CBRH7919細胞（大鼠肝癌細胞）

CBRH7919細胞係是從(cong) Wistar大鼠的肝髒中提取的，屬於(yu) 上皮細胞類型的細胞係，專(zhuan) 門用於(yu) 肝癌研究和實驗。CBRH7919細胞係的建立是通過二乙基亞(ya) 硝胺（DEN）化學誘導肝細胞癌形成。CBRH7919細胞在形態上展現出典型的上皮細胞特征，使其適合用於(yu) 各類生物醫學研究，尤其是在肝癌免疫基因治療領域的應用。

CBRH7919細胞特性特征

• 傳(chuan) 代能力：經過化學誘導後，CBRH7919細胞係已成為(wei) 穩定的細胞係，具有無限增殖能力。

• 誘導方式：通過二乙基亞(ya) 硝胺（DEN）化學物質誘導形成肝細胞癌。
  

• 基因表達：CBRH7919細胞係可以表達多種與(yu) 肝癌相關(guan) 的基因，例如甲胎蛋白（AFP）等。

• IL-2和B7-1表達：研究表明，通過逆轉錄病毒載體(ti) 轉染後，CBRH7919細胞係能夠高效表達IL-2和B7-1基因。具體(ti) 來說，轉染後的CBRH7919/IL-2/B7-1細胞中，IL-2的表達量是未修飾細胞的190倍，而B7-1的表達量是未修飾細胞的3倍。
  

• 檢測方法：使用實時熒光定量PCR、Western blot和ELISA等方法檢測轉染後基因的mRNA和蛋白質水平，結果顯示IL-2和B7-1在轉錄和翻譯水平上均有顯著提高
  

CBRH7919細胞參數表

CBRH7919大鼠肝癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 將水浴鍋預熱至37℃。
  

• 準備含有4-6 mL完全培養(yang) 基（如RPMI-1640 + 20% FBS + 抗生素）的離心管。

• 將凍存管中的1 mL CBRH7919細胞懸液置於(yu) 37℃水浴中快速解凍，輕輕搖動以確保細胞均勻混合。
  

• 將解凍後的CBRH7919細胞懸液轉移至離心管，1000 RPM離心3-5分鍾，棄去上清液。
  

• 用1-2 mL新鮮完全培養(yang) 基重懸CBRH7919細胞，輕輕吹打以確保均勻。
  

• 將重懸的CBRH7919細胞懸液轉移至含6-8 mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中過夜。
  

• 次日，使用顯微鏡檢查CBRH7919細胞的生長狀態和密度。
  

細胞傳代

• 當CBRH7919細胞的密度達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS洗滌CBRH7919細胞1-2次，以去除殘留培養(yang) 基。
  

• 加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），在37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
  

• 觀察CBRH7919細胞狀態，若大部分細胞變圓並脫落，迅速取出並輕輕敲擊培養(yang) 瓶以終止消化，添加少量培養(yang) 基。

• 補加6-8 mL培養(yang) 基，輕輕混勻後以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 將CBRH7919細胞懸液按1:2比例分配至新的含8 mL培養(yang) 基的培養(yang) 皿或瓶中。

細胞凍存

• 配製90%完全培養(yang) 基與(yu) 10% DMSO的凍存液。
  

• 在良好生長狀態下，收集CBRH7919細胞並離心，棄去上清液。
  

• 用凍存液重懸CBRH7919細胞，並將其分裝到凍存管中。
  

• 將凍存管放入-80℃冰箱中冷凍24小時，之後轉移至液氮儲(chu) 存。