HFF細胞（人包皮成纖維細胞） （暫不提供）

HFF細胞（人包皮成纖維細胞）來源於(yu) 出生不超過1個(ge) 月的男性嬰兒(er) 包皮組織，是一種有限細胞係，廣泛應用於(yu) 生物醫學研究。HFF細胞係通過從(cong) 包皮組織中分離並培養(yang) 成纖維細胞而建立，保留了成纖維細胞的典型特征。HFF細胞在基礎生物學研究、藥物篩選、細胞生物學實驗以及組織工程等領域有廣泛應用，特別是在皮膚再生和修複研究中具有重要的應用價(jia) 值。HFF細胞係還常用於(yu) 支持胚胎幹細胞的生長和維持其未分化狀態。

HFF人包皮成纖維細胞參數表

HFF人包皮成纖維細胞培養教程

HFF細胞複蘇

• 配製適當的培養(yang) 基，推薦使用DMEM（高糖型）添加15%胎牛血清（FBS）和抗生素（如青黴素-鏈黴素），以支持HFF細胞的生長。
  

• 取出凍存的HFF細胞，將凍存管快速放入37°C水浴中解凍，時間控製在1-2分鍾內(nei) ，輕輕搖晃凍存管以加速HFF細胞的解凍。

• 解凍後，立即將HFF細胞懸液（約1 mL）轉移至含有4 mL培養(yang) 基的無菌離心管中，輕輕混勻。
  

• 在1000 rpm下離心3分鍾，棄去上清液，保留HFF細胞沉澱。

• 將HFF細胞沉澱重懸於(yu) 1-2 mL新鮮培養(yang) 基中，輕輕吹打使HFF細胞分散。
  

• 將HFF細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入適量培養(yang) 基（如8 mL），並在37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

• 第二天換液，去除殘餘(yu) 的DMSO和死細胞，同時檢查HFF細胞的貼壁情況和生長狀態。
  

• 隨後根據HFF細胞的密度和狀態定期更換培養(yang) 基。

HFF細胞傳代

• 當HFF細胞的匯合度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代操作。
  

• 先用不含鈣、鎂離子的PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗HFF細胞1-2次，去除殘留的培養(yang) 基和細胞碎片。

• 加入適量消化液（如0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液），確保消化液覆蓋HFF細胞表麵。
  

• 在顯微鏡下觀察消化情況，當HFF細胞開始變圓並輕微脫落時，輕敲培養(yang) 瓶壁，迅速加入含有FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 消化後的HFF細胞懸液轉移至無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 將HFF細胞重懸於(yu) 1-2 mL培養(yang) 基中，輕輕吹打均勻後，按1:2的比例分裝至新的培養(yang) 皿或瓶中，繼續在37°C、5% CO2條件下培養(yang) 。

HFF細胞凍存

• 收集並處理達到傳(chuan) 代標準的HFF細胞，將細胞懸液轉移至無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用PBS清洗HFF細胞一次，離心後棄去PBS，並進行HFF細胞計數。

• 根據HFF細胞計數結果，加入無血清凍存液，使HFF細胞濃度達到5×10^6至1×10^7個(ge) /mL，輕輕混勻。
  

• 將HFF細胞懸液分裝至凍存管中，標記好日期和HFF細胞信息。
  

• 將凍存管放入-80°C冰箱中進行初步凍存，24小時後將凍存管轉移至液氮罐中進行長期保存。

注意事項

• 所有操作應在無菌條件下進行，以避免HFF細胞汙染。

• 定期觀察HFF細胞的生長狀態，及時更換培養(yang) 基，以確保HFF細胞的活力。

• 傳(chuan) 代時應控製HFF細胞的傳(chuan) 代比例和時間，避免HFF細胞過度傳(chuan) 代導致性狀變化。