SPC-A1細胞（人肺腺癌細胞）

SPC-A1細胞係是一種常用於(yu) 研究肺癌發病機製及抗腫瘤藥物效果的細胞株。SPC-A1細胞係來源於(yu) 人類肺腺癌，具有典型的上皮細胞形態，並以貼壁方式生長。

SPC-A1細胞特性

• SPCA1細胞中葡萄糖調節蛋白78（GRP78）的表達量較高，在多種肺癌細胞株中（如A549、H3255和SPCA1），SPCA1細胞的GRP78表達量最高

• 長期缺氧條件下，SPCA1細胞中缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）的表達增加；穀胱甘肽轉移酶π（GST-π）在長期缺氧條件下表達增加

• SPCA1細胞中存在具有癌症幹細胞特征的細胞亞(ya) 群
  

• 長期缺氧可增加SPCA1細胞對阿黴素的耐藥性，但對絲(si) 裂黴素的敏感性沒有顯著影響
  

• 下調GRP78表達可增加SPCA1細胞對吉西他濱的敏感性

SPC-A1細胞參數表

SPC-A1人肺腺癌細胞培養教程

SPC-A1細胞複蘇

• 將凍存的SPC-A1細胞管在37℃水浴中快速解凍。

• 加入4 mL 預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄上清。

• 用1-2 mL 新鮮培養(yang) 基重懸SPC-A1細胞。

• 將細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，並加入適量培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

日常培養

• 每2-3天更換一次SPC-A1細胞的培養(yang) 基。

• 當SPC-A1細胞密度達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代。

傳代步驟

• 吸出舊培養(yang) 液。

• 用2 mL PBS輕輕衝(chong) 洗SPC-A1細胞。

• 加入1 mL 0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA）。

• 將細胞置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化，直至SPC-A1細胞變圓並出現間隙。

• 加入3 mL 含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕吹打使SPC-A1細胞脫壁並形成單細胞懸液。

• 以1200 RPM離心3分鍾，棄上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸SPC-A1細胞。

• 按1:2至1:4的比例接種到新培養(yang) 瓶中。

傳代頻率

• 每周2次，根據SPC-A1細胞的生長情況調整。

SPC-A1細胞凍存

• 使用55% 基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO的凍存液。

• 將SPC-A1細胞懸液分裝到凍存管中。

• 緩慢降溫後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 進行無菌操作，避免SPC-A1細胞汙染。

• 定期檢查SPC-A1細胞的形態和生長狀況。

• 避免細胞過度生長或密度過高。

• 在使用前進行支原體(ti) 檢測，確保SPC-A1細胞未被汙染。

細胞汙染檢測方法

• 形態學觀察：使用顯微鏡觀察SPC-A1細胞形態。正常SPC-A1細胞應呈現典型的上皮細胞樣形態。如發現形態異常或不明顆粒，可能存在汙染。

• 支原體(ti) 檢測：定期進行SPC-A1細胞的支原體(ti) 檢測。正常SPC-A1細胞應為(wei) 支原體(ti) 陰性。可采用PCR、ELISA或熒光染色等方法。

• STR分析：進行短串聯重複序列（STR）分析，比對SPC-A1細胞的基因指紋。SPC-A1細胞有特定的STR譜型，與(yu) 已知譜型不符可能表明交叉汙染。

• 生長特性觀察：監測SPC-A1細胞的生長速度和傳(chuan) 代頻率。生長速度的突然變化可能指示汙染。

• 培養(yang) 基顏色變化：觀察培養(yang) 基顏色變化。異常變化（如變渾濁或變黃）可能表示SPC-A1細胞汙染，如細菌或真菌汙染。

• HeLa細胞汙染檢測：由於(yu) SPC-A1細胞可能被HeLa細胞汙染，可進行HeLa細胞標記物檢測。可以使用PCR或免疫組化方法檢測HeLa特異性標記物。

• 微生物培養(yang) ：取少量SPC-A1細胞培養(yang) 上清液進行細菌和真菌培養(yang) ，以檢測是否有微生物生長。

• 定期質量控製：建立定期的SPC-A1細胞質量控製程序，包括形態學檢查、生長曲線分析和基因表達譜分析等。