HCC1187細胞（人乳腺癌細胞）

HCC1187細胞是一種源自乳腺導管腺癌的細胞係，分離自一位41歲白人女性導管癌TNM IIA期3級患者腫瘤組織。HCC1187細胞係的建立始於(yu) 1994年，並在經過約4.5個(ge) 月的培養(yang) 和篩選後成功獲得，主要用於(yu) 乳腺癌相關(guan) 的基礎和臨(lin) 床研究。尤其是在研究腫瘤生物學特性及其對藥物的反應機製方麵具有重要價(jia) 值。HCC1187細胞表現出上皮樣形態，其生長特性為(wei) 貼壁與(yu) 懸浮混合型。

HCC1187細胞特性特征

• 癌基因表達:HER2/neu：陰性、p53：陽性（過表達）；

• 上皮標記物:上皮糖蛋白2（EGP2）：陽性、細胞角蛋白19：陽性、激素受體(ti) 表達:、孕酮受體(ti) （PR）：陰性；

• HCC1187細胞具有多倍性，顯示出多個(ge) 倍性指數，細胞群體(ti) 內(nei) 的遺傳(chuan) 多樣性較為(wei) 顯著。

• 來自同一患者的EB病毒轉化的淋巴母細胞係（HCC1187BL）也可用於(yu) 進一步的對比研究
  

HCC1187細胞參數表

HCC1187人乳腺癌細胞培養教程

HCC1187細胞的複蘇

• 將凍存的HCC1187細胞在37°C水浴中快速解凍，直到凍存管中隻剩少量冰塊為(wei) 止。此過程應盡量快速完成，以避免細胞長時間暴露於(yu) 溫度變化中。

• 用無菌移液管將解凍後的HCC1187細胞懸液轉移至15 mL離心管中，緩慢加入5 mL預溫的完全培養(yang) 基（RPMI-1640培養(yang) 基，補充10%胎牛血清（FBS）和1%青黴素/鏈黴素（P/S）），輕輕混勻。

• 在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。然後加入2 mL完全培養(yang) 基，用移液槍輕輕吹打HCC1187細胞，使其成為(wei) 單細胞懸液。

• 將HCC1187細胞懸液接種到一個(ge) T25培養(yang) 瓶中，加入完全培養(yang) 基至總體(ti) 積為(wei) 10 mL。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中孵育。

HCC1187細胞的常規傳代

• 由於(yu) HCC1187細胞係具有貼壁和懸浮混合型的生長方式，處理時需要同時注意這兩(liang) 類細胞：

• 當HCC1187細胞匯合度達到80-90%時，應進行傳(chuan) 代。

• 收集懸浮HCC1187細胞：先收集培養(yang) 基中的懸浮HCC1187細胞，將其轉移到離心管中，1000 rpm離心4分鍾，保存細胞顆粒。

• 處理貼壁HCC1187細胞：棄去剩餘(yu) 培養(yang) 基，用無菌PBS洗滌貼壁HCC1187細胞2次，以去除殘留的血清和代謝產(chan) 物。加入適量的0.25%胰酶-EDTA溶液，置於(yu) 37°C孵育2-3分鍾，直到HCC1187細胞層開始從(cong) 瓶壁脫落。

• 製備單細胞懸液：加入等量的完全培養(yang) 基終止消化過程，將胰酶消化後的貼壁HCC1187細胞與(yu) 之前收集的懸浮細胞混合，用移液槍輕輕吹打使其成為(wei) 單細胞懸液。

• 根據實驗需求，按1:2到1:6的比例將HCC1187細胞懸液重懸在預溫的完全培養(yang) 基中。

• 將重懸後的HCC1187細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，加入足量完全培養(yang) 基至適當體(ti) 積，繼續在37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中孵育。

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基，確保HCC1187細胞營養(yang) 供給充足。在換液時注意不要丟(diu) 失懸浮細胞，需先收集懸浮HCC1187細胞，離心後再與(yu) 貼壁細胞一同處理。

HCC1187細胞的凍存

• 取處於(yu) 對數生長期的HCC1187細胞，用胰酶消化並離心，棄去上清液，製備成單細胞懸液。

• 將HCC1187細胞重懸於(yu) 凍存液中，凍存液的配方為(wei) 60% RPMI-1640培養(yang) 基，30%胎牛血清（FBS），10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO），並將HCC1187細胞密度調整為(wei) 1-2×10⁶ cells/mL。

• 將HCC1187細胞懸液分裝到凍存管中，確保每管中含有適量HCC1187細胞懸液。

• 將凍存管放入-80°C冰箱中過夜，以慢速冷凍HCC1187細胞。次日將凍存管轉移至液氮罐中，進行長期保存。