BT483細胞（人乳腺導管癌細胞）

BT483細胞係是由E.Y. Lasfargues和W.G. Coutinho於(yu) 1978年建立的，來源於(yu) 一名23歲正常月經期且有乳腺癌家族史的女性患者。該患者患有浸潤性導管乳腺癌，細胞係是從(cong) 其腫瘤組織中分離並進行體(ti) 外培養(yang) 後生成的。BT483細胞係為(wei) 乳腺癌的研究提供了重要的模型。

BT483細胞的核型分析顯示其模態數為(wei) 72，範圍在46到130之間。被廣泛應用於(yu) 乳腺癌的基礎研究以及藥物篩選。

BT483細胞特性特征

• 多形性：BT-483細胞具有高度的多形性，表現為(wei) 細胞核和核仁突出。

• 上皮特征：通過透射電子顯微鏡觀察，BT-483細胞呈現出典型的上皮細胞特征，包括橋粒、微絨毛、緊密連接和間隙連接。

• 致瘤性：BT483細胞在裸鼠身上能夠形成腫瘤，顯示出其致瘤性。

• BT-483細胞表達多種同工酶：AK-1，1；ES-D，1-2；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，0；PGM1，2；PGM3，2

• BT-483細胞係高度表達孕激素受體(ti) ，但未檢測到α-乳清蛋白的產(chan) 生。
  

• 在藥物研究中發現，薑黃素對BT483細胞具有時間和劑量依賴性的抗生長作用，同時CDK4和MMP1 mRNA在細胞內(nei) 的表達降低。

BT483細胞參數表

BT483人乳腺導管癌細胞培養教程

細胞複蘇步驟

• 將 BT483細胞 的凍存管從(cong) 液氮罐中取出，放置於(yu) 37℃水浴中快速搖晃解凍，大約2分鍾。
  

• 解凍後，用70%酒精消毒管外部，避免汙染。

• 將解凍的 BT483細胞 懸液轉移至離心管，加入5 mL完全培養(yang) 基。
  

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液，保留沉澱的 BT483細胞。

• 用1-2 mL預熱至37℃的完全培養(yang) 基重懸 BT483細胞。
  

• 將重懸的 BT483細胞 移至培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

細胞傳代步驟

• 當 BT483細胞 密度達到80%-90%時，需進行傳(chuan) 代操作。使用倒置顯微鏡檢查 BT483細胞 的生長狀態。
  

• 衝(chong) 洗細胞：棄去舊培養(yang) 基，用不含鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗 BT483細胞 1-2次。

• 消化細胞：加入0.25%胰蛋白酶-EDTA（0.53 mM EDTA）混合消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾。

• 觀察 BT483細胞 逐漸變圓並從(cong) 瓶壁上脫落。

• 終止消化：加入適量完全培養(yang) 基終止消化，並輕輕敲擊培養(yang) 瓶，以懸浮 BT483細胞。

• 用6-8 mL完全培養(yang) 基混勻細胞懸液，在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。

• 分瓶：將 BT483細胞 懸液按1:2的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中，補加8 mL完全培養(yang) 基，繼續培養(yang) 。

四、細胞凍存步驟

• 凍存液配製：準備90%完全培養(yang) 基和10%DMSO的混合溶液作為(wei) BT483細胞的凍存液。

• 在傳(chuan) 代過程中，使用計數板計數 BT483細胞，確保每管凍存的 BT483細胞密度為(wei)

• $1 \times 10^6$1×106 cells/mL。將 BT483細胞 與(yu) 凍存液充分混合。

• 裝管與(yu) 標記：每支凍存管中加入1 mL BT483細胞 懸液，標明細胞係名稱、日期及濃度。

• 降溫與(yu) 保存：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，緩慢降溫至-80℃保存24小時，然後轉移至液氮罐中長期保存。