貨號：STM-CL-5357 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

A549/DDP細胞（人肺腺癌順鉑耐藥株）

來源：肺
細胞特征：貼壁細胞 , 上皮細胞樣
培養(yang) 基：Ham's F-12K＋10% FBS＋1-2μg/ml DDP＋1% P/S
其他：A549/DDP細胞株轉染了GFP（綠色熒光）蛋白

Tags：肺腺癌順鉑耐藥株

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價(jia) 格：￥ 2,300.00

提供STR鑒定報告

A549/DDP是一種人源非小細胞肺癌耐藥細胞係，由A549細胞係經過順鉑（DDP）誘導篩選而成，對順鉑顯著的耐藥性。原始的A549細胞係來源於(yu) 一名58歲白人男性的肺腺癌組織。在A549/DDP細胞係中，繼承了A549細胞通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂的能力。

A549/DDP細胞特性特征

耐藥性：a549/ddp細胞對順鉑（DDP）具有顯著的耐藥性。
脂質代謝特征：a549/ddp細胞能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。
轉染特征：轉染了GFP（綠色熒光）蛋白，便於(yu) 熒光顯微鏡下觀察和追蹤。
蛋白質組學特征：通過比較蛋白質組學研究，A549/DDP細胞與(yu) A549細胞在蛋白表達譜上存在顯著差異。鑒定出13種差異表達蛋白質，這些蛋白與(yu) 細胞代謝、結構、解毒和DNA修複、以及信號轉導等相關(guan) 。

A549/DDP細胞參數表

細胞名稱	A549/DDP人肺腺癌順鉑耐藥株
英文名稱	A549/DDP
種屬	人（Homo sapiens）
組織來源	肺癌（肺腺癌）
細胞類型	上皮細胞
來源患者	58歲白人男性
建係者	D.J.Griad
細胞形態	上皮細胞樣，多角形，貼壁生長
熒光標記	GFP（綠色熒光蛋白）
培養基	DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S + 1000ng/ml DDP
培養溫度	37°C，95%空氣，5%二氧化碳
傳代密度	細胞密度達80%-90%時可傳代
傳代比例	首次傳代建議1:2，後續可根據生長情況調整
耐藥維持	需添加500-1000ng/ml DDP
換液頻率	每2-3天更換一次培養基
凍存液	90% FBS + 10% DMSO（無需添加DDP）
儲存溫度	液氮氣相
耐藥性	對順鉑（DDP）具有顯著耐藥性
代謝特征	能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂
倍增時間	約24-30小時
蛋白質組	與A549細胞相比存在13種差異表達蛋白
耐藥蛋白	可能涉及藥物外排、DNA修複、細胞凋亡抑製等相關蛋白
細胞鑒定	STR分型鑒定
無菌檢測	細菌、真菌、支原體檢測均為陰性
病原體檢	HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性
生物安全	二級（BSL-2）
操作要求	需在二級生物安全櫃內操作
研究領域	肺癌研究、耐藥機製研究、抗腫瘤藥物篩選、聯合用藥研究
應用限製	僅供科學研究使用，不可用於臨床
首次培養	複蘇後先用不含DDP的培養基，待細胞狀態穩定後再逐步添加DDP
觀察方法	可通過熒光顯微鏡觀察GFP表達
耐藥檢測	定期進行順鉑敏感性測試，確保耐藥性維持

培養教程

A549/DDP人肺腺癌順鉑耐藥株培養教程

複蘇步驟

快速解凍A549/DDP細胞：在37°C水浴中解凍1-2分鍾。
將細胞懸液轉移到含15ml預熱完全培養(yang) 基（不含DDP）的離心管中。
以1000rpm離心5分鍾，棄上清。
用5-10ml完全培養(yang) 基（不含DDP）重懸A549/DDP細胞。
將細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或10cm培養(yang) 皿中。
置於(yu) 37°C，5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) A549/DDP細胞。

常規培養

觀察A549/DDP細胞狀態，當細胞密度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。
使用PBS洗滌細胞1-2次。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C消化1-3分鍾。
顯微鏡下觀察A549/DDP細胞是否脫落。
添加等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基以終止消化。
以1000rpm離心5分鍾，棄上清。
用新鮮完全培養(yang) 基重懸A549/DDP細胞，按1:2或1:3比例傳(chuan) 代。

耐藥性維持

當A549/DDP細胞密度達到約8×10^5個(ge) /ml時，開始添加DDP。
初始DDP濃度設置為(wei) 0.25 μg/ml，然後逐漸增加至0.5-1.0 μg/ml。
如A549/DDP細胞生長緩慢，可適當降低DDP濃度或暫時使用不含DDP的培養(yang) 基。

注意事項

每2-3天更換一次A549/DDP細胞的培養(yang) 基。
定期檢查A549/DDP細胞的形態和生長狀況。
避免細胞過度生長或長期處於(yu) 高密度狀態。
定期進行無菌檢測和順鉑敏感性測試。
凍存A549/DDP細胞時使用無血清凍存液，不需添加DDP。

特殊處理

如果A549/DDP細胞生長狀態不佳，可暫時使用不含DDP的培養(yang) 基培養(yang) 1-2周，待細胞狀態恢複後再逐步添加DDP。

細胞生長對實驗的影響

細胞密度和傳(chuan) 代頻率：A549/DDP細胞在達到70-80%匯合度時需要傳(chuan) 代，通常每2-3天進行一次。過度生長或高密度狀態可能影響A549/DDP細胞的生理狀態及實驗結果。
耐藥性維持：維持A549/DDP細胞的順鉑耐藥性需要定期調整DDP濃度，從(cong) 500ng/ml逐步增加至1000ng/ml。細胞生長緩慢時需調整DDP濃度或暫時使用不含DDP的培養(yang) 基。
生長速度對實驗結果的影響：A549/DDP細胞的生長速度會(hui) 影響蛋白表達譜和實驗一致性，因此需要在最佳生長狀態下進行實驗。
細胞狀態監控：定期觀察A549/DDP細胞的形態和生長狀態，必要時調整培養(yang) 條件。