
SCaBER細胞(人膀胱鱗癌細胞)
- 來源:膀胱;鱗癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:SCaBER細胞含有不常見的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)A型同工酶,是一種罕見的生化標記
SCaBER細胞係來源於(yu) 一名58歲白人男性膀胱鱗狀細胞癌的組織。SCaBER細胞呈現出上皮樣的形態特征,並且通過貼壁方式生長,常用於(yu) 癌症研究。
SCaBER細胞係的核型為(wei) 2n=46,屬於(yu) 亞(ya) 三倍體(ti) 。細胞群中有9.2%的2S成分,常見標記染色體(ti) 包括t(1;?)del(1)(p13)、t(3;?)、i(4q)等。SCaBER細胞係中至少有一條Y染色體(ti) 可被檢測到。細胞未發現均勻染色區域(HSR)或雙分鍾(DM)。
SCaBER細胞特性特征
SCaBER細胞呈現上皮樣細胞形態、貼壁生長;
SCaBER細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 可誘發表皮樣癌;
同工酶類型:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,A;GLO-I,1-2;Me-2,2;PGM1,1-2;PGM3,1-2;
特殊同工酶: SCaBER細胞含有不常見的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)A型同工酶,是一種罕見的生化標記,增加了SCaBER細胞的特異性和研究價(jia) 值。
SCaBER細胞參數表
細胞名稱 | SCaBER細胞(人膀胱鱗癌細胞) |
細胞別稱 | SCABER, Scaber |
種屬/供體 | 人類(Homo sapiens);58歲白人男性 |
組織來源 | 膀胱鱗狀細胞癌 |
細胞特性 | 腫瘤細胞;上皮細胞樣;貼壁生長 |
安全等級 | BSL-1 |
致瘤性 | 在裸鼠體內可誘發表皮樣癌 |
同工酶類型 | AK-1,1; ES-D,1; G6PD,A; GLO-I,1-2; Me-2,2; PGM1,1-2; PGM3,1-2 |
培養基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS;或MEM(ATCC改良)+ 10% FBS + 1% P/S |
培養環境 | 37℃,95%空氣 + 5% CO2 |
傳代方法 | 1:2至1:3,每周2-3次;換液2-3次/周;消化2-3分鍾 |
凍存方法 | 介質:55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮儲存 |
標誌物表達 | 可能表達E-cadherin、Cytokeratin、p63、CK5/6等 |
基因突變 | 可能存在TP53、RB1等基因突變 |
研究用途 | 膀胱癌機製研究;藥物篩選;細胞功能研究 |
保藏信息 | ATCC;編號HTB-3 |
產品規格 | 1×10^6 cells/T25或1mL凍存管 |
培養教程
SCaBER人膀胱鱗癌細胞培養教程
SCaBER細胞的傳代步驟
準備:吸出SCaBER細胞的原培養(yang) 液。
潤洗:加入約2 mL PBS,輕輕晃動培養(yang) 瓶以潤洗SCaBER細胞,然後吸出PBS丟(diu) 棄。
消化:加入約1 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液,輕輕晃動以覆蓋所有SCaBER細胞。
觀察消化:在培養(yang) 箱中消化2-3分鍾,顯微鏡下觀察SCaBER細胞塊中間細胞變圓且有間隙時終止消化。
終止消化:加入3 mL 含血清培養(yang) 基,反複吹打使SCaBER細胞脫壁形成單細胞懸液。
離心:SCaBER細胞懸液以1200 rpm離心3分鍾,吸出上清液。
重懸:加入新鮮培養(yang) 基,吹打混勻SCaBER細胞。
接種:按1:3至1:4比例接種到新培養(yang) 瓶中,補足SCaBER細胞培養(yang) 基。
SCaBER細胞的培養維護
換液頻率: 每周2-3次
傳(chuan) 代頻率: 根據SCaBER細胞生長情況,每周2-3次
SCaBER細胞常見汙染問題
細菌汙染:
表現為(wei) SCaBER細胞培養(yang) 基渾濁、pH值下降。
預防:嚴(yan) 格無菌操作,定期更換SCaBER細胞培養(yang) 基,使用抗生素。
真菌汙染:
表現為(wei) SCaBER細胞培養(yang) 基出現絲(si) 狀或絮狀物。
預防:潔淨環境,使用抗真菌藥物如兩(liang) 性黴素B。
支原體(ti) 汙染:
影響SCaBER細胞生長與(yu) 代謝。
預防:定期檢測支原體(ti) ,使用去除試劑。
病毒汙染:
導致SCaBER細胞形態變化和生長異常。
預防:使用經過檢測的血清和培養(yang) 基。
交叉汙染:
不同細胞係之間的交叉影響實驗結果。
預防:分開處理SCaBER細胞,使用獨立培養(yang) 器具。
SCaBER細胞的凍存和複蘇步驟
SCaBER細胞的凍存步驟
準備:確保SCaBER細胞處於(yu) 對數生長期,凍存前24小時換液。
細胞收集:消化SCaBER細胞並用含血清培養(yang) 基終止。計數SCaBER細胞,確保密度為(wei) 2×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
配製凍存液:使用55%基礎培養(yang) 基、40% FBS和5% DMSO。
細胞懸液製備:將凍存液加入SCaBER細胞懸液,混勻。
分裝:將SCaBER細胞懸液1 mL/支分裝至凍存管,旋緊蓋子。
程序凍存:放入程序凍存盒中,置於(yu) -80°C過夜,然後移至液氮中保存。
SCaBER細胞的複蘇步驟
快速解凍:從(cong) 液氮中取出SCaBER細胞凍存管,放入37°C水槽中快速解凍,輕搖1分鍾。
細胞複蘇:將解凍SCaBER細胞轉移至含10 mL預熱培養(yang) 基的離心管中,1200 rpm離心3分鍾。
重懸和培養(yang) :吸出上清,加入新鮮培養(yang) 基,混勻SCaBER細胞。接種至培養(yang) 瓶中,補足SCaBER細胞培養(yang) 基。
觀察和換液:每日觀察SCaBER細胞,2-3天後換液,確保細胞恢複正常生長。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 19,21 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 15 (PubMed=11416159) |
15,17 (ATCC=HTB-3) | |
D19S433 | 10,13 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 3.2,5 |
Penta E | 7,9 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 16 |
參考文獻
上一篇:J82細胞(人膀胱移行細胞癌)