
HCC70細胞(人乳腺導管癌細胞)
- 來源:乳腺導管癌
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:HCC70細胞是一種三陰性乳腺癌細胞係,雌激素受體(ti) (ER)陰性、孕激素受體(ti) (PR)陰性、人表皮生長因子受體(ti) 2(HER2)陰性
HCC70細胞係是在1992年從(cong) 一位49歲非洲裔美國女性的原發性浸潤性導管乳腺癌中分離。該腫瘤被歸類為(wei) TNM IIIA期,屬於(yu) 三級浸潤性導管癌,伴有17個(ge) 淋巴結中4個(ge) 轉移的特征。建立HCC70細胞係的過程曆時44個(ge) 月。
HCC70細胞係具有上皮細胞特性。盡管HCC70細胞曾被報道為(wei) 雌激素受體(ti) 陽性,但一些最新的研究對這一結果提出了相互矛盾的結論,雌激素受體(ti) 的確切狀態仍在進一步評估中。
HCC70細胞特性特征
HCC70細胞核大、染色質致密、核仁明顯
電鏡下可見大量遊離核糖體(ti) 、粗麵內(nei) 質網、高爾基複合體(ti) 和少量線粒體(ti)
HCC70是一種三陰性乳腺癌細胞係,即雌激素受體(ti) (ER)陰性、孕激素受體(ti) (PR)陰性和人表皮生長因子受體(ti) 2(HER2)陰性
對上皮細胞特異性標記物上皮糖蛋白2(EGP2)和細胞角蛋白19呈陽性
- HCC70細胞表現為多倍體,過表達腫瘤抑製基因p53,但不表達Her2/neu癌基因
HCC70細胞參數表
細胞名稱 | HCC70細胞(人乳腺導管癌細胞) |
細胞別稱 | HCC-70; HCC70; HCC0070; HamonCancerCenter70 |
細胞來源 | 從一位49歲的非洲裔美國女性的原發性浸潤性導管癌中分離 |
腫瘤分類 | TNM IIIA期,3級,浸潤性導管癌 |
細胞形態 | 上皮樣,貼壁生長 |
細胞特性 | 多倍體,分化不良 |
基因特征 | 過表達p53,HER2/neu陰性 |
標記物表達 | EGP2(陽性),細胞角蛋白19(陽性) |
雌激素受體 | 呈陰性(曾被報道呈陽性) |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 |
傳代方法 | 1:2至1:3傳代,每周換液2-3次 |
細胞濃度 | 1×10^6 cells/T25培養瓶 |
保存條件 | 液氮或-80°C冰箱 |
細胞活力 | 高活力,代數低 |
細胞鑒定 | STR鑒定和基因突變測序 |
凍存條件 | 凍存液:55%基礎培養基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
培養教程
HCC70人乳腺導管癌細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮罐或-80°C冰箱中取出凍存的HCC70細胞管,迅速放入37°C水浴中,輕輕搖晃,直至HCC70細胞完全複蘇。
使用移液管將複蘇後的HCC70細胞懸液轉移至含有預熱RPMI-1640培養(yang) 基(含10%胎牛血清FBS和1%青黴素-鏈黴素)的離心管中,混勻。
將HCC70細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中,放置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。
常規傳代
當HCC70細胞達到90%匯合時,吸棄培養(yang) 基,用PBS洗滌細胞兩(liang) 次。
加入0.25%胰酶-EDTA溶液,在37°C下消化3-5分鍾,直至HCC70細胞變成單個(ge) 圓形。
使用含有血清的培養(yang) 基終止消化反應,輕輕吹打HCC70細胞以形成單細胞懸液。
根據需要,以1:2至1:4的比例將HCC70細胞接種於(yu) 新的培養(yang) 瓶中,並加入適量的預溫培養(yang) 基。
將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) ,每2-3天更換一次培養(yang) 基,直到HCC70細胞再次鋪滿瓶底。
凍存
收集對數生長期的HCC70細胞,離心後棄去上清液。
用凍存液(由50%培養(yang) 基、40%胎牛血清FBS和10%二甲基亞(ya) 碸DMSO組成)重懸HCC70細胞,將細胞濃度調整至1-2×10^6 cells/ml。
將HCC70細胞懸液分裝至凍存管中,置於(yu) -80°C冰箱中過夜。
次日,將凍存管轉入液氮罐中保存,以備後續使用。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 (KCLB=9S0070) |
10,14 (ATCC=CRL-2315; Cosmic-CLP=907048; Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20679594; PubMed=25877200; PubMed=28889351) | |
D1S1656 | 14 |
D2S441 | 11 |
D2S1338 | 23,25 (Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
25 (ATCC=CRL-2315; Direct_author_submission) | |
D3S1358 | 16 (KCLB=9S0070) |
16,17 (ATCC=CRL-2315; Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
D5S818 | 12,13 (ATCC=CRL-2315; Cosmic-CLP=907048; Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; KCLB=9S0070; PubMed=20679594; PubMed=28889351) |
13 (PubMed=25877200) | |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 15,19 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 (ATCC=CRL-2315; Cosmic-CLP=907048; Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; PubMed=28889351) |
13 (PubMed=20679594; PubMed=25877200) | |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 12.2,15.2 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 14 |
FGA | 19.2,24 (ATCC=CRL-2315; Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
24 (KCLB=9S0070) | |
Penta D | 10 |
Penta E | 9,16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 9,10 (Direct_author_submission; Technion Genomics Center BCF; PubMed=20679594; PubMed=25877200) |
10 (ATCC=CRL-2315; Cosmic-CLP=907048; KCLB=9S0070; PubMed=28889351) | |
vWA | 13,15 |
參考文獻
下一篇:JIMT-1細胞(人乳腺癌細胞)