
MDA-kb2細胞(人乳腺癌細胞係)
- 來源:乳腺
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:通過轉染MMTV熒光素酶neo報告基因構建
MDA-kb2細胞是源自於(yu) 乳腺癌細胞係MDA-MB-453,最初是通過穩定轉染小鼠乳腺病毒(MMTV)熒光素酶neo報告基因構建的。MDA-kb2細胞的原始來源是從(cong) 一位48歲的白人女性乳腺癌患者的乳房樣本中分離出來,特別適用於(yu) 研究人類雄激素受體(ti) (AR)和糖皮質激素受體(ti) (GR)的內(nei) 分泌活性。
MDA-kb2細胞係對雄激素受體(ti) 激動劑如二氫睾酮以及糖皮質激素受體(ti) 激動劑如地塞米鬆、皮質酮和醛固酮的響應穩定且可靠,在長達80多次傳(chuan) 代的時間內(nei) 保持其反應性。
MDA-kb2細胞特性
MDA-kb2細胞用於(yu) 研究人類雄激素受體(ti) (AR)和糖皮質激素受體(ti) (GR)的內(nei) 分泌活性
基因表達:螢光素酶,在MMTV啟動子的控製下表達,含有AR和GR的反應元件
表達標記:AR和GR,陽性
實驗應用:通過MMTV啟動子激活螢光素酶報告子,用於(yu) 評估雄激素受體(ti) 和糖皮質激素受體(ti) 介導的化合物活性
反應性穩定性:在80多次傳(chuan) 代中保持穩定
構建方式:通過轉染MMTV熒光素酶neo報告基因構建
MDA-kb2細胞參數表
中文名稱 | MDA-kb2細胞(人乳腺癌細胞係) |
別稱 | MDA-kb2;人正常乳腺細胞;MDAKB2;MDA kb2;mda; |
組織來源 | 乳腺 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
腫瘤類型 | 乳腺癌細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
培養環境 | 空氣95%,CO2 5%,37℃ |
凍存條件 | 55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮; 或 90% FBS + 10% DMSO,液氮 |
完全培養基 | DMEM (PM 150210) + 10% FBS (164210-50) + 1% P/S (PB 180120) |
推薦培養基 | Leibovitz's L-15培養基 + 10% FBS + 1%雙抗 |
傳代比例(密度) | 1:2-1:5 |
換液頻次 | 2-3次/周 |
細胞背景描述 | 來源於乳腺癌細胞係MDA-MB-453,通過穩定轉染小鼠乳腺腫瘤病毒(MMTV)熒光素酶neo報告基因構建 |
倍增時間 | 32-40小時 |
生物安全等級 | 1 |
基因表達 | luciferase; The cell line expresses firefly luciferase under control of the MMTV promoter that contains response elements for both glucocorticoid receptors (GR) and androgen receptors (AR) |
細胞保藏中心 | ATCC; CRL-2713 |
細胞代數 | 10代以內 |
支原體檢測 | 無 |
產品用途 | 僅限於科學研究 |
培養教程
MDA-kb2人乳腺癌細胞培養教程
解凍細胞
將MDA-kb2細胞的凍存管放入37°C水浴中快速解凍,輕輕搖勻,避免劇烈震動。
立即將解凍的細胞懸液轉移到15ml離心管中,緩慢加入4ml預熱的完整培養(yang) 基(如DMEM/F-12)並輕輕混合。
在1000rpm條件下離心4分鍾以沉澱細胞,去除上清液。
潤洗細胞:將細胞沉澱用預熱的PBS潤洗一次,去除PBS。
初次培養
將沉澱後的MDA-kb2細胞懸液轉移至25cm²或75cm²的組織培養(yang) 瓶中,每個(ge) 瓶子中加入適量的預熱完整培養(yang) 基(通常為(wei) 8ml至15ml)。
將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO₂的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。第二天可更換培養(yang) 基,並觀察細胞密度和狀態。
細胞傳代
當MDA-kb2細胞達到80%-90%的密度時進行傳(chuan) 代。
棄去舊的培養(yang) 基,用無鈣、鎂的PBS潤洗細胞1-2次,去除PBS。
加入足夠量的0.25% Trypsin-EDTA溶液,置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,直至大部分細胞從(cong) 培養(yang) 瓶表麵脫落。
加入預熱的培養(yang) 基終止消化,輕輕敲擊培養(yang) 瓶幫助細胞分離。
將消化後的細胞懸液加入等量的預熱培養(yang) 基中,輕輕混合後離心4分鍾(1000rpm),去除上清液。
補充1-2ml預熱的培養(yang) 基,將細胞懸液按1:2至1:5的比例分到新的培養(yang) 瓶中。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 10,12 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 15,20 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 18,23 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 11 |
TH01 | 6 |
TPOX | 10 |
vWA | 17,18 |
參考文獻
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