ZR-75-30細胞（人乳腺癌細胞）

ZR-75-30人乳腺癌細胞係，來源於(yu) 一名47歲絕經前非裔美國女性患者（浸潤性導管癌），細胞樣本采集自她的惡性腹水。ZR-75-30細胞係屬於(yu) 惡性乳腺上皮細胞，已確認沒有HeLa細胞汙染。
ZR-75-30細胞係是超三倍體(ti) ，染色體(ti) 模式數目為(wei) 80，出現在約40%的細胞中。具有較高倍性（即超過模式染色體(ti) 數目）的細胞比例為(wei) 1.2%。在大多數細胞中可觀察到16條標記染色體(ti) 。ZR-75-30細胞係的轉移特性體(ti) 現在其來源的惡性腹水。

ZR-75-30細胞參數表

ZR-75-30人乳腺癌細胞培養教程

收貨處理

• 活細胞: 收到ZR-75-30細胞後，用75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶放入37°C培養(yang) 箱中穩定2-4小時，以使ZR-75-30細胞狀態穩定。

• 凍存管: 收到ZR-75-30細胞凍存管後，需立即轉入液氮凍存或直接進行複蘇操作。

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出ZR-75-30細胞凍存管，迅速放入37°C水浴中搖動，直到完全融化。

• 用75%酒精消毒凍存管外壁，在無菌操作台內(nei) 打開凍存管。

• 將ZR-75-30細胞懸液轉移至含10 ml預熱完全培養(yang) 基的離心管中，以1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，加入1 ml預熱完全培養(yang) 基重懸ZR-75-30細胞。

• 將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，加入適量完全培養(yang) 基，置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) ZR-75-30細胞。

傳代培養

• 棄去培養(yang) 上清，用PBS輕輕洗滌ZR-75-30細胞。

• 加入適量胰蛋白酶消化液，37°C消化1-2分鍾。

• 觀察ZR-75-30細胞脫落情況，加入完全培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕吹打細胞懸液，分裝到新的培養(yang) 瓶中，按1:2比例傳(chuan) 代ZR-75-30細胞。

凍存細胞

• 收集對數生長期的ZR-75-30細胞，1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，加入凍存介質（完全培養(yang) 基 + 5-10% DMSO）重懸ZR-75-30細胞。

• 將細胞懸液分裝至凍存管中，每管1-5 x 10^6細胞。

• 逐步降溫至-80°C後轉移至液氮中長期保存ZR-75-30細胞。

常見問題及解決方法

• ZR-75-30細胞增殖緩慢或停滯

• 原因: 培養(yang) 基成分不合適、培養(yang) 條件不穩定、細胞密度不適。

• 解決(jue) 方法: 使用推薦培養(yang) 基（RPMI-1640 + 20% FBS + 1% P/S），保持37°C、5% CO2的穩定培養(yang) 條件，適時傳(chuan) 代（ZR-75-30細胞密度達80%-90%時）。

  
  

• ZR-75-30細胞形態異常

• 原因: 培養(yang) 基汙染、培養(yang) 條件不適、細胞老化。

• 解決(jue) 方法: 定期檢查培養(yang) 基的pH值和汙染情況，確保培養(yang) 條件適當，及時傳(chuan) 代ZR-75-30細胞。

  
  

• ZR-75-30細胞死亡率高

• 原因: 胰蛋白酶消化時間過長、培養(yang) 基不合適。

• 解決(jue) 方法: 控製胰蛋白酶消化時間（1-2分鍾），使用新鮮培養(yang) 基，並確保無菌操作。

  
  

• ZR-75-30細胞汙染

• 原因: 操作不當或培養(yang) 基汙染。

• 解決(jue) 方法: 嚴(yan) 格無菌操作，使用經過檢測的培養(yang) 基和試劑，並定期進行支原體(ti) 檢測。

細胞純度和身份確認

• 支原體(ti) 檢測
  

• 方法: 定期進行支原體(ti) 檢測，確保ZR-75-30細胞培養(yang) 環境無支原體(ti) 汙染。

• 頻率: 每月一次或每次傳(chuan) 代前。

  
  

• 細胞形態學檢查

• 方法: 顯微鏡下觀察ZR-75-30細胞形態，確保無異常變化。

• 頻率: 每次傳(chuan) 代時。

  
  

• 基因表達分析

• 方法: 通過RT-PCR或Western Blot分析關(guan) 鍵基因和蛋白質表達，確保與(yu) ZR-75-30細胞特征一致。

• 關(guan) 鍵基因: 乳腺癌相關(guan) 基因如ER、PR、HER2等。

  
  

• 染色體(ti) 核型分析

• 方法: 進行染色體(ti) 核型分析，確認ZR-75-30細胞的染色體(ti) 數目和結構。

• 核型特征: 超三倍體(ti) ，模式染色體(ti) 數80，16條標記染色體(ti) 。