HDMEC細胞（人真皮微血管內(nei) 皮細胞，kaiyun网站安全）

人真皮微血管內(nei) 皮細胞（Human Dermal Microvascular Endothelial Cells，HDMEC）是從(cong) 人類皮膚真皮組織中分離得到的kaiyun网站安全，常用於(yu) 研究微血管生物學、血管生成機製及相關(guan) 疾病。真皮微血管內(nei) 皮細胞主要來源於(yu) 青少年包皮或成人皮膚的手術切除組織，分布於(yu) 真皮層的微血管和淋巴管中，具有共同的胚胎起源，並可通過多種特異性標記物鑒定。真皮位於(yu) 表皮下方，與(yu) 皮下組織相連，由膠原纖維、彈性纖維和基質構成，其複雜的纖維網絡賦予皮膚彈性與(yu) 韌性，同時包含豐(feng) 富的微血管係統。

在體(ti) 外培養(yang) 環境中，HDMEC細胞表現出與(yu) 體(ti) 內(nei) 狀態相似的生理功能，能夠模擬正常內(nei) 皮細胞的生物學特性，廣泛應用於(yu) 腫瘤血管生成、炎症反應、創麵愈合等領域的研究。與(yu) 表皮細胞和真皮成纖維細胞相比，HDMEC細胞的分離與(yu) 培養(yang) 技術相對複雜，但在揭示微血管功能及相關(guan) 疾病機製方麵具有重要價(jia) 值。

HDMEC細胞（人真皮微血管內皮細胞）特性特征

• 標記物表達：HDMEC細胞表達多種內(nei) 皮細胞特異性標記物，如vWF（血管內(nei) 皮生長因子）、CD31（P-CAM）等。

• 功能相關(guan) 分子：HDMEC細胞能夠合成和分泌前列環素、一氧化氮、內(nei) 皮源性超極化因子及內(nei) 皮素等物質，這些分子在維持血管正常功能中起著重要作用。

• 基因表達：HDMEC細胞在體(ti) 外培養(yang) 中表現出與(yu) 體(ti) 內(nei) 狀態相似的基因表達譜，參與(yu) 炎症反應、血管生成及創麵愈合等生理過程。研究表明，HDMEC細胞通過調控增殖、凋亡和老化等信號通路來維持微血管的動態平衡

原代HDMEC細胞參數表

原代HDMEC細胞（人真皮微血管內皮細胞）培養教程

細胞複蘇

• 將HDMEC細胞凍存管從(cong) 液氮中取出，迅速放入37℃水浴中解凍，輕輕搖晃確保均勻受熱。解凍時間應控製在1-2分鍾內(nei) ，以避免細胞長時間暴露於(yu) 高溫。
  

• 解凍後的HDMEC細胞懸液（約1 mL）迅速轉移至含有4 mL預熱的完全培養(yang) 基的離心管中，混合均勻後在1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用1-2 mL新鮮完全培養(yang) 基重懸HDMEC細胞，輕輕吹打以分散細胞團塊。將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，添加適量完全培養(yang) 基（10 cm培養(yang) 皿中約8 mL），置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
  

• 第二天檢查HDMEC細胞的貼壁狀態和形態，棄去培養(yang) 基並更換新鮮培養(yang) 基，之後每2-3天更換一次培養(yang) 基。

細胞傳代

• 當HDMEC細胞覆蓋培養(yang) 瓶底麵積的80%-90%時即可進行傳(chuan) 代。過密培養(yang) 可能導致細胞增殖能力下降。
  

• 棄去培養(yang) 基後，用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗細胞1-2次。加入1 mL胰酶-EDTA消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，期間密切觀察。
  

• 當HDMEC細胞多數變圓並脫落時，迅速加入完全培養(yang) 基中和胰酶，輕輕吹打使細胞完全脫離瓶壁。
  

• 在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液後用新鮮培養(yang) 基重懸細胞。以適當密度（1:2或1:3）分瓶培養(yang) ，補充完全培養(yang) 基至8-10 mL。
  

• 在傳(chuan) 代過程中應保持操作輕柔，避免細胞過度損傷(shang) ，以維持HDMEC細胞的活力和功能。

細胞凍存

• 凍存液由90%完全培養(yang) 基與(yu) 10%DMSO組成，用於(yu) 維持HDMEC細胞的冷凍存活性。
  

• 在傳(chuan) 代操作後，選擇對數生長期的HDMEC細胞，離心並棄去培養(yang) 基。
  

• 按照適當密度（1-10×10⁶ cells/mL）將細胞與(yu) 凍存液混勻，分裝入凍存管，每管約1 mL。
  

• 凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，在-80℃冰箱中以約-1℃/分鍾降溫過夜。隨後，將凍存管轉移至液氮罐中長期保存。
  

• 避免HDMEC細胞的反複凍融操作，以提高複蘇效率和功能恢複。