HCC38細胞（人乳腺導管癌細胞係）

HCC38細胞係是從(cong) 50歲白人女性（患者有平滑肌肉瘤的病史）乳腺導管癌組織中分離，其母親(qin) 死於(yu) 乳腺癌。HCC38細胞係於(yu) 1992年4月27日啟動，曆時32個(ge) 月建立。HCC38細胞腫瘤分類為(wei) TMN IIB期，3級，具有3/28淋巴結轉移。

HCC38細胞的模態染色體(ti) 數為(wei) 75，範圍在65至79之間，具有22%的多倍體(ti) 率。在3p12處存在純合缺失。在多數中期中檢測到至少45條不同的衍生染色體(ti) ，包括兩(liang) 個(ge) 大的中心標記，其長度約為(wei) 正常a組染色體(ti) 的1.5倍。這些染色體(ti) 異常包括：del(1)(q24)、del(1)(p22)、del(1)(p13)、add(1)(p12)、del(2)(p16)、add(3)(q10)、del(3)(q13)、del(4)(q13)、del(5)(q23q33)、der(7)(pter’q11)、del(7)(p?)、add(12)(q24)、add(14)(p11)、add(17)(p12)、der(18)、der(X)。HCC38細胞是一個(ge) 超三倍體(ti) 的人類細胞係，均勻染色區和雙著絲(si) 粒染色體(ti) 被觀察到，每對染色體(ti) 至少有一次重排。QM染色未見正常的X染色體(ti) ，Y染色體(ti) 缺失，染色體(ti) 2、6、11、13、16和20的正常拷貝。

HCC38細胞係特性

• 上皮細胞特異性標誌物: EGP2（上皮糖蛋白2）陽性，CK19陽性

• 受體(ti) 表達: 雌激素受體(ti) （ER）陰性，孕激素受體(ti) （PR）陰性

• 形態: 上皮細胞樣，貼壁生長

• HCC38細胞對Her2-neu的表達呈陰性，但對p53的表達呈陽性

• HCC38細胞對上皮細胞特異性標記物上皮糖蛋白2[EGP2]和細胞角蛋白19呈陽性，對雌激素受體(ti) （ER）和孕激素受體(ti) （PR）的表達呈陰性。

HCC38細胞係參數表

HCC38細胞人乳腺導管癌細胞係培養

HCC38細胞複蘇

• 將含有1mL HCC38細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。

• 在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yang) 基重懸細胞。

• 然後將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中37℃培養(yang) 過夜。

• 第二天顯微鏡下觀察HCC38細胞生長情況和細胞密度。

HCC38細胞傳代

• 如果HCC38細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

• 加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾（難消化的HCC38細胞可以適當延長消化時間），然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4ml含10%FBS的培養(yang) 基來終止消化。

• 輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。

• 將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書(shu) 要求配置的新的完全培養(yang) 基以保持HCC38細胞的生長活力，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

HCC38細胞凍存

• 將待凍存的HCC38細胞用胰蛋白酶消化成單細胞懸液，並以每毫升含100萬(wan) 個(ge) 細胞的密度重懸在凍存液（90%FBS+10%DMSO）中。

• 將細胞懸液分裝至1.8ml凍存管中，每管0.5-1ml。

• 將凍存管置於(yu) 裝有酒精的程序降溫盒中，於(yu) -80℃冰箱中過夜降溫。

• 次日，將凍存管置於(yu) 液氮中保存。