mda-mb-453細胞 (人乳腺癌細胞)

MDA-MB-453細胞株由R. Cailleau等人於(yu) 1976年從(cong) 一位48歲患有轉移性乳腺癌的白人女性患者的胸水中分離出來，轉移部位包括淋巴結、大腦、胸膜腔和心包腔。

MDA-MB-453細胞係為(wei) 非整倍體(ti) 的女性細胞，染色體(ti) 模態數為(wei) 90，範圍在87至91之間。其染色體(ti) 數目從(cong) 亞(ya) 倍體(ti) 到接近四倍體(ti) 不等。
MDA-MB-453細胞係中缺失了正常的N11、N13和N17染色體(ti) ，而N2、N6和N12染色體(ti) 的拷貝數明顯不足，N20染色體(ti) 則過度表達。
MDA-MB-453細胞係中存在大量一致的標記染色體(ti) ，許多染色體(ti) 具有多個(ge) 拷貝。

MDA-MB-453細胞係的染色體(ti) 模式包括22條重排的結構染色體(ti) ，主要呈現四倍體(ti) 狀態，其中多倍體(ti) 細胞占6%。

mda-mb-453細胞特性

• mda-mb-453細胞表達成纖維細胞生長因子（FGF）和FGF受體(ti) 。
  

• mda-mb-453細胞呈混合形態，貼壁的上皮狀細胞、單個(ge) 懸浮活細胞和細胞簇。

• mda-mb-453細胞高水平表達功能性雄激素受體(ti) （AR）。
  

• mda-mb-453細胞在免疫抑製小鼠中不形成腫瘤，但在半固體(ti) 培養(yang) 基中形成菌落。

• 同工酶包括AK-1（1）、ES-D（1-2）、G6PD（B）、GLO-I（1）、PGM1（1）和PGM3（1）。
  

• mda-mb-453細胞不屬於(yu) 三陰性乳腺癌細胞，ER和PR為(wei) 陰性，HER-2為(wei) 陽性。
  

mda-mb-453細胞參數表

mda-mb-453人乳腺癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 將含有1mL MDA-MB-453細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水麵低於(yu) 凍存管蓋部），搖晃解凍。

• 解凍後，立即將細胞懸液移入預先準備好的含有4mL培養(yang) 基的15ml離心管中，混合均勻。

• 在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液。

• 加入1mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹勻細胞。

• 將所有MDA-MB-453細胞懸液移入含有5mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，培養(yang) 過夜。

• 第二天更換培養(yang) 基，並檢查細胞密度。

細胞傳代

• 當MDA-MB-453細胞密度達80%-90%時，進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 盡量吸幹淨T25瓶中的舊培養(yang) 基。

• 加3-4ml常溫PBS輕輕潤洗MDA-MB-453細胞10-20秒，然後吸走PBS。

• 在T25瓶中加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yang) 瓶使胰酶均勻覆蓋細胞層。

• 將培養(yang) 瓶放入37度培養(yang) 箱中消化。

• 當MDA-MB-453細胞間隙變大但未完全脫落時，加入2-3ml完全培養(yang) 基終止胰酶消化。

• 混勻細胞，900rpm離心3-5分鍾，棄去上清。

• 加入新的完全培養(yang) 基輕輕重懸細胞，將細胞懸液均勻分到新的培養(yang) 瓶中。

• 補足完全培養(yang) 基，將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 消化並離心後獲得MDA-MB-453細胞沉澱，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞。

• 將細胞懸液迅速移入已標記好的凍存管中。

• 將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存。

• 若沒有程序凍存盒，可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10分鍾，再在-20度靜置2小時後轉入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存。

MDA-MB-453細胞培養注意事項

• MDA-MB-453細胞使用L15培養(yang) 基，不需要CO₂平衡。

• L-15培養(yang) 基采用磷酸鹽和遊離氨基酸緩衝(chong) ，適用於(yu) 非CO₂環境中的細胞生長。

• 若沒有無空氣培養(yang) 箱，可以使用不透氣培養(yang) 瓶（密封瓶蓋）培養(yang) MDA-MB-453細胞，並將瓶蓋擰緊，每次操作時開蓋短時間接觸到的二氧化碳不會(hui) 影響正常培養(yang) 。

• MDA-MB-453細胞也可以使用HD培養(yang) 基在5%CO₂濃度培養(yang) 箱中培養(yang) ，此條件下細胞形態和倍增時間幾乎沒有影響。

MDA-MB-453細胞培養數據

• 形態：上皮樣，圓形，單層鬆散附著。

• 培養(yang) 基：80-90%萊博維茨L-15培養(yang) 基+10-20%h.i.FBS。

• 亞(ya) 培養(yang) ：以2-4×10⁶個(ge) MDA-MB-453細胞/80 cm²的速度接種；使用胰蛋白酶/EDTA以1:2至1:6的比例分開融合培養(yang) ；可以通過輕敲燒瓶來部分分離細胞；細胞可能需要幾天才能再次粘附。

• 培養(yang) ：37°C，無CO₂氣體(ti) 交換（無過濾蓋，燒瓶蓋關(guan) 閉）。

• 加倍時間：約50-60小時。

• 收獲：約25-35 x 10⁶個(ge) MDA-MB-453細胞/80 cm²。

• 儲(chu) 存：用85%培養(yang) 基、10%FBS、5%DMSO冷凍。

• 支原體(ti) ：用環丙沙星消除最初的汙染，然後在DAPI、微生物培養(yang) 、RNA雜交和PCR檢測中呈陰性。