
iosesE80人正常卵巢上皮細胞
- 來源:人卵巢
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
iosesE80細胞來源於(yu) 女性正常卵巢組織。
iosesE80細胞形態: 上皮細胞樣,細胞呈多邊形,緊密排列,具有典型的上皮細胞形態。
iosesE80細胞生長特性: 貼壁生長,依賴於(yu) 培養(yang) 基中的營養(yang) 成分和生長因子,生長速度較快。
iosesE80人正常卵巢上皮細胞參數表
細胞名稱 | 人正常卵巢上皮細胞 iosesE-80 (STR鑒定正確) |
別稱 | iosesE 80; iosesE80; NFHiosesE-80; iosesE80UBC; iosesE-Van; iosesE-VAN |
種屬 | 人 |
組織來源 | 卵巢 |
細胞類型 | 轉化細胞係 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養條件 | 氣相: 95%空氣 + 5% CO2 ; 溫度: 37℃; 濕度: 70%-80% |
傳代比例 | 1:2-1:4 |
傳代周期 | 每 2-3 天換液一次 |
細胞消化 | 1-2 分鍾 |
倍增時間 | 每周 2 至 3 次 |
凍存條件 | 凍存液: 60%基礎培養(yang) 基 + 30% FBS + 10% DMSO 儲(chu) 存方法: 液氮儲(chu) 存 |
質量檢測 | 細菌、真菌、支原體檢測均為陰性 |
產品使用 | 僅限於科學研究,不可用於動物或人類疾病治療 |
細胞汙染 | HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S; 另有使用 DMEM + 10% FBS 的情況 |
傳代方法 | 1:2-1:4, 另有 1:3 至 1:6 的方法,每周2次 |
培養教程
iosesE80人正常卵巢上皮細胞培養教程
細胞傳代步驟
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加2ml消化液(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。
按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000 RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2ml培養(yang) 液後吹勻。
將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。
複蘇iosesE80細胞步驟
將含有1ml iosesE80細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4ml培養(yang) 基混合均勻。
在1000 RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2ml培養(yang) 基後吹勻。
將所有iosesE80細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yang) 基,培養(yang) 過夜)。
第二天換液並檢查細胞密度。
凍存iosesE80細胞步驟
當iosesE80細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。以下是T25瓶的示例:
棄去培養(yang) 基後,PBS清洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶。細胞變圓脫落後,加入2ml完全培養(yang) 基終止消化,並使用血球計數板計數。
1000 RPM離心5分鍾,去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為(wei) 10%。加入DMSO後迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,並做好標識。本公司按每個(ge) 凍存管細胞數目大於(yu) 1x10^6個(ge) 細胞凍存。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次取用
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