NIH:OVCAR-3人卵巢癌細胞

NIH:OVCAR-3是一種重要的人卵巢癌細胞係，於(yu) 1982年從(cong) 一名60歲高加索女性患者的惡性腹水中建立。患者患有進展性卵巢腺癌，經環磷酰胺、順鉑和阿黴素（多柔比星）聯合化療後仍出現惡化。

OVCAR-3細胞呈上皮樣特征，以鵝卵石狀單層貼壁生長，局部可形成多層。
OVCAR-3細胞具有異常核型，染色體(ti) 數目在亞(ya) 三倍體(ti) 至近三倍體(ti) 範圍內(nei) 。多個(ge) 正常染色體(ti) （11、13、14、15、16、17和22號）明顯缺失，取而代之的是大量標記染色體(ti) 和其他結構異常。細胞間還存在染色體(ti) 的隨機丟(diu) 失和增加。

OVCAR-3人卵巢癌細胞特征

• 致瘤性：在裸鼠中致瘤（21天內(nei) 100%形成腫瘤）

• 同工酶表達：AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1; PGM1,1; PGM3,1

• 激素受體(ti) 表達：雄激素受體(ti) 陽性；雌激素受體(ti) 陽性；孕酮受體(ti) 陽性（可被17β-雌二醇誘導）

• 耐藥性：對阿黴素（多柔比星）、美法侖(lun) 和順鉑耐藥

• 轉染性能：適用於(yu) 轉染實驗

• 研究應用：藥物耐受性研究，激素治療評估

• 應用領域：藥物篩選，分子靶點識別，卵巢癌生物學研究

OVCAR-3人卵巢癌細胞參數表

OVCAR-3人卵巢癌細胞培養教程

細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機：當OVCAR-3細胞匯合度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代比例：通常為(wei) 1:3到1:6，適用於(yu) OVCAR-3細胞。

• 傳(chuan) 代頻率：大約每2-3天傳(chuan) 代一次，OVCAR-3細胞的倍增時間約為(wei) 18小時。

傳代步驟

• 移除OVCAR-3細胞的舊培養(yang) 基。

• 用PBS清洗細胞單層。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-5分鍾。

• 輕拍培養(yang) 瓶，使細胞脫離。

• 加入含血清的新鮮培養(yang) 基以終止消化。

• 將細胞懸液轉移到離心管中，1000rpm離心5分鍾。

• 棄上清，用新鮮培養(yang) 基重懸細胞。

• 將細胞按所需比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 凍存培養(yang) 基：使用90% FBS + 10% DMSO來凍存OVCAR-3細胞。

• 降溫步驟：緩慢降溫（約1°C/分鍾）至-80°C，然後轉移到液氮中長期保存。

細胞複蘇

• 快速解凍（37°C水浴，1-2分鍾）複蘇OVCAR-3細胞。

• 將細胞懸液緩慢加入預熱的完全培養(yang) 基中。

• 離心去除DMSO，重懸細胞並接種到培養(yang) 瓶中。

OVCAR-3細胞適用於多種轉染方法，包括：

• 脂質體(ti) 轉染法：如Lipofectamine等商業(ye) 試劑。

• 鈣磷酸鹽共沉澱法。

• 電穿孔法。

• 病毒介導的轉染：如慢病毒、腺病毒等。

• 聚合物介導的轉染：如PEI (聚乙烯亞(ya) 胺)。

• 核酸轉染試劑：如FuGENE。

轉染成功的標誌

• 報告基因表達：如GFP熒光觀察或熒光素酶活性測定。

• 目的蛋白表達：通過Western blot或免疫熒光檢測。

• mRNA水平增加：通過RT-PCR或Northern blot檢測。

• 細胞表型改變：如形態變化或生長特性改變。

• 功能性改變：如特定信號通路的激活或抑製。