Raji細胞（人Burkitt's淋巴瘤細胞）

Raji細胞株由Pulvertaft RJV於(yu) 1963年從(cong) 一位11歲黑人男孩的左上頜骨Burkitt淋巴瘤中建立。這是第一個(ge) 從(cong) 人類造血係統中分離出來並能夠連續傳(chuan) 代的細胞係。Raji細胞是腫瘤B淋巴細胞，呈懸浮生長的淋巴母細胞樣形態，倍增時間約為(wei) 24-36小時。

Raji細胞具有46條雄性二倍體(ti) 染色體(ti) ，偶爾會(hui) 出現含有47條染色體(ti) 的細胞，額外染色體(ti) 通常屬於(yu) “E”組，且可能存在6%的多倍體(ti) 。

Raji細胞特征特性

• EBV狀態：EBNA陽性，含有Epstein-Barr病毒（EBV）
  

• 病毒抗性：對脊髓灰質炎病毒和水皰性口炎病毒具有部分抗性

• 表麵標誌物：表達B細胞特異性標誌物
  

• 病毒蛋白表達：表達EBV相關(guan) 蛋白，如EBNA（Epstein-Barr病毒核抗原）

• EBV基因組：通過PCR證實該品係檢測出愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）病毒DNA序列呈陽性。

• 腫瘤相關(guan) 基因：可能存在Burkitt淋巴瘤相關(guan) 的基因突變或重排

Raji細胞參數表

Raji細胞人Burkitt's淋巴瘤細胞培養教程

Raji細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出Raji細胞凍存管，在37℃水浴中快速解凍。

• 將Raji細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000-1200 rpm離心3-5分鍾以去除冷凍保護劑。

• 棄去上清，用新鮮培養(yang) 基重懸Raji細胞。

• 將Raji細胞轉移到T25培養(yang) 瓶中，開始培養(yang) 。

Raji細胞日常培養

• Raji細胞為(wei) 懸浮細胞，無需胰酶消化。

• 每2-3天觀察Raji細胞狀態，根據細胞密度決(jue) 定是否傳(chuan) 代。

• 保持Raji細胞密度在4×10^5 - 2×10^6 cells/mL之間。

Raji細胞傳代方法

• 方法一：直接補充新鮮培養(yang) 基稀釋Raji細胞。

• 方法二：離心收集Raji細胞，棄去舊培養(yang) 基，用新鮮培養(yang) 基重懸。

• 傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2到1:4，具體(ti) 根據Raji細胞生長狀態調整。

Raji細胞凍存

• 準備凍存液：90% FBS + 10% DMSO，或55%培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO。

• 收集對數生長期的Raji細胞，調整密度至約1×10^7 cells/mL。

• 將Raji細胞懸液與(yu) 等體(ti) 積凍存液混合。

• 分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 使用程序降溫盒或-80℃冰箱緩慢降溫，24小時後轉入液氮中長期保存。

Raji細胞培養注意事項

• 定期檢查Raji細胞的形態和生長狀態。

• 保持無菌操作，預防Raji細胞培養(yang) 中的汙染。

• 避免Raji細胞過度生長或密度過低。

• 定期進行Raji細胞活力、無菌性和表型檢測。

常見問題及解決方案

Raji細胞生長緩慢或停滯

• 原因：

• 培養(yang) 基成分不足或過期，影響Raji細胞生長。

• 培養(yang) 環境不適宜（溫度、CO2濃度、濕度）。

• Raji細胞密度過高或過低。

  
  

• 解決(jue) 方案

• 確保使用新鮮的、符合規格的培養(yang) 基。

• 檢查培養(yang) 環境，確保溫度為(wei) 37℃，CO2濃度為(wei) 5%，濕度為(wei) 70%-80%。

• 調整Raji細胞密度至4×10^5 - 2×10^6 cells/mL。

Raji細胞汙染

• 原因：

• 無菌操作不當，導致Raji細胞培養(yang) 汙染。

• 培養(yang) 基或試劑汙染。

  
  

• 解決(jue) 方案：

• 嚴(yan) 格執行無菌操作，使用無菌器具和試劑。

• 定期更換培養(yang) 基，避免長期使用同一批次培養(yang) 基。

• 對培養(yang) 基和試劑進行無菌檢測，確保Raji細胞的健康生長。

Raji細胞形態異常

• 原因：

• 培養(yang) 基成分不適宜，影響Raji細胞正常形態。

• 細胞過度傳(chuan) 代。

  
  

• 解決(jue) 方案：

• 使用優(you) 化的Raji細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基。

• 避免Raji細胞過度傳(chuan) 代，保持適當的傳(chuan) 代頻率（每2-3天傳(chuan) 代一次）。

Raji細胞活力低

• 原因：Raji細胞複蘇不當。培養(yang) 基成分不足。

  
  

• 解決(jue) 方案：

• 複蘇時快速解凍Raji細胞，在37℃水浴中不超過2分鍾。

• 確保培養(yang) 基中含有足夠的營養(yang) 成分和生長因子。