AU565細胞係（人乳腺癌細胞係）

AU565細胞係是一種上皮樣人乳腺癌細胞，從(cong) 一名43歲高加索女性的乳腺浸潤性導管癌患者的胸腔積液中分離。AU565細胞係因其HER2/neu癌基因的過表達特性，常被用於(yu) 乳腺癌相關(guan) 的基礎研究和藥物篩選。與(yu) SK-BR-3細胞係一樣，AU565細胞係也是從(cong) 同一名患者的樣本中獲得。患者本身接受過放射治療、類固醇、環磷酰胺以及5-氟尿嘧啶的治療，血型為(wei) A+。AU565細胞可用作研究癌症細胞分化的細胞生長模型，應用於(yu) HER2/neu相關(guan) 的腫瘤研究，尤其是在藥物研發和靶向治療領域。

AU565細胞係特性特征

癌基因表達

• HER2/neu：過度表達，屬於(yu) HER2陽性細胞係。

• HER3和HER4：也呈陽性表達。

• p53：該基因在AU565細胞中也表達。

其它表達

• 轉移性：AU565細胞係來源於(yu) 胸腔積液，具有轉移特性。

• 標記物表達：表達表皮生長因子（EGF），這與(yu) 腫瘤的生長和分化相關(guan) 。

AU565細胞可以通過多種方法誘導分化

• 使用黴酚酸（MPA）、佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯（PMA）、視黃酸（RA）或針對HER-2/neu蛋白的TA-1單克隆抗體(ti) 處理。

• 使用Neu分化因子（NDF）處理可誘導成熟表型，其特征是細胞形態的變化，從(cong) 緊湊的細胞核和較薄的胞質轉變為(wei) 扁平的細胞核

AU565細胞係參數表

AU565人乳腺癌細胞係培養教程

收貨及初步處理

• 狀態檢查：收到AU565細胞後，首先檢查包裝和培養(yang) 瓶的完整性，確保沒有漏液或汙染情況。如發現問題，及時記錄並拍照留證。

• 培養(yang) 準備：去除封口膜，將AU565細胞培養(yang) 瓶直接置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中靜置2-4小時，使細胞適應環境，恢複穩定狀態。

• 更換培養(yang) 基：棄去原有運輸中的培養(yang) 基，加入6 mL RPMI-1640培養(yang) 基（含10%胎牛血清），輕輕混勻後，繼續在37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

AU565細胞複蘇

• 迅速將凍存管（含1 mL AU565細胞懸液）從(cong) 液氮中取出，並立即置於(yu) 37℃水浴中，保持搖晃解凍，整個(ge) 過程不應超過2分鍾。
  

• 解凍後，用4 mL預熱的完全培養(yang) 基稀釋AU565細胞懸液，輕輕混勻。

• 將稀釋後的AU565細胞懸液在1000 rpm下離心3-4分鍾，以去除DMSO和其他殘留物。
  

• 棄去上清液，注意避免吸取AU565細胞沉澱。

• 加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打AU565細胞，確保其均勻分布。
  

• 將重懸後的AU565細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中，加入適量的培養(yang) 基（如8 mL），並置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。培養(yang) 基的體(ti) 積應根據培養(yang) 瓶大小適量調整。
  

AU565細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機：當AU565細胞密度達到80%-90%時，需要進行傳(chuan) 代，以確保細胞繼續保持良好的生長狀態。

• 棄去舊的培養(yang) 基，用不含鈣、鎂的PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）清洗AU565細胞1-2次，去除殘留培養(yang) 基和代謝廢物。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，輕輕搖晃培養(yang) 瓶，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
  

• 在顯微鏡下觀察AU565細胞是否變圓、脫落。當大部分細胞開始鬆散時，迅速輕敲瓶壁，加入適量的完全培養(yang) 基終止消化反應。

• 將細胞懸液在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 加入6-8 mL完全培養(yang) 基重懸AU565細胞，根據實際需要按1:2的比例進行傳(chuan) 代。

• 將重懸後的AU565細胞分裝至新的培養(yang) 瓶中，按需求加入適量培養(yang) 基（如T25瓶中加入8 mL），繼續在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
  

AU565細胞凍存

• 凍存時機：當AU565細胞生長狀態良好且需要長期保存時，建議進行凍存。

• 棄去培養(yang) 基，用PBS清洗AU565細胞1次。
  

• 加入1 mL胰蛋白酶消化AU565細胞，待細胞變圓脫落時，加入1 mL含10%胎牛血清的培養(yang) 基終止消化。

• 在1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 加入凍存液（90%胎牛血清+10%DMSO），輕輕混勻，確保AU565細胞分散均勻。

• 每支凍存管加入1 mL AU565細胞懸液，並做好詳細標識，包括細胞係名稱、凍存日期、傳(chuan) 代次數等。
  

• 將凍存管放入程序降溫盒中，逐漸降低溫度至-80℃，之後可轉移至液氮中長期保存。