
SK-GT-4細胞(人食道癌腫瘤細胞)
- 來源:食道
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
- 其他:SK-GT-4細胞攜帶TP53、KRAS和PIK3CA等基因突變
SK-GT-4細胞株於(yu) 1989年從(cong) 一名89歲男性患者的遠端食管腺癌原發性腫瘤中建立。SK-GT-4細胞廣泛應用於(yu) 食道癌的研究,尤其是在探索其生物學特性以及針對這些基因突變的治療策略中,具有重要的臨(lin) 床和研究價(jia) 值。
SK-GT-4細胞特性特征
SK-GT-4細胞攜帶TP53、KRAS和PIK3CA基因突變
信號通路:SK-GT-4細胞可能通過PI3K/AKT信號通路調控細胞增殖和凋亡,這與(yu) 其基因突變密切相關(guan) 。
蛋白表達:研究表明,該細胞株中可能存在與(yu) 細胞增殖、遷移和侵襲相關(guan) 的蛋白質表達變化
SK-GT-4細胞參數表
細胞名稱 | SK-GT-4細胞(人食道癌腫瘤細胞) |
別稱 | SKGT4; SK4 |
建立年份 | 1989年 |
來源 | 89歲男性患者的食管遠端腺癌原發性腫瘤 |
組織來源 | 食道(Esophagus) |
細胞類型 | 腫瘤細胞(Epithelial) |
腫瘤類型 | 食道腺癌(Esophageal adenocarcinoma) |
生長特性 | 貼壁生長(Adherent) |
形態特征 | 上皮樣(Epithelial-like) |
倍增時間 | 30-35 hours (DSMZ=ACC-712) |
生物安全等級 | BSL-1 |
致瘤性 | 是,在無胸腺小鼠中致瘤 |
培養基類型 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 氣相:5% CO2,95%空氣;溫度:37℃ |
凍存條件 | 55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
傳代比例 | 1:2 至 1:6 |
換液頻率 | 每2-3天更換培養液 |
消化時間 | 3-5分鍾 |
基因突變 | TP53、KRAS、PIK3CA |
蛋白表達特征 | 與細胞增殖、遷移和侵襲相關的蛋白質變化 |
應用領域 | 癌症研究:用於食道癌的基礎研究和藥物篩選;生物標誌物探索:幫助識別與食道癌相關的生物標誌物。 |
培養教程
SK-GT-4人食道癌腫瘤細胞培養教程
收到細胞後的處理
檢查包裝:收到SKGT4細胞後,首先檢查包裝是否完好,確保無破損或漏液情況。
消毒處理:用75%酒精徹底擦拭SKGT4細胞培養(yang) 瓶表麵,以避免汙染。
細胞穩定:將SKGT4細胞瓶放入37℃的培養(yang) 箱靜置2-4小時,使細胞逐漸恢複並適應環境。
SKGT4細胞解凍步驟
將SKGT4細胞凍存管在37℃水浴中快速解凍(約2分鍾),期間輕輕晃動凍存管,但確保管口始終位於(yu) 水麵上以防止汙染。
解凍後,用70%酒精消毒SKGT4細胞凍存管表麵,將管內(nei) 液體(ti) 轉移到裝有5mL完全培養(yang) 基的離心管中。
以200×g的速度離心5-10分鍾,去除上清液,以減少冷凍保存液中的DMSO對SKGT4細胞的影響。
用預熱至37℃的完全培養(yang) 基重新懸浮SKGT4細胞,轉移至新的細胞培養(yang) 瓶中。
將SKGT4細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,使細胞在適宜的環境下生長。
SKGT4細胞傳代步驟
用吸管吸除SKGT4細胞的舊培養(yang) 基,避免細胞繼續接觸廢物代謝產(chan) 物。
用約2mL的無鈣鎂磷酸鹽緩衝(chong) 液(PBS)輕輕衝(chong) 洗SKGT4細胞,隨後棄去PBS。
加入1mL 0.25%胰蛋白酶(含EDTA)至培養(yang) 瓶,輕輕晃動使其均勻覆蓋SKGT4細胞,放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中觀察3-5分鍾,直到細胞變圓並開始脫附。
加入3mL含血清的培養(yang) 基終止胰蛋白酶作用,輕輕吹打混勻,使SKGT4細胞完全脫壁形成單細胞懸液。
以1200rpm離心3分鍾,棄去上清液,用新鮮培養(yang) 基重懸SKGT4細胞。
按1:2或1:3的比例將SKGT4細胞分裝至新的培養(yang) 瓶中,補充適量培養(yang) 基,鬆開瓶蓋或使用透氣瓶蓋,置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
SKGT4細胞凍存步驟
配製凍存液,含55%基礎培養(yang) 基、40%胎牛血清(FBS)和5%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)。
在傳(chuan) 代後的適當細胞密度下(建議≥1×10^6個(ge) SKGT4細胞),將細胞收集到離心管中。
加入適量凍存液重懸SKGT4細胞,混勻後分裝入凍存管。
將SKGT4細胞凍存管放入凍存盒中,置於(yu) -80℃冷凍箱中保存24小時後,轉移至液氮罐中長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,15 |
D2S1338 | 16,19 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 7,11 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 9,10 |
D16S539 | 11,12,13 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 9 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 17,19 |
參考文獻
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