Du4475細胞（人乳腺上皮細胞）

DU4475人乳腺上皮細胞源自一名62歲女性的未分化癌的局部轉移性皮膚結節，該患者在乳腺低分化導管癌根治術後7年發展。

DU4475細胞模態數為(wei) 93，範圍在85至95之間。DU4475細胞是非整倍體(ti) 人類女性細胞，染色體(ti) 計數在四倍體(ti) 範圍內(nei) 。正常染色體(ti) N16和N21的代表性最低，每個(ge) 核型沒有到兩(liang) 個(ge) 拷貝，而染色體(ti) N7的代表性往往過高，每個(ge) 核型有四到五個(ge) 拷貝，但大多數剩餘(yu) 的正常染色體(ti) 有兩(liang) 到四個(ge) 拷貝。共發現22條標記染色體(ti) ，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der（3）t（3；？）。其中8個(ge) 與(yu) A.J.Langlois等人在報告中描述的內(nei) 容相同。

Du4475細胞特性

• Du4475細胞表達乳脂肪球成分，呈三陰性。
  

• Du4475細胞為(wei) 非整倍體(ti) ，染色體(ti) 計數在四倍體(ti) 範圍內(nei) ，常見染色體(ti) N16和N21的拷貝數低於(yu) 兩(liang) 個(ge) ，而染色體(ti) N7的拷貝數高達四到五個(ge) 。

• 發現22條標記染色體(ti) ，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der 3）t（3；？）等。

• Du4475細胞是致瘤的，在裸鼠體(ti) 內(nei) 具有轉移能力。

• 透射電鏡觀察顯示細胞具有大量橋粒和叉指微絨毛。

• Du4475細胞生長形態為(wei) 漂浮的簇，不能通過染料排除測試來準確測定生存能力。

• Du4475細胞形成的腫瘤組織學上與(yu) 原發癌相似。

• 同工酶：AK-1，1；S-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，2；PGM1, 1-2；PGM3，1

Du4475細胞參數表

Du4475人乳腺上皮細胞培養

細胞複蘇步驟

• 解凍: 收到細胞後應盡快進行複蘇。如果需要繼續儲(chu) 存Du4475細胞，應存放在液氮蒸汽相中，而不是-70°C。儲(chu) 存在-70°C會(hui) 導致細胞活性下降。將凍存管在37°C的水浴中輕輕搖動解凍。為(wei) 減少汙染的可能性，請保持O形圈和蓋子不接觸水。解凍應迅速（約2分鍾）。

• 消毒: 一旦細胞解凍，將凍存管從(cong) 水浴中取出，並通過浸入或噴灑70%乙醇進行消毒。從(cong) 此時起的所有操作應在嚴(yan) 格的無菌條件下進行。

• 離心: 將凍存管內(nei) 容物轉移到含有9.0 mL完全培養(yang) 基的離心管中，以約125 x g離心5至7分鍾。

• 重懸細胞: 用推薦的完全培養(yang) 基重懸細胞沉澱（見具體(ti) 批次信息以獲取推薦的培養(yang) 稀釋比例），並分裝到25 cm²或75 cm²的培養(yang) 瓶中。在細胞恢複期間，避免培養(yang) 基過度堿性。建議在加入凍存管內(nei) 容物之前，將含有完全培養(yang) 基的培養(yang) 容器置於(yu) 培養(yang) 箱中至少15分鍾，以使培養(yang) 基達到正常pH值（7.0至7.6）。

• 培養(yang) : 在37°C適宜的培養(yang) 箱中培養(yang) 。推薦使用5% CO₂的空氣環境進行培養(yang) 。

傳代步驟

• 維持培養(yang) : 可以通過補充新鮮培養(yang) 基或更換培養(yang) 基來維持Du4475細胞培養(yang) 。新培養(yang) 物應以2 x 10⁵細胞/mL建立，並維持在10⁵至10⁶細胞/mL之間。

• 培養(yang) 基更換: 每周更換2至3次培養(yang) 基。