
MCF10A細胞株(人正常乳腺上皮細胞)
- 來源:乳腺;乳房
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM/F12+5% HS+20ng/ml EGF+0.5μg/ml Hydrocortisone+10μg/mL Insulin+1% NEAA+1% P/S
- 其他:表達乳腺特異性抗原,如與(yu) MFA乳腺和MC-5單克隆抗體(ti) 的陽性反應。
MCF 10A人乳腺正常上皮細胞係源自1984年從(cong) 一位白人女性乳腺組織中分離得到。
通過電子顯微鏡觀察,MCF10A細胞株展示出典型的管腔導管細胞形態,MCF10A細胞株還表達通過與(yu) MFA-breast和MC-5單克隆抗體(ti) 的陽性反應檢測到的乳腺特異性抗原。
MCF10A細胞株特性
MCF10A細胞株來源於(yu) 1984年從(cong) 一名患有纖維囊性乳房的36歲白人女性的乳腺中分離得到,由密歇根癌症基金會(hui) 保存。
MCF 10A細胞係在免疫抑製小鼠非致瘤,在在半固體(ti) 培養(yang) 基中致瘤。
MCF10A細胞株對上皮唾液酸粘蛋白、細胞角蛋白和乳脂肪球抗原呈陽性。
MCF10A細胞株在膠原中表現出三維生長,並在融合培養(yang) 物中形成圓頂。
對胰島素、糖皮質激素、霍亂(luan) 腸毒素和表皮生長因子(EGF)有反應。
表達乳腺特異性抗原,如與(yu) MFA乳腺和MC-5單克隆抗體(ti) 的陽性反應。
培養(yang) 基中的鈣含量對細胞形態有顯著影響。
MCF10A細胞株參數表
細胞名稱 | MCF10A細胞株(人正常乳腺上皮細胞) |
細胞別稱 | MCF 10A; MCF.10A; MCF10A; MCF10a; MCF-10 Attached; Michigan Cancer Foundation-10A |
來源 | 乳腺;上皮細胞;自發永生;女性;36歲 |
疾病特征 | 纖維性囊腫病 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
細胞類型 | 正常細胞 |
生長特性 | 貼壁 |
生物安全等級 | 1 |
致瘤性 | 否(在免疫抑製小鼠中);是(在半固體培養基中) |
培養基 | DMEM/F12+5% HS+20ng/ml EGF+0.5μg/ml Hydrocortisone+10μg/mL Insulin+1% NEAA+1% P/S |
培養環境 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃ |
傳代比例 | 1:2-1:4 |
換液頻率 | 2-3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:60% 基礎培養基+30%FBS+10%DMSO;溫度:液氮 |
細胞特性 | MCF10A細胞株對上皮唾液酸粘蛋白、細胞角蛋白和乳脂肪球抗原陽性。通過電子顯微鏡觀察,顯示出管腔導管細胞的特征,而不是肌上皮細胞的特征。培養基中的鈣含量對細胞的形態有很大影響。 |
響應因子 | MCF10A細胞株對胰島素、糖皮質激素、霍亂腸毒素和表皮生長因子(EGF)有反應。 |
三維生長特性 | MCF10A細胞株在膠原蛋白中表現出三維生長,並在融合培養物中形成圓頂。 |
終末分化 | 到目前為止,MCF10A細胞株還沒有表現出終末分化或衰老的跡象。 |
雌激素受體表達 | 陰性 |
保藏機構 | ATCC; CRL-10317 |
同工酶 | AK-1,1;S-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;PGM1, 1-2;PGM3,1 |
質量檢測 | 細菌、真菌、支原體檢測均為陰性 |
培養要點 | 該細胞較難消化,注意延長消化時間,消化到細胞收縮變圓,輕拍培養瓶側邊,細胞可以滑落方可終止消化。 |
細胞簡介 | MCF 10A細胞於1984年從患有纖維囊性乳房的36歲白人女性的乳腺中分離出來,來源於群體中的粘附細胞。 |
培養教程
MCF10A人正常乳腺上皮細胞培養教程
複蘇細胞
將含 1mL MCF10A 細胞懸液的凍存管迅速在 37℃ 水浴中解凍,加入 4mL 預熱的培養(yang) 基,並進行適當的離心和混合處理。
將所有懸浮細胞轉移至 T25 培養(yang) 瓶中,加入足夠的培養(yang) 基以支持細胞的進一步生長。
細胞傳代
當 MCF10A 細胞密度達到 80%-90% 時,可進行傳(chuan) 代操作。
使用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞,加入適量的 0.25% Trypsin 進行消化,並在必要時加入大豆胰蛋白酶抑製劑終止消化。
細胞凍存
在細胞生長狀態良好的情況下,可進行細胞凍存,以備後續實驗使用。
注意事項
消化時間長:MCF10A 細胞消化時間較長,通常需5分鍾或更久,具體(ti) 時間受胰酶濃度、效價(jia) 和消化條件影響。初次消化時需調整最佳消化時間。
對培養(yang) 基要求高:MCF10A 細胞對培養(yang) 基要求嚴(yan) 格,必須含有胰島素、氫化可的鬆、表皮生長因子和非必須氨基酸等關(guan) 鍵成分,以保證細胞的正常生長和功能。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 21,26 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 10,13 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14,16 |
D13S317 | 8,9 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 18,19 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 22,24 |
PentaD | 10,12 |
PentaE | 13,14 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 15,17 |
參考文獻
- 《海南醫學院學報》 2019年17期
- 摘要:...討法卡林二醇(FAD)和替吉奧(S-1)單藥或聯合用藥對乳腺癌細胞MCF7的增殖抑製...
- 《現代腫瘤醫學》 2019年02期
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