
M14細胞係(人黑色素瘤細胞係) (暫不提供)
- 來源:無色素性黑色素瘤;右臀部;皮下
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:M14細胞通常表達黑色素細胞特有的標誌物,如黑色素合成酶(Tyrosinase)和MITF(微小黑色素細胞轉錄因子)
M14人黑色素瘤細胞係是從(cong) 一名33歲男性患者的無色素性黑色素瘤中分離建立的,該腫瘤位於(yu) 患者右臀皮下。M14細胞株的建立來自於(yu) 手術切除的皮膚腫瘤組織,在黑色素瘤研究中具有重要價(jia) 值,特別是在藥物篩選和腫瘤生物學特性研究方麵。
M14細胞係參數表
細胞名稱 | M14細胞係(人黑色素瘤細胞係) |
細胞來源 | M14-MEL; UCLA-SO-M14; UCLASOM14; UCLA-SO-14; Melanoma14; M-14 |
種屬來源 | 人 |
年齡/性別 | 33歲/男性 |
組織來源 | 皮膚(右臀皮下的無色素性黑色素瘤) |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
倍增時間 | ~26.3小時 |
培養基 | 90% DMEM + 10% FBS + PS |
培養條件 | 95%空氣 + 5% CO2;溫度:37°C |
傳代密度 | 80%-90%時進行傳代 |
傳代比例 | 首次傳代建議1:2 |
凍存條件 | 凍存液:55%基礎培養基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮 |
支原體檢測 | 陰性 |
病原體檢測 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
運輸方式 | 複蘇發貨或幹冰冷凍發貨 |
安全性 | 需在二級生物安全台內操作 |
特別說明 | 僅供科學研究之用 |
培養操作 | 細胞收貨後需立即轉入液氮凍存或直接複蘇 |
培養教程
M14人黑色素瘤細胞係培養教程
M14細胞的複蘇
迅速將凍存管放入37°C水浴中,輕輕搖晃,直至M14細胞完全融化(約1-2分鍾)。
將融化的M14細胞轉移至含有10毫升預熱培養(yang) 基的離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾,去除凍存液。
將沉澱的M14細胞用5毫升預熱培養(yang) 基重懸,輕輕吹打均勻。
將重懸的M14細胞轉移至培養(yang) 瓶中,最終體(ti) 積為(wei) 10-15毫升。
M14細胞的傳代
當M14細胞生長至80%-90%匯合時進行傳(chuan) 代。
用PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)洗滌M14細胞以去除培養(yang) 基。
加入0.25%胰酶消化液,37°C孵育2-5分鍾,觀察M14細胞脫落情況。
加入等體(ti) 積的培養(yang) 基中和胰酶。
以1000 rpm離心5分鍾,去除消化液。
用適量培養(yang) 基重懸M14細胞,接種至新的培養(yang) 瓶中。
M14細胞的凍存
使用含有10% DMSO(冷凍保護劑)的培養(yang) 基。
將M14細胞離心後重懸於(yu) 凍存液中,細胞濃度為(wei) 1 x 10^6 cells/ml。
將M14細胞分裝至凍存管中,逐漸降溫至-80°C,隨後轉移至液氮中儲(chu) 存。
M14細胞培養速度對實驗結果的影響
M14細胞的增殖速率:
M14細胞的倍增時間約為(wei) 26.3小時,這意味著在適宜的培養(yang) 條件下,細胞數量會(hui) 迅速增加。快速增殖的M14細胞能夠在短時間內(nei) 提供足夠的細胞量用於(yu) 實驗,尤其是在藥物篩選和毒性測試中。
實驗一致性:
M14細胞的生長狀態和密度會(hui) 影響實驗的結果。例如,細胞過度擁擠可能導致細胞間相互作用的改變,從(cong) 而影響藥物的作用效果。因此,保持適當的細胞密度(通常在80%-90%匯合時傳(chuan) 代)是確保實驗一致性的關(guan) 鍵。
M14細胞活性:
M14細胞培養(yang) 速度過快或過慢都可能導致細胞活性下降。細胞在不適宜的條件下生長(如溫度、pH值、營養(yang) 物質不足等)會(hui) 導致M14細胞代謝異常,進而影響實驗結果的解讀。
信號通路的變化:
不同的生長速率可能導致M14細胞內(nei) 信號通路的激活或抑製。例如,快速增殖的M14細胞可能會(hui) 激活某些與(yu) 生長相關(guan) 的信號通路,而這些變化可能會(hui) 影響藥物反應或基因表達的結果。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D1S1656 | 11,12 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 19,24 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 14 |
D12S391 | 18,19 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 13,17 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 21 |
SE33 | 15,22 |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16,18 |