VCaP細胞（人前列腺癌細胞株）

VCaP細胞係是從(cong) 一位59歲白人男性前列腺癌患者的腰椎轉移病灶中獲得的上皮細胞。該細胞係於(yu) 1997年在美國建立，來源於(yu) 一名對激素治療不敏感的前列腺癌患者。VCaP細胞能夠在裸小鼠和SCID小鼠中形成腫瘤，顯示出其致瘤性，並且具有椎體(ti) 轉移的能力。

VCaP細胞特性特征

分子特征

• 雄激素受體(ti) (AR)：高度表達
  

• 前列腺特異抗原(PSA)：表達

• TMPRSS2-ERG融合基因：是唯一表達此融合基因的前列腺癌細胞係

抗原表達

• 細胞角蛋白-18：表達

• p53抗原：表達

• 前列腺特異性抗原(PSA)：表達

• 前列腺酸性磷酸酶(PAP)：表達

• Rb蛋白：表達

• 雄激素受體(ti) 剪接變體(ti) AR-V7：表達；

其他特征

• 基因特征：TMPRSS2-ERG融合存在；可能存在AR基因擴增；

• 對激素反應：VCaP細胞對雄性激素敏感（體(ti) 內(nei) 和體(ti) 外均表現）

• 病毒相關(guan) ：產(chan) 生小鼠異種性逆轉錄病毒Bxv-1（可能在小鼠異向移植過程中獲得）
  

VCaP細胞參數表

VCaP人前列腺癌細胞株培養教程

VCaP細胞複蘇

• 準備工作：從(cong) 液氮中取出VCaP細胞凍存管，迅速放入37°C水浴中解凍，輕輕搖動約1-2分鍾，直到VCaP細胞完全解凍。

• 轉移細胞：用70%乙醇消毒凍存管外表麵。在無菌條件下打開凍存管，將VCaP細胞懸液轉移到含有9 mL預熱培養(yang) 基的15 mL離心管中。

• 離心：以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液以去除解凍過程中產(chan) 生的碎片。

• 重懸：加入10 mL預熱的培養(yang) 基，輕輕吹打以重懸VCaP細胞。

• 接種：將VCaP細胞懸液轉移到T25培養(yang) 瓶中，放入培養(yang) 箱中培養(yang) 。

VCaP細胞傳代

• 觀察細胞：當VCaP細胞達到80-90%融合時，進行傳(chuan) 代以防止過度融合。

• 準備工作：預熱培養(yang) 基和胰酶消化液（0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA），以便於(yu) 消化VCaP細胞。

• 棄去舊培養(yang) 基：在無菌條件下，棄去培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌VCaP細胞一次。

• 消化細胞：加入適量的胰酶消化液（覆蓋細胞層），在37°C下消化1-2分鍾，觀察VCaP細胞變圓和脫落。

• 終止消化：加入2倍體(ti) 積的培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打使VCaP細胞完全脫落。

• 離心和重懸：將VCaP細胞懸液轉移到15 mL離心管中，以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。加入預熱的培養(yang) 基重懸VCaP細胞。

• 接種：按1:3-1:4的比例將VCaP細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶中，加入適量培養(yang) 基，放入培養(yang) 箱中培養(yang) 。

VCaP細胞凍存

• 準備工作：預備凍存液：90% FBS + 10% DMSO，確保VCaP細胞在凍存過程中的存活率。

• 收集細胞：按照傳(chuan) 代步驟消化VCaP細胞，離心後棄去上清液。

• 重懸細胞：加入預冷的凍存液重懸VCaP細胞（每凍存管1×10^6 cells/mL）。

• 分裝：將VCaP細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 程序降溫：將凍存管放入程序降溫盒中，-1°C/min降溫至-80°C，24小時後轉移到液氮中長期保存VCaP細胞。

注意事項

• 無菌操作：整個(ge) 過程必須在無菌條件下進行，使用生物安全櫃來保護VCaP細胞和操作人員。

• 細胞觀察：定期觀察VCaP細胞形態和生長情況，及時傳(chuan) 代，避免過度融合。

• 安全性：操作VCaP細胞時需注意其潛在的生物危害性，遵循二級生物安全操作規範。

VCaP細胞培養基組成對細胞生長的影響

• 基礎培養(yang) 基：高糖DMEM是VCaP細胞生長的理想選擇，提供必要的營養(yang) 物質。

• 血清補充：10% FBS對VCaP細胞的生長至關(guan) 重要，提供生長因子和激素。

• 抗生素：青黴素-鏈黴素用於(yu) 防止細菌汙染，確保VCaP細胞在無菌條件下生長。

VCaP細胞在不同培養條件下的表現差異

• 溫度和氣相條件：VCaP細胞需要在37°C，95%空氣和5%二氧化碳的環境中培養(yang) 。偏離這些條件可能影響VCaP細胞的生長速度和代謝活性。

• 生長特性：VCaP細胞是貼壁生長的細胞，需要適當的培養(yang) 表麵。不同的培養(yang) 表麵處理可能影響VCaP細胞的貼壁效率和生長狀態。

• 生長速度：VCaP細胞的倍增時間約為(wei) 53小時，比許多其他細胞係生長更慢，可能需要更長的培養(yang) 時間和更頻繁的培養(yang) 基更換。

• 密度依賴性：VCaP細胞的接種密度和維持密度對其生長有重要影響。建議的接種密度為(wei) 2萬(wan) -4萬(wan) 活細胞/平方厘米，維持密度為(wei) 10萬(wan) -20萬(wan) 活細胞/平方厘米。

• 激素敏感性：VCaP細胞對雄性激素敏感，培養(yang) 基中激素水平的變化可能顯著影響VCaP細胞的生長和表型。

• 傳(chuan) 代頻率：由於(yu) 生長較慢，VCaP細胞通常每周需要傳(chuan) 代2次，傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3-1:4。不當的傳(chuan) 代頻率可能影響VCaP細胞的生長狀態和實驗結果的一致性。