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HPTF細胞(人胰腺腫瘤成纖維細胞SV40永生化)貨號:STM-CL-5408 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

HPTF細胞(人胰腺腫瘤成纖維細胞SV40永生化)

  • 來源:胰腺腫瘤,SV40永生
  • 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
  • 培養(yang) 基:成纖維細胞培養(yang) 基
  • 其他:HPTF細胞中引入的SV40大T抗原基因使其獲得了無限增殖的能力
Tags: 胰腺腫瘤細胞     成纖維細胞    
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價(jia) 格:¥ 2,300.00
提供細胞鑒定報告

HPTF-SV40細胞係是一種通過慢病毒介導的SV40大T抗原轉染獲得的永生化人胰腺腫瘤成纖維細胞係。HPTF細胞係來源於(yu) 手術切除的人類胰腺癌組織,通過SV40大T抗原的引入,使得這些細胞在體(ti) 外能夠長期培養(yang) ,並且具備強大的增殖能力,至少可以穩定傳(chuan) 代20代以上。HPTF-SV40細胞係特別適用於(yu) 研究胰腺癌的生物學特性,腫瘤微環境分析以及藥物篩選等科學研究領域。

HPTF細胞SV40永生化參數表

細胞名稱HPTF細胞(人胰腺腫瘤成纖維細胞SV40永生化)
細胞別稱HPTF(SV40);人胰腺癌關聯成纖維細胞永生化細胞係
來源人類胰腺癌手術切除組織
永生化方法慢病毒轉染SV40大T抗原
細胞類型永生化成纖維細胞
細胞形態長梭形,貼壁生長
傳代能力至少穩定傳代20代以上
生長特性迅速增殖,適合低血清條件
培養基成纖維細胞培養基
培養條件37℃,5% CO₂,濕度70%-80%
換液周期每2-3天
培養基體積T25瓶:10-12 mL;10 cm皿:12-15 mL
傳代比例1:2-1:4(視細胞生長速度及密度而定)
凍存條件凍存液:55%基礎培養基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮
凍存規格200-300萬細胞/mL,1 mL每管
染色體核型與kaiyun网站安全一致,46, XY, t(8;19)(q24.3;q13.1)
應用領域胰腺癌生物學特性研究、腫瘤微環境相互作用、藥物篩選等
注意事項避免長時間常溫保存,謹慎操作以防汙染

培養教程

HPTF人胰腺腫瘤成纖維細胞SV40永生化培養教程

HPTF細胞複蘇

  • 從(cong) 液氮中取出凍存管,並迅速放入37℃水浴中解凍,解凍時輕輕搖動凍存管以加速過程。

  • 解凍後,立即將HPTF細胞懸液轉移到含有4-6 mL預溫完全培養(yang) 基的離心管中,充分混合。

  • 以1000 RPM離心3-5分鍾,棄去上清液。

  • 用新鮮的完全培養(yang) 基重懸HPTF細胞,並輕輕混勻。

  • 將重懸後的HPTF細胞懸液接種到T25培養(yang) 瓶中,根據瓶型添加10-12 mL的培養(yang) 基。

  • 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂、濕度70%-80%的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

HPTF細胞傳代

  • 觀察HPTF細胞的融合度,當融合度達到70%-80%時,準備進行傳(chuan) 代。

  • 預先準備好新的培養(yang) 瓶和新鮮的培養(yang) 基。

  • 吸去舊的培養(yang) 基。

  • 用3-4 mL室溫PBS輕輕衝(chong) 洗HPTF細胞,以去除殘留培養(yang) 基。

  • 加入1 mL胰蛋白酶,輕輕搖晃培養(yang) 瓶使胰酶均勻覆蓋HPTF細胞。

  • 將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化,觀察HPTF細胞的變化。當細胞開始脫落時,立即終止消化。

  • 加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止胰酶作用,混勻後在1000 RPM下離心3-5分鍾,棄去上清液。

  • 使用新鮮培養(yang) 基重懸HPTF細胞,並根據需要將其均勻分配至新的培養(yang) 瓶中。

  • 根據HPTF細胞的生長速度和密度,通常采用1:2至1:4的傳(chuan) 代比例。

HPTF細胞凍存

  • 消化並離心後,將HPTF細胞沉澱重懸於(yu) 凍存液中。

  • 將細胞懸液分裝至標記好的凍存管中。

  • 將凍存管放入程序降溫盒中,逐步降溫至-80℃,隨後轉移至液氮罐中長期保存。

注意事項

  • 培養(yang) 基應避免長時間暴露在常溫環境,以防止HPTF細胞的汙染。

  • 胰蛋白酶處理時間應控製得當,避免過度消化導致HPTF細胞損傷(shang) 。

  • 在HPTF細胞運輸過程中,應避免劇烈振動,確保細胞的完整性。

  • 定期檢查HPTF細胞的生長狀態,確保無汙染,並觀察細胞形態和增殖情況。

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參考文獻

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