A427細胞（人肺癌細胞）

A-427細胞係由Giard D.J. 建立，源自一位52歲白人男性肺癌患者的腫瘤組織。A427細胞係表現出上皮細胞樣形態和貼壁生長特性，廣泛用於(yu) 肺癌尤其是肺腺癌的研究。

A427細胞參數表

A427人肺癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 將A-427細胞凍存管從(cong) 液氮中取出，迅速放入37°C水浴中快速解凍。

• 將解凍的A-427細胞懸液轉移到含4 mL預熱培養(yang) 基的15 mL離心管中。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清。

• 用1 mL新鮮培養(yang) 基重懸A-427細胞。

• 將A-427細胞懸液轉移到含5 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。

• 次日換液並檢查A-427細胞密度。

細胞傳代

• 當A-427細胞密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去舊培養(yang) 基，用PBS清洗A-427細胞1-2次。

• 加入適量胰酶，待A-427細胞變圓脫落。

• 加入2倍體(ti) 積培養(yang) 基終止消化。

• 以1000 RPM離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸A-427細胞。

• 按1:2到1:5的比例將A-427細胞分配到新的培養(yang) 瓶中。

• 添加新鮮培養(yang) 基至適當體(ti) 積。

換液頻率

• 每2-3天換液一次。

細胞凍存

• 收集處於(yu) 良好生長狀態的A-427細胞。

• 按上述步驟消化、離心A-427細胞。

• 用90%血清 + 10% DMSO的凍存液重懸A-427細胞。

• 將A-427細胞懸液分裝到凍存管中，每管細胞數大於(yu) 1×10^6個(ge) 。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80°C冰箱至少2小時。

• 轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 保持操作過程中的無菌環境。

• 定期檢查A-427細胞形態和生長狀況。

• 避免A-427細胞過度生長或密度過高。

• 定期進行支原體(ti) 檢測，確保A-427細胞未被汙染。

傳代比例對實驗結果的影響

細胞密度和生長速度：

• 高傳(chuan) 代比例（1:4）：A-427細胞密度較低，競爭(zheng) 減少，生長速度較快，但達到實驗所需密度可能需要更長時間。

• 低傳(chuan) 代比例（1:2）：A-427細胞密度較高，競爭(zheng) 增加，生長速度較慢，但更快達到實驗所需密度。

細胞狀態和活力：

• 高傳(chuan) 代比例：低密度下生長，A-427細胞健康度和活力更高，但過於(yu) 頻繁的傳(chuan) 代可能導致應激。

• 低傳(chuan) 代比例：高密度下生長，可能導致營養(yang) 競爭(zheng) 和廢物積累，A-427細胞狀態不佳，活力下降。

實驗一致性：

• 一致的傳(chuan) 代比例對於(yu) 實驗結果的可重複性至關(guan) 重要。不同的傳(chuan) 代比例可能導致A-427細胞生理狀態變化，影響實驗結果的一致性和可重複性。

溫度條件對A-427細胞生長的影響

37°C（標準條件）：

• A-427細胞生長最佳，增殖速度快，細胞形態正常，實驗結果可靠。

低於37°C：

• 35°C：A-427細胞生長減慢，代謝活動下降，細胞可能進入休眠狀態，長期培養(yang) 可能導致狀態不佳。

• 32°C：生長顯著減慢，A-427細胞周期停滯，活力下降。

高於37°C：

• 39°C：A-427細胞生長速度加快，但可能導致應激和蛋白質折疊錯誤，長期培養(yang) 可能導致細胞死亡。

• 41°C：A-427細胞生長受到嚴(yan) 重抑製，細胞可能發生凋亡或壞死。