先檢查培養(yang) 瓶的完整性和培養(yang) 基的清潔度，確保沒有破損、泄漏或汙染。如發現問題，請拍照記錄並立即聯係供應商。

• 消毒步驟：使用75%酒精消毒Panc 05.04細胞培養(yang) 瓶的外壁，然後將其轉移至超淨工作台。

• 初步培養(yang) ：將Panc 05.04細胞培養(yang) 瓶放入37℃的培養(yang) 箱中靜置2-4小時，以便穩定細胞狀態。

細胞複蘇步驟

• 將凍存的Panc 05.04細胞懸液（1 mL）迅速解凍於(yu) 37℃水浴中，同時輕輕搖動凍存管以確保均勻解凍。
  

• 向解凍的細胞懸液中加入5 mL完全培養(yang) 基（RPMI 1640 + 15% FBS + 20 U/mL人重組胰島素），混合均勻後，在1000 RPM下離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 向細胞沉澱中添加4-6 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打混合。
  

• 將混合後的Panc 05.04細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或6 cm培養(yang) 皿中，在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
  

細胞傳代操作

• 當Panc 05.04細胞密度達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。
  

• 首先棄去培養(yang) 上清液，用無鈣鎂離子的PBS溶液清洗細胞1-2次。
  

• 加入適量的0.25%胰蛋白酶，輕輕搖動培養(yang) 瓶，待細胞脫離後立即加入培養(yang) 基中和胰蛋白酶。

• 將細胞懸液在1000 RPM下離心5分鍾，棄去上清液，補加適量的完全培養(yang) 基。
  

• 按照細胞密度和實驗需求，將Panc 05.04細胞懸液以1:2的比例接種至新的培養(yang) 瓶中。
  

注意事項

• 細胞監控：定期觀察Panc 05.04細胞的形態和生長狀態，確保細胞無汙染且狀態良好。

• 生物安全措施：所有操作均應在生物安全櫃中進行，佩戴適當的個(ge) 人防護裝備。

• 廢棄物處理：所有廢液及接觸過Panc 05.04細胞的器材應嚴(yan) 格按照生物安全規範處理。

• 細胞凍存：在Panc 05.04細胞狀態良好的情況下，使用無血清凍存液將細胞凍存於(yu) 液氮或-80℃冰箱中，以備後續使用。