小鼠雪旺氏細胞（施萬(wan) 細胞｜kaiyun网站安全）

小鼠雪旺細胞，又稱施萬(wan) 細胞，是一種膠質細胞，主要存在於(yu) 大腦神經組織中，是周圍神經係統的重要組成部分。

雪旺細胞功能非常多樣、活躍，除為(wei) 軸突提供支持外，還分泌多種活性物質，如神經營養(yang) 因子、細胞外基質及粘附因子等，對維持神經纖維的存活、生長、再生都有意義(yi) 。

小鼠雪旺細胞的形態和結構十分複雜和多樣化：外表麵有基膜，能夠包裹在神經纖維上，形成髓鞘以保護神經元。小鼠雪旺細胞的核呈長卵圓形，核周有少量胞質，胞膜與(yu) 基膜相貼形成軸突係膜。

雪旺細胞在神經元生長和連接過程中具有選擇性的引導作用：一旦神經元與(yu) 雪旺細胞接觸，神經纖維的延伸將嚴(yan) 格限製在Bungner帶內(nei) 。

小鼠雪旺細胞特性

• 雪旺細胞來源於(yu) 小鼠的正常腦組織，GFAP免疫熒光染色陽性，細胞純度高於(yu) 90%，不含有多種病原體(ti) 和微生物。

• 雪旺細胞通過酶解法製備，陽性表達S-100、GFAP和CD90，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌。

• 小鼠雪旺氏細胞分離自神經組織，可分為(wei) 有髓和無髓神經纖維，外表麵有基膜，促進神經元存活及軸突再生。

• 雪旺細胞的胞核呈長卵圓形，有基膜和外層胞膜，形成軸突係膜，細胞質構成髓鞘。

• 神經元延伸受限於(yu) 與(yu) 雪旺細胞的接觸，限製在Bungner帶內(nei) 。

小鼠雪旺細胞參數表

原代小鼠雪旺細胞培養

• 準備培養(yang) 瓶：使用預塗覆了多聚賴氨酸的培養(yang) 瓶（T-75培養(yang) 瓶）。先向瓶內(nei) 加入10ml無菌水，再加入15μl多聚賴氨酸原液。將培養(yang) 瓶放入培養(yang) 箱中，在37°C條件下孵育至少一小時以確保表麵充分塗覆。

• 準備培養(yang) 基：在無菌環境下準備完全培養(yang) 基，確保添加物已充分混合。用70%酒精消毒培養(yang) 基和添加物的外部表麵，然後放置在無菌地方。

• 處理培養(yang) 瓶：用無菌水衝(chong) 洗預塗覆多聚賴氨酸的培養(yang) 瓶兩(liang) 次，然後向瓶內(nei) 加入20ml完全培養(yang) 基。將培養(yang) 瓶置於(yu) 超淨台中，準備融化雪旺細胞。

• 融化雪旺細胞：將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C水浴中，輕輕地握住並旋轉小瓶直到細胞完全融化。立即將小瓶取出，用70%酒精衝(chong) 洗並放置於(yu) 無菌環境中。小心打開蓋子，使用1ml的eppendorf吸管將細胞懸浮。

• 細胞接種：將懸浮雪旺細胞加入到預塗覆多聚賴氨酸的培養(yang) 瓶中，推薦的接種密度應大於(yu) 10,000個(ge) 細胞/cm²。

• 培養(yang) 雪旺細胞：蓋上蓋子後輕輕搖晃培養(yang) 瓶，以確保細胞均勻分布。放置於(yu) 培養(yang) 箱中，至少16小時內(nei) 不要移動培養(yang) 物。第二天更換培養(yang) 基，並每隔一天更換一次培養(yang) 基。

• 培養(yang) 維護：當培養(yang) 物達到50%融合時，每天更換培養(yang) 基直至培養(yang) 物大約達到80%融合。

• 傳(chuan) 代培養(yang) ：當細胞達到90%融合時，需進行傳(chuan) 代培養(yang) 。準備預塗覆多聚賴氨酸的培養(yang) 瓶，並用DPBS衝(chong) 洗細胞。使用胰酶/EDTA消化液孵化細胞，收取細胞並將其移入離心管中。最後，在培養(yang) 基中重懸細胞並計數，將其接種到新的培養(yang) 瓶中。

• 安全注意事項：在處理細胞時，應注意潛在的風險。采取適當的保護措施，如戴手套和安全鏡，並避免用嘴吸。操作時務必在無菌環境中進行，以確保細胞的純度和質量。