
MCF-7Adr細胞(人乳腺癌阿黴素耐藥細胞株MCF7亞(ya) 株)
- 來源:浸潤性導管癌;胸腔積液轉移
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+500ng/mL ADR+1% P/S
- 其他:MCF-7Adr細胞株表達WNT7B癌基因;阿黴素耐藥細胞株
MCF-7Adr是一種從(cong) MCF-7細胞衍生的阿黴素(Adriamycin,ADR)耐藥人乳腺癌細胞株。通過對MCF-7細胞進行阿黴素藥物誘導和篩選,最終獲得了這一耐藥亞(ya) 株。MCF-7Adr細胞能夠在500ng/mL的阿黴素環境下生存並穩定傳(chuan) 代。
MCF-7/Adr細胞株源自人乳腺癌細胞係MCF-7。MCF-7細胞係最初從(cong) 一名69歲乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立,患者為(wei) 白人女性,患有乳腺腺癌。MCF-7細胞在體(ti) 外培養(yang) 中保留了多個(ge) 乳腺上皮的分化特性,如通過胞質雌激素受體(ti) 加工雌二醇,並在培養(yang) 中形成隆突結構(domes)。
MCF-7Adr細胞特性特征
生長特性: MCF-7/Adr細胞能夠在500ng/mL的阿黴素環境中存活並穩定傳(chuan) 代,顯示出對阿黴素的耐藥性。
激素受體(ti) : MCF-7細胞表達雌激素受體(ti) (ER),能夠通過胞質雌激素受體(ti) 加工雌二醇,顯示出激素依賴性特征。
癌基因表達: MCF-7細胞株表達WNT7B癌基因,可能與(yu) 細胞的增殖和生存相關(guan) 。
細胞因子: 腫瘤壞死因子α(TNF-α)能夠抑製MCF-7細胞的生長,提示其在細胞生長調控中的重要性。
基因表達: MCF-7細胞在抗雌激素處理後能夠調節胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBP)的分泌,反映出其在生長因子信號傳(chuan) 導中的作用。
增殖特性: MCF-7細胞通常以鬆散的三維團簇形式出現,生長速度較慢,通常需要6-12天才能達到80%的生長密度。
MCF-7Adr細胞參數表
細胞名稱 | MCF-7Adr細胞(人乳腺癌阿黴素耐藥細胞株MCF7亞株) |
別稱 | MCF-7/ADR; MCF7-ADR |
細胞來源 | 人乳腺癌細胞MCF-7經阿黴素(ADR)誘導篩選獲得的耐藥細胞株 |
種屬 | 人 |
性別/年齡 | 女/69歲 |
組織來源 | 乳腺,分離自轉移灶:胸腔積液 |
細胞類型 | 上皮細胞樣 |
形態學 | 貼壁生長,通常以鬆散的三維團簇形式出現 |
生長方式 | 貼壁 |
生物安全等級 | 1級 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 雙抗 + 0.01 mg/mL 重組人胰島素 + 500 ng/mL ADR |
培養條件 | 37°C, 95%空氣 + 5% CO2 |
消化方法 | 0.25% Trypsin - 0.53 mM EDTA |
倍增時間 | 通常需要6-12天達80%匯合度 |
運輸條件 | 常溫(活細胞),幹冰(凍存管) |
保存方式 | 37°C恒溫細胞培養箱(活細胞),-80°C冰箱保存後轉入液氮(凍存管) |
耐藥性 | 能在500 ng/mL的阿黴素環境中存活並穩定傳代 |
激素受體 | 表達雌激素受體(ER),顯示出激素依賴性特征 |
癌基因表達 | 表達WNT7B癌基因 |
細胞因子 | TNF-α可抑製細胞生長 |
基因表達 | 抗雌激素處理後調節胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBP)分泌 |
使用限製 | 僅供科研使用,禁止用於人體或臨床 |
培養教程
MCF-7Adr人乳腺癌阿黴素耐藥細胞株MCF7亞株培養教程
MCF7-ADR細胞複蘇
將凍存的MCF7-ADR細胞迅速放入37℃水浴中融化,確保凍存管蓋子始終在液麵上方,以避免汙染。輕輕搖動凍存管以加速融化,但切勿使用渦旋混合器。
融化後,用70%酒精擦拭凍存管外壁,確保操作環境的無菌性。
將MCF7-ADR細胞懸液轉移至離心管中,以500g離心2-5分鍾,棄去上清液。
向離心後的MCF7-ADR細胞中加入適量不含藥物的完全培養(yang) 基,輕輕混勻,使細胞重懸。
將重懸後的MCF7-ADR細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中,標記細胞株名稱和日期。
MCF7-ADR細胞培養
將培養(yang) 瓶中的MCF7-ADR細胞放入37℃、5% CO2的培養(yang) 箱中,靜置48-72小時,以確保細胞貼壁。
定期觀察MCF7-ADR細胞的生長狀態,通常MCF7-ADR細胞會(hui) 以鬆散的三維團簇形式出現。
當MCF7-ADR細胞密度達到80%匯合度時,準備進行傳(chuan) 代操作。
MCF7-ADR細胞傳代
用PBS洗滌MCF7-ADR細胞,去除培養(yang) 基殘留。
加入適量0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液,輕輕搖動培養(yang) 瓶,使其均勻分布於(yu) MCF7-ADR細胞表麵。
將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中,觀察MCF7-ADR細胞脫落情況,通常需要2-5分鍾。
細胞脫落後,加入完全培養(yang) 基以中和胰蛋白酶,輕輕吹打混勻MCF7-ADR細胞。
以500g離心2-5分鍾,棄去上清液。
將MCF7-ADR細胞重懸於(yu) 新的培養(yang) 基中,轉移至新的培養(yang) 瓶進行培養(yang) 。
MCF7-ADR細胞藥物處理
藥物準備:阿黴素(ADR)溶液,配製成500 ng/mL的工作液。
在MCF7-ADR細胞傳(chuan) 代1-2次後,向培養(yang) 基中加入400 ng/mL的阿黴素,繼續培養(yang) 至細胞完全匯合。
如果MCF7-ADR細胞狀態良好,可以逐步將阿黴素濃度增加至500 ng/mL。
如果發現MCF7-ADR細胞增殖減緩或停止,應降低藥物濃度,或短期使用不含藥物的培養(yang) 基,以恢複MCF7-ADR細胞的增殖狀態,之後再逐漸恢複藥物濃度。
MCF7-ADR細胞凍存
收集並離心MCF7-ADR細胞,棄去上清液。
加入預冷的凍存液,輕輕混勻。
將MCF7-ADR細胞懸液分裝至凍存管中,標記細胞株名稱和凍存日期。
將凍存管放置在-80℃冰箱中過夜,隨後轉移至液氮罐中長期保存。
注意事項
在所有操作過程中,保持無菌操作以防止MCF7-ADR細胞汙染。
細胞複蘇後,建議至少進行3次傳(chuan) 代以確保MCF7-ADR細胞狀態穩定。
定期監測MCF7-ADR細胞的生長狀態,並根據需要調整培養(yang) 條件和藥物濃度。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 19,23 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 14,16 |
D21S11 | 28 |
FGA | 20 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
上一篇:JIMT-1細胞(人乳腺癌細胞)