
SK-N-MC細胞(人神經上皮瘤細胞)
- 來源:腦;眼眶上區神經上皮瘤轉移灶
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:90%MEM+10%FBS+1%P/S
- 其他:SK-N-MC細胞具有中度的多巴胺-β-羥化酶活性,可以通過甲醛誘導熒光指示檢測細胞內(nei) 的兒(er) 茶酚胺
SK-N-MC細胞是一種人類神經源性細胞係,最早於(yu) 1971年9月由Biedler JL分離自一位14歲白種女童的眼眶上區神經上皮瘤轉移灶。最初被認為(wei) 是神經母細胞瘤細胞係,但後續研究表明該細胞係實際上源於(yu) Askin腫瘤。常用於(yu) 神經係統疾病及腫瘤生物學研究。
SK-N-MC細胞是一種假二倍體(ti) 細胞係,雌性(XX)染色體(ti) ,染色體(ti) 數目主要在二倍體(ti) 範圍內(nei) ,模式染色體(ti) 數為(wei) 46。在染色體(ti) 組成方麵,SK-N-MC細胞表現出多種異常,缺失N3和N10染色體(ti) ,部分染色體(ti) 如N1、N2、N4等為(wei) 單體(ti) ,同時出現多個(ge) 標記染色體(ti) ,包括1p+、11q+等。其中特定標記染色體(ti) 與(yu) R.C.Seeger等研究中提到的相符。
SK-N-MC細胞特性特征
酶活性:SK-N-MC細胞具有中度的多巴胺-β-羥化酶活性,能夠合成和代謝兒(er) 茶酚胺。
熒光誘導:用甲醛處理後可誘導出熒光,表明SK-N-MC細胞內(nei) 存在兒(er) 茶酚胺。
抗原與(yu) 基因特征:血型:O型血;Rh+。
同工酶表達:AK-1,1;ES-D,2;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,2;PGM1,1;PGM3,1-2
致瘤性:SK-N-MC細胞在倉(cang) 鼠的臉頰和裸小鼠身上形成腫瘤。
轉移性:主要發生在眶上區
SK-N-MC細胞參數表
細胞名稱 | SK-N-MC人神經上皮瘤細胞(ATCC: HTB-10) |
別稱 | SKNMC; SK-NM-C; SK-NMC |
來源 | 腦;眼眶上區神經上皮瘤轉移灶 |
種屬 | 人 |
年齡性別 | 14歲,女性 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時間 | ~32-48小時 |
無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
安全性等級 | 1 |
運輸方式 | 幹冰運輸或複蘇發貨 |
培養基組成 | MEM + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣,5%二氧化碳 |
傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;保存於液氮 |
染色體特征 | 假二倍體,通常為43~46,XX |
標記染色體 | 包括1p+、der(3)t(2;3)(q24;q27)、del(4)(p12)等 |
酶活性 | 中度多巴胺-β-羥化酶活性 |
熒光誘導特性 | 可用甲醛誘導出熒光,表明細胞內存在兒茶酚胺 |
抗原表達 | O型血;Rh+ |
同工酶表達 | AK-1, 1;ES-D, 2;G6PD, B;GLO-I, 1-2;Me-2, 2;PGM1, 1;PGM3, 1-2 |
致瘤性 | 在倉鼠和裸小鼠身上形成腫瘤 |
轉移性 | 主要發生在眶上區 |
培養教程
SK-N-MC人神經上皮瘤細胞培養教程
SK-N-MC細胞複蘇
將水浴鍋預熱至37℃,並準備4 mL完全培養(yang) 基(MEM + 10% FBS + 1% P/S)。
迅速將SK-N-MC細胞的凍存管放入37℃水浴中,解凍時間應控製在1分鍾左右。
解凍後,立即用4 mL完全培養(yang) 基稀釋細胞懸液,輕輕混勻,以確保SK-N-MC細胞均勻分布。
在1000 RPM條件下離心4分鍾,棄去上清,以去除解凍過程中的雜質。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸SK-N-MC細胞,並將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ,確保SK-N-MC細胞能夠順利貼壁。
SK-N-MC細胞傳代
當SK-N-MC細胞的密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代操作。
棄去舊的培養(yang) 基,用無鈣鎂的PBS輕輕洗滌SK-N-MC細胞1-2次,以去除殘留的培養(yang) 基成分。
加入1 mL消化液(0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA),覆蓋SK-N-MC細胞表麵,並放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中1-2分鍾。
觀察SK-N-MC細胞變圓並脫落後,立即加入完全培養(yang) 基終止消化過程。
在1000 RPM條件下離心4分鍾,棄去上清,確保SK-N-MC細胞的完整性。
用新鮮培養(yang) 基重懸SK-N-MC細胞,並按1:2的比例分裝到新的培養(yang) 瓶中,補加8 mL完全培養(yang) 基。
SK-N-MC細胞凍存
當SK-N-MC細胞生長狀態良好時,準備進行細胞凍存。凍存液配方為(wei) 55%培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO。
棄去培養(yang) 基後,用PBS清洗SK-N-MC細胞,然後加入胰酶進行消化。
細胞回縮脫落後,加入凍存液終止消化反應。
在1000 RPM條件下離心4分鍾,棄去上清後,用凍存液重懸SK-N-MC細胞,確保DMSO濃度為(wei) 10%。
將SK-N-MC細胞懸液分裝至凍存管中,並使用程序降溫盒在-80℃預凍2小時,隨後轉移至液氮中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,21 |
D3S1358 | 15 (ATCC=HTB-10; CLS=300340; KCLB=30010; PubMed=19787792; PubMed=30879952) |
15,16 (CCRID; DSMZ=ACC-203; PubMed=24312454; PubMed=25010205) | |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 8 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,14 (ATCC=HTB-10; CCRID; CLS=300340; DSMZ=ACC-203; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
14 (PubMed=19787792) | |
D19S433 | 13,15.2 (ATCC=HTB-10; CCRID; PubMed=19787792; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
13,16 (DSMZ=ACC-203) | |
D21S11 | 30,31.2 (ATCC=HTB-10; CLS=300340; COG; DSMZ=ACC-203; PubMed=19787792; PubMed=24312454; PubMed=25010205) |
30,31.2,32.2 (CCRID) | |
FGA | 21,25 |
Penta D | 8,9,13 (DSMZ=ACC-203) |
9,13 (ATCC=HTB-10; CLS=300340) | |
Penta E | 16,18 |
SE33 | 16 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 9,11 (ATCC=HTB-10; CCRID; CLS=300340; COG; DSMZ=ACC-203; KCLB=30010; PubMed=24312454; PubMed=25010205; PubMed=30879952) |
11 (PubMed=19787792) | |
vWA | 17,18 |