CAL62細胞係（人未分化甲狀腺癌細胞係） 

CAL-62細胞係是1988年從(cong) 一名70歲患有甲狀腺未分化癌（thyroid anaplastic carcinoma, ATC）女性患者的右側(ce) 甲狀腺組織中建立。cal62細胞以其快速增殖和顯著的致瘤性而受到廣泛關(guan) 注，倍增時間約為(wei) 24小時，使其在時間敏感的實驗中尤為(wei) 實用。

CAL-62細胞表現出獨特的單層貼壁生長模式。CAL-62細胞係是研究甲狀腺未分化癌生物學的重要模型，在癌症研究中具有顯著的應用價(jia) 值。

CAL62細胞係特性特征

• cal62細胞在異種移植裸鼠中表現出顯著的致瘤性

• cal62細胞攜帶KRAS p.G12R突變、9p21.3位點發生改變

CAL62細胞係參數表

CAL62人未分化甲狀腺癌細胞係培養教程

CAL62細胞複蘇

• 將凍存的CAL62細胞管（含有1 mL細胞懸液）從(cong) 液氮中取出，迅速放入37℃的水浴中解凍，期間輕輕搖動以均勻解凍。
  

• 準備4 mL預熱至37℃的DMEM培養(yang) 基，以便快速複蘇CAL62細胞。

• 將解凍後的CAL62細胞懸液轉移至離心管，隨後以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液，確保分離出活性良好的CAL62細胞。
  

• 向CAL62細胞沉澱中加入1-2 mL新鮮的DMEM培養(yang) 基，輕輕吹打混勻CAL62細胞，使其均勻分散。
  

• 將重懸後的CAL62細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入8 mL培養(yang) 基。
  

• 將CAL62細胞培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜，以確保CAL62細胞充分複蘇並貼壁生長。

• 第二天觀察CAL62細胞的生長情況，若細胞附著良好且密度適中，及時更換新鮮培養(yang) 液。
  

CAL62細胞傳代

• 判斷傳(chuan) 代時機：當CAL62細胞覆蓋培養(yang) 表麵的80%-90%時，進行傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 基，用不含鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液清洗CAL62細胞1-2次，以去除殘留的血清。
  

• 向培養(yang) 瓶中加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），在37℃下消化1-2分鍾，期間觀察CAL62細胞形態變化。
  

• 當CAL62細胞開始變圓並脫離培養(yang) 表麵時，立即取回操作台進行後續處理。

• 輕敲培養(yang) 瓶底部以促進CAL62細胞脫落，隨後加入含血清的培養(yang) 基中和胰蛋白酶。
  

• 將CAL62細胞懸液轉移至離心管，以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 將CAL62細胞重懸於(yu) 適量的培養(yang) 基中，按1:2或1:3比例將細胞分配至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，補加8 mL培養(yang) 基。
  

CAL62細胞凍存

• 準備凍存：選擇生長狀態良好的CAL62細胞進行凍存，以確保長期保存的細胞質量。

• 棄去培養(yang) 基後，用PBS清洗CAL62細胞，加入1 mL胰蛋白酶消化，待細胞完全脫落後，加入等體(ti) 積的含血清培養(yang) 基終止消化。
  

• 將CAL62細胞懸液轉移至離心管，以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用血清重懸CAL62細胞，使其密度達到1 x 10⁶/mL以上。
  

• 向重懸的CAL62細胞中加入適量DMSO，使終濃度達到10%，輕輕混勻。
  

• 將1 mL CAL62細胞懸液分裝入凍存管，做好標識。
  

• 將凍存管放入程序降溫盒中，以每分鍾1℃的速率降溫至-80℃，隨後轉移至液氮中長期保存CAL62細胞。
  

注意事項

• 無菌操作：所有操作均需在無菌環境下進行，以防止CAL62細胞汙染。

• 細胞觀察：應每天觀察CAL62細胞形態，確保CAL62細胞健康。健康的CAL62細胞應呈現上皮樣形態，並具有良好的折光性。

• 汙染管理：若發現CAL62細胞汙染，應立即采取措施隔離，並根據情況決(jue) 定是否廢棄汙染的CAL62細胞。