OV90細胞係（人卵巢癌細胞）

OV-90細胞係源自一位64歲女性患者的卵巢（惡性乳頭狀漿液腺癌）。OV-90細胞係來源於(yu) 一位沒有卵巢癌家族史的法國白人患者，並於(yu) 1992年建立。

OV90細胞係的核型為(wei) 46,XX，具有特征性染色體(ti) 異常，包括der(1)t(1;10)(p36;p15)、hsr(3)(p11)和der(9;17)(q10;q10)。

OV90細胞係特性特征

• 基因突變：p53基因突變：外顯子6的Ser→Arg突變（密碼子215）；3p24染色體(ti) 區域存在缺失

• 蛋白表達：HER2/neu陽性、表達角蛋白

• ov90細胞呈現上皮樣細胞、貼壁生長、在軟瓊脂中能形成集落

• 致瘤性：ov90細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 具有致瘤性

• 轉移特征：ov90細胞表現出腹水轉移的特征

• 與(yu) 其他細胞係的比較：與(yu) TOV-21G細胞係相似，在3p24染色體(ti) 上存在缺失、與(yu) TOV-112D細胞係不同，後者在3p24染色體(ti) 上沒有缺失

OV90細胞係參數表

OV90人卵巢癌細胞係培養教程

OV90細胞凍存與複蘇

凍存

• 凍存液配方：基礎培養(yang) 基 + 5% DMSO + 15-20% FBS。

• 儲(chu) 存條件：液氮中長期保存。

複蘇

• 在37°C水浴中快速解凍。

• 加入4 ml預熱的培養(yang) 基稀釋OV90細胞懸液。

• 1000 rpm離心3分鍾，棄去上清。

• 用1-2 ml新鮮培養(yang) 基重懸OV90細胞。

• 將OV90細胞懸液轉移到含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，第二天換液並檢查細胞狀態。

傳代步驟

• 棄去培養(yang) 上清。

• 用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗OV90細胞1-2次。

• 加入適量胰酶消化4分鍾。

• 加入等體(ti) 積培養(yang) 基終止消化。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸OV90細胞。

• 按1:3比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 氧氣、密度和養(yang) 分敏感性：OV90細胞對氧氣、密度和養(yang) 分非常敏感，需要勤換液。

• 操作小心：避免過度吹打和離心，以免影響OV90細胞狀態。

• 細胞代次：推薦使用10代以內(nei) 的OV90細胞以保證實驗結果的穩定性。

常見問題及OV90細胞健康檢查

• 細胞汙染：

• 支原體(ti) 感染：可能改變細胞膜狀態、細胞生長習(xi) 性，導致實驗結果不可靠。

• 細菌或真菌汙染：迅速消耗培養(yang) 基養(yang) 分，導致OV90細胞死亡。

  
  

  細胞狀態不佳：

• 形態異常：OV90細胞變圓或脫落，可能由於(yu) 培養(yang) 條件不適或汙染。

• 生長緩慢：可能由於(yu) 培養(yang) 基老化、傳(chuan) 代過度或OV90細胞密度過低。

  
  

  傳(chuan) 代問題：

• 消化不完全或過度消化：影響OV90細胞貼壁和生長。

• 傳(chuan) 代比例不當：影響OV90細胞生長狀態。

  
  

  培養(yang) 基問題：

• 培養(yang) 基老化：葉酸不穩定，建議現配培養(yang) 基，兩(liang) 周內(nei) 用完。

• 換液不及時：需定期換液以保證OV90細胞健康

  
  

  OV90細胞健康檢查：

• 顯微鏡觀察：觀察OV90細胞形態和密度，健康細胞應貼壁生長，形態均一。

• 活力染色：使用台盼藍染色，檢查OV90細胞活力。

• 支原體(ti) 檢測：定期檢測支原體(ti) 感染。

• 增殖速率：監測OV90細胞倍增時間，健康的細胞倍增時間約為(wei) 50小時。

• 培養(yang) 基顏色和渾濁度：變黃或渾濁可能指示代謝旺盛或汙染。健康培養(yang) 基應保持澄清。