mda-mb-435s細胞（人黑色素瘤細胞/人乳腺癌細胞）

MDA-MB-435s細胞最初是MDA-MB-435細胞的紡錘形變異體(ti) ，1976年從(cong) 一名31歲患有轉移性乳腺導管癌女性的胸腔積液中分離出來。

近年來研究對MDA-MB-435及其衍生的MDA-MB-435s細胞的起源提出了質疑：MDA-MB-435細胞係的基因表達更類似於(yu) 黑色素瘤細胞係，而非乳腺細胞係，通過調查細胞身份發現MDA-MB-435細胞係受到M14黑色素瘤細胞的交叉汙染。

MDA-MB-435s細胞係的染色體(ti) 模態數為(wei) 56，範圍在55到62之間。MDA-MB-435s細胞係為(wei) 非整倍體(ti) 人類女性（XX）細胞，正常的N6、N11和N22染色體(ti) 缺失，而N7、N13、N18和N21染色體(ti) 為(wei) 單一染色體(ti) 。大多數剩餘(yu) 的正常染色體(ti) 通常成對存在，但N2染色體(ti) 為(wei) 三重態。研究還鑒定出了19條標記染色體(ti) ，其中大多數是由於(yu) 正常染色體(ti) 的結構改變而產(chan) 生的。六個(ge) 標記涉及N7染色體(ti) 區域，三個(ge) 標記被認為(wei) 是N6染色體(ti) 的衍生物。正常染色體(ti) 和配對染色體(ti) N3、N15、N17、N20的第三拷貝分別標記在M1、M2、M15和M5標記中。

mda-mb-435s細胞特性

• 研究發現MDA-MB-435及其衍生的MDA-MB-435s細胞的起源，其更類似於(yu) 黑色素瘤細胞係而非乳腺癌細胞。
  

• MDA-MB-435細胞係被證實具有黑素細胞來源，並且發現其受到M14黑色素瘤細胞的汙染。

• MDA-MB-435s細胞在免疫抑製小鼠中不具備致瘤性。

• MDA-MB-435s細胞的基因表達包括微管蛋白和肌動蛋白。

• MDA-MB-435s細胞的同工酶譜包括AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；PGM1, 2；PGM3，1。

• MDA-MB-435s細胞係的衍生細胞包括M4A4、M4A4 GFP、M4A4 LM3-2 GFP、M4A4 LM3-4 CL 16 GFP、NM2C5和NM2C5-GFP。

mda-mb-435s細胞參數表

mda-mb-435s細胞培養教程

一、MDA-MB-435s細胞複蘇

• 解凍：將含有1mL MDA-MB-435s細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，解凍過程應在2分鍾內(nei) 完成，以防MDA-MB-435s細胞損傷(shang) 。

• 離心：將解凍後的MDA-MB-435s細胞懸液加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中，混合均勻。在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 重懸細胞：用適量的完全培養(yang) 基重懸MDA-MB-435s細胞，將MDA-MB-435s細胞懸液轉移到含6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。

• 培養(yang) ：將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中過夜，第二天顯微鏡下觀察MDA-MB-435s細胞生長情況和密度。

二、MDA-MB-435s細胞傳代

• 當MDA-MB-435s細胞密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。以下是貼壁MDA-MB-435s細胞傳(chuan) 代的詳細步驟：

• 棄去培養(yang) 上清：用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗MDA-MB-435s細胞1-2次。

• 消化細胞：

• 加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，難消化的MDA-MB-435s細胞可適當延長時間。

• 在顯微鏡下觀察MDA-MB-435s細胞消化情況，當大部分MDA-MB-435s細胞變圓並脫落時，立即終止消化。

• 終止消化：輕敲幾下培養(yang) 瓶後，加入3-4mL含10%FBS的完全培養(yang) 基終止消化。

• 離心和重懸：

• 輕輕打勻後吸出MDA-MB-435s細胞懸液，在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用1-2mL完全培養(yang) 基重懸MDA-MB-435s細胞，將MDA-MB-435s細胞懸液按1:2的比例分到新的T25培養(yang) 瓶中。

• 繼續培養(yang) ：添加6-8mL新配製的完全培養(yang) 基，以維持MDA-MB-435s細胞的生長活力。後續傳(chuan) 代可根據實際情況按1:2至1:5的比例進行。

三、MDA-MB-435s細胞凍存

• 為(wei) 了確保實驗的連續性和穩定性，在MDA-MB-435s細胞培養(yang) 的初期階段建議進行MDA-MB-435s細胞凍存。以下是具體(ti) 步驟：

• 細胞收集：按照傳(chuan) 代培養(yang) 的步驟消化MDA-MB-435s細胞，將消化後的MDA-MB-435s細胞收集到離心管中。

• 細胞計數：使用血球計數板確定MDA-MB-435s細胞濃度，推薦凍存密度為(wei) 1×10^6至1×10^7個(ge) 活MDA-MB-435s細胞/mL。

• 離心和重懸：

• 在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用配製好的凍存液（90%血清，10%DMSO）重懸MDA-MB-435s細胞。

• 凍存管分裝：將重懸後的MDA-MB-435s細胞按每管1mL的比例分裝到凍存管中，並標注好名稱、代數、日期等信息。

• 程序降溫：將MDA-MB-435s細胞凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，在-80℃冰箱中過夜，之後轉入液氮罐中長期保存。