原代大鼠輸尿管上皮細胞

大鼠輸尿管上皮細胞是從(cong) 正常大鼠輸尿管組織中分離並培養(yang) 的kaiyun网站安全，常用於(yu) 泌尿係統相關(guan) 研究。輸尿管作為(wei) 連接腎髒和膀胱的管道結構，壁由黏膜層、固有層、肌層和外膜四層組成，其中黏膜層為(wei) 移行上皮，包含4-5層細胞。

輸尿管上皮細胞的分離通常通過酶消化法（如胰蛋白酶和膠原酶）結合機械剝離，提取出高純度的上皮細胞。培養(yang) 過程中，細胞呈鋪路石樣形態，適合貼壁生長，需使用專(zhuan) 用培養(yang) 基以維持其增殖和功能特性。輸尿管上皮細胞在泌尿係統發育、病理研究、藥物篩選和疾病機製探討中具有重要應用，尤其適用於(yu) 研究輸尿管疾病、尿路感染及結石形成等病理過程。

輸尿管上皮細胞特性特征

• 輸尿管上皮細胞來源於(yu) 大鼠的正常輸尿管組織，輸尿管壁由四層構成：黏膜層、固有層、肌層和外膜。其中，黏膜層表麵為(wei) 移行上皮，約有4-5層細胞。

• 傳(chuan) 代特性：輸尿管上皮細胞可傳(chuan) 代2-3代，適合長期培養(yang) 。

• 基因表達：大鼠輸尿管上皮細胞通常表達廣譜角蛋白（PCK），這是上皮細胞的標誌性分子。

• 研究用途：原代大鼠輸尿管上皮細胞廣泛用於(yu) 泌尿生物學研究，包括尿路上皮腫瘤、輸尿管損傷(shang) 修複等領域。這些細胞為(wei) 研究泌尿係統疾病提供了重要的實驗模型

大鼠輸尿管上皮細胞參數表

原代大鼠輸尿管上皮細胞培養教程

輸尿管上皮細胞的接收與複蘇

• 收到輸尿管上皮細胞後，先用75%酒精對外包裝消毒，再拆封。

• 將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱內(nei) 靜置3-4小時，以適應輸尿管上皮細胞的培養(yang) 環境。

• 若為(wei) 凍存的輸尿管上皮細胞，迅速在37℃水浴中解凍，待完全融化後，加入10 mL預熱的完全培養(yang) 基，並以800-1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清液，重懸輸尿管上皮細胞於(yu) 5 mL完全培養(yang) 基中，接種於(yu) 包被了鼠尾膠原Ⅰ的T25培養(yang) 瓶中，並置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

輸尿管上皮細胞的傳代

• 當輸尿管上皮細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。初次傳(chuan) 代建議比例為(wei) 1:2。

• 吸棄培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液輕柔清洗輸尿管上皮細胞1次。
  

• 加入1 mL的0.25%胰蛋白酶，輕輕搖勻，37℃下消化1-3分鍾。

• 在顯微鏡下觀察，當輸尿管上皮細胞收縮、變圓且脫落時，加入5 mL完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶。

• 用吸管輕輕吹打混勻細胞懸液，並按1:2比例接種到新的T25培養(yang) 瓶中。

• 加入5 mL新鮮完全培養(yang) 基，並置於(yu) 培養(yang) 箱內(nei) 繼續培養(yang) 。

培養基更換

• 每2-3天更換一次完全培養(yang) 基，以維持輸尿管上皮細胞的最佳生長狀態。

• 在換液前觀察輸尿管上皮細胞形態，如出現形態異常或細胞密度過高，需及時調整傳(chuan) 代密度或處理汙染問題。

輸尿管上皮細胞的凍存

• 將生長狀態良好的輸尿管上皮細胞以800-1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 以凍存液（90% FBS + 10% DMSO）重懸細胞，並分裝到凍存管中（1-2×10⁶個(ge) 細胞/管）。

• 標記凍存管，並迅速置於(yu) -80℃保存過夜，之後轉移到液氮罐中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：所有操作應在無菌環境下進行，以防止輸尿管上皮細胞的汙染。

• 定期檢查：需定期檢測輸尿管上皮細胞形態及生長狀態，及時發現並處理汙染。

• 試劑檢測：使用的培養(yang) 基、血清、消化酶等應提前檢測其質量和活性，確保其符合輸尿管上皮細胞培養(yang) 的需求。

• 細胞鑒定：可通過廣譜角蛋白（PCK）免疫熒光染色鑒定輸尿管上皮細胞的純度和特性，以保證實驗結果的可靠性。