
ZR-75-1細胞(人乳腺癌細胞)
- 來源:乳腺癌;導管癌乳腺組織
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:高水平MUC-1 mRNA,低水平MUC-2 mRNA,不表達MUC-3
ZR-75-1細胞係是一種上皮細胞係,從(cong) 一位63歲白人女性的導管癌乳腺組織中分離,常用於(yu) 癌症研究。
ZR-75-1細胞係具有超三倍體(ti) 的染色體(ti) 數量,模式染色體(ti) 數目為(wei) 72,在26%的細胞中觀察到,具有1.2%的高倍體(ti) 率。ZR-75-1細胞係含有18個(ge) 標記染色體(ti) ,包括t(1q, ?)、M2、M3、del(3)(p21)、der(5)t(5;?)(q35;?)、del(6)(q21)、t(11q14q)和t。其中,M13是成對的。未檢測到正常的N14染色體(ti) ,N6為(wei) 單拷貝,X染色體(ti) 為(wei) 三拷貝,N18為(wei) 四拷貝。
ZR-75-1細胞特性特征
基因表達:ZR-75-1細胞產(chan) 生高水平的MUC-1黏蛋白mRNA,低水平的MUC-2 mRNA,但不表達MUC-3基因。
表達標記:表達雌激素受體(ti) (ER)。
同工酶:表達葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)和B型同工酶。
致瘤性:ZR-75-1細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 能夠形成腫瘤。
轉移性:ZR-75-1細胞能夠在腹水中形成轉移
ZR-75-1人乳腺癌細胞參數表
細胞名稱 | ZR-75-1細胞(人乳腺癌細胞) |
細胞別稱 | ZR751, ZR75-1, ZR75_1 |
來源 | 人;63歲女性;乳腺導管癌 |
生長特性 | 貼壁生長(不牢固);上皮細胞樣形態 |
安全等級 | 1級 |
培養條件 | 培養基:RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S;37℃,5% CO₂ |
生長周期 | 倍增時間:50-80小時;傳代周期:48-60小時 |
染色體 | 數目:67-74條(超三倍體);模式數:72(26%細胞) |
特殊染色體 | 高倍體率:1.2%;18個標記染色體,包括t(1q,?)等 |
受體表達 | 雌激素受體(ER)陽性 |
基因表達 | 高水平MUC-1 mRNA,低水平MUC-2 mRNA,不表達MUC-3 |
同工酶 | G6PD, B |
致瘤性轉移 | 在裸鼠中形成腫瘤;腹水轉移 |
動物實驗 | 植入:SC,高腋;750mm³時間:54.2天;TD:19.8天 |
激素敏感性 | 長期缺乏類固醇可能導致雌激素敏感性改變 |
蛋白表達 | GCDFP-15和GCDFP-24表達受雄激素和雌激素拮抗調控 |
細胞處理 | 貼壁不牢,到貨時飄起正常;靜置貼壁後輕柔操作 |
檢測結果 | STR鑒定通過;支原體陰性;細菌真菌檢測通過 |
其他檢測 | 內毒素檢測通過;複蘇存活率>90% |
凍存方法 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
培養教程
ZR-75-1人乳腺癌細胞培養教程
複蘇操作
從(cong) 液氮中取出凍存的ZR751細胞,迅速在37°C水浴中融化。
將細胞懸液轉移到含預熱培養(yang) 基的離心管中。
低速離心(約1000 rpm,5分鍾)去除凍存液。
棄上清,用預熱培養(yang) 基重懸ZR751細胞。
將細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中,輕輕搖勻。
細胞貼壁
初次複蘇後,ZR751細胞可能需要較長時間貼壁。
靜置培養(yang) 瓶24-48小時,以便ZR751細胞充分貼壁。
避免在複蘇後48小時內(nei) 頻繁操作,以免影響貼壁。
日常培養
換液:每2-3天更換一次培養(yang) 基。
傳(chuan) 代:ZR751細胞匯合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代,通常以1:2或1:3的比例。
傳代操作
用PBS輕柔清洗ZR751細胞1-2次。
加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-3分鍾。
輕輕拍打培養(yang) 瓶,觀察ZR751細胞是否脫落。
加入含血清的培養(yang) 基終止消化。
離心收集ZR751細胞,重懸後按比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
注意事項
操作:操作要輕柔,避免劇烈震動導致ZR751細胞脫落。
倍增時間:約為(wei) 50-80小時,根據實際生長情況調整傳(chuan) 代周期。
汙染檢測:定期進行支原體(ti) 檢測,確保ZR751細胞未被汙染。
細胞代次:建議使用低代次(10代以內(nei) )的ZR751細胞進行實驗。
凍存步驟
使用無血清凍存液。
製備ZR751細胞懸液,密度為(wei) 1-2×10^6 cells/mL。
將細胞懸液分裝到凍存管中。
使用程序降溫盒或細胞凍存容器,緩慢降溫至-80°C。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
避免細胞飄起的方法
ZR751細胞在培養(yang) 過程中容易飄起,可能影響實驗結果。以下是一些預防措施:
輕柔操作:在換液和傳(chuan) 代過程中輕柔操作,避免劇烈震動。
培養(yang) 基更換:定期更換培養(yang) 基,每2-3天換液一次。
使用貼壁促進劑:可使用膠原蛋白、纖連蛋白等貼壁促進劑。
培養(yang) 瓶選擇:使用適合貼壁細胞的培養(yang) 瓶。
不同溫度下的生長特性
標準培養(yang) 溫度:37°C,ZR751細胞生長最佳,倍增時間約為(wei) 50-80小時。
低溫影響:在32°C時,ZR751細胞生長速度減慢,代謝活動降低。
高溫影響:在40°C時,ZR751細胞可能受到熱應激,導致生長受抑或死亡。
溫度穩定性:應保持培養(yang) 箱內(nei) 溫度穩定,避免頻繁開關(guan) 培養(yang) 箱門。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 16,25 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 10 (KCLB=21500) |
10,11 (AddexBio=C0006011/4901; ATCC=CRL-1500; CCRID; CLS=300163; ECACC=87012601; PubMed=25877200; PubMed=28889351) | |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31 |
FGA | 20,22 |
Penta D | 14 |
Penta E | 7,14 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |
參考文獻
上一篇:T47D細胞(人乳腺管癌細胞)