HCC1395細胞（人乳腺癌細胞）

HCC1395是一種源自43歲白人女性浸潤性導管癌的上皮細胞係，患者患有TNM I期、3級的乳腺導管癌。HCC1395細胞係最早由AF Gazdar和AK Virmani於(yu) 1994年12月14日成功建立，耗時14個(ge) 月。HCC1395細胞係可用於(yu) 廣泛的癌症研究。

HCC1395細胞係具備多倍體(ti) 特征，並展示出BRCA1 5382C突變的純合狀態。同一患者的淋巴母細胞係（HCC1395BL）則為(wei) 雜合。HCC1395細胞攜帶與(yu) 乳腺癌相關(guan) 的TP53基因獲得性突變和PTEN基因的純合缺失，顯示出與(yu) 腫瘤發生和進展密切相關(guan) 的遺傳(chuan) 特征。此外，該患者有家族性癌症史，患者母親(qin) 曾患乳腺癌，進一步表明遺傳(chuan) 因素在該病例中的重要性。HCC1395細胞的遺傳(chuan) 和表型特征使其成為(wei) 研究乳腺癌發病機製、遺傳(chuan) 易感性以及潛在治療靶點的重要模型。

HCC1395細胞特性特征

• 癌症基因：HER2/neu：陰性；p53：陽性（具有獲得性突變）
  

• 基因表達：表達上皮糖蛋白2（EGP2）；表達細胞角蛋白19；雌激素受體(ti) （ER）：陰性；孕酮受體(ti) （PR）：陰性

• TP53基因：HCC1395細胞表現出獲得性突變，並且具有野生型等位基因缺失。
  

• PTEN基因：HCC1395細胞表現出純合缺失。

• 腫瘤分期與(yu) 分級：HCC1395細胞係對應的腫瘤被分類為(wei) TNM I期，3級，顯示出較高的惡性程度。根據病理分析，34個(ge) 淋巴結轉移中無一個(ge) 。
  

• 細胞形態與(yu) 特征：HCC1395細胞係表現為(wei) 分化不良，並有空泡化現象

HCC1395細胞參數表

HCC1395人乳腺癌細胞培養教程

HCC1395細胞離心法複蘇

• 將HCC1395細胞凍存管放入37℃水浴中快速解凍，解凍時間不應超過2分鍾。
  

• 取出凍存管，用酒精擦拭消毒後帶入生物安全櫃。

• 將解凍後的HCC1395細胞懸液轉移至15ml離心管中，1000 RPM離心5分鍾。
  

• 小心去除上清液，加入適量完全培養(yang) 基輕輕重懸HCC1395細胞。

• 將重懸後的HCC1395細胞轉移至T25培養(yang) 瓶，補充培養(yang) 基至8ml左右。
  

• 輕輕搖晃培養(yang) 瓶使HCC1395細胞分布均勻，放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

不離心法複蘇

• 按照離心法同樣將HCC1395細胞凍存管在37℃水浴中快速解凍。
  

• 解凍後消毒凍存管，帶入生物安全櫃。

• 將解凍後的HCC1395細胞懸液直接轉移至T25培養(yang) 瓶中，輕輕搖晃均勻。
  

• 接種後，16小時內(nei) 不更換培養(yang) 基。16小時後，更換培養(yang) 基以去除DMSO和其他代謝廢物，繼續在37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

HCC1395細胞傳代

• HCC1395細胞通常在80%-90%融合時進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4。

• 預熱的完全培養(yang) 基
  

• 棄去HCC1395細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，加入2-3ml DPBS輕柔洗滌細胞，以去除殘留的血清。
  

• 加入1ml胰酶溶液，放置於(yu) 室溫或37℃培養(yang) 箱中，直至HCC1395細胞開始從(cong) 瓶壁脫落（約2-3分鍾）。
  

• 觀察HCC1395細胞是否完全脫落，若脫落不足可輕輕敲擊培養(yang) 瓶，加速細胞脫落。

• 加入3-4ml完全培養(yang) 基終止胰酶作用，輕輕吹打混勻懸浮HCC1395細胞。
  

• 將HCC1395細胞懸液轉移至離心管中，1000 RPM離心5分鍾，棄去上清。
  

• 加入適量完全培養(yang) 基重懸HCC1395細胞。

• 將重懸後的HCC1395細胞按比例分裝至新的T25培養(yang) 瓶，補充完全培養(yang) 基至8ml，輕輕搖晃均勻。
  

• 放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ，定期檢查HCC1395細胞狀態。

HCC1395細胞凍存

• 按傳(chuan) 代步驟進行消化處理，收集脫落的HCC1395細胞。
  

• 將收集的HCC1395細胞用凍存液重懸，確保細胞懸液均勻混合。
  

• 將HCC1395細胞懸液分裝至凍存管，每管約1ml。
  

• 將凍存管先置於(yu) -80℃冰箱中預凍24小時，再轉移至液氮罐中長期保存。