
NCI-N87細胞(人胃癌細胞)
- 來源:胃;肝轉移灶
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-N87細胞係為(wei) myc陽性和erb-B2陽性,表麵表達癌胚抗原(CEA)和TAG 72,但為(wei) 左旋多巴脫羧酶(DDC)陰性。
NCI-N87是一種人胃癌細胞係,表現出上皮樣形態,於(yu) 1976年從(cong) 一名男性胃癌患者的胃中(肝轉移灶)分離。NCI-N87細胞係為(wei) 近二倍體(ti) ,64%的受檢細胞中存在雙微體(ti) (DM)。據報道,NCI-N87細胞的鍍覆效率為(wei) 4.3%。
NCI-N87細胞具有以下特性和特征
分子特征
表達表麵糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72
缺乏左旋多巴胺脫羧酶(DDC)活性
血管活性的腸肽(VIP)受體(ti) 活性極低
缺乏胃泌激素受體(ti)
表達蕈毒堿膽堿受體(ti)
基因表達特征
不表達N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素釋放肽基因
c-myc和c-erb-B2 RNA表達水平與(yu) 其它細胞株相當
其他特征
生長特性:上皮細胞樣、貼壁生長、倍增時間:約48-80小時
受體(ti) 表達:表達乙酰膽堿受體(ti) ,特別是蕈毒堿型受體(ti)
致瘤性:NCI-N87細胞在裸鼠中可形成腫瘤
NCI-N87細胞參數表
細胞名稱 | NCI-N87細胞(人胃癌細胞) |
細胞 別稱 | NCI-N87 [N87] ; NCI-N87 |
細胞類型 | 人 (Homo sapiens) ; 腫瘤細胞 ; 胃癌細胞 |
組織來源 | 男性胃癌,肝轉移 |
形態生長特性 | 上皮細胞樣; 貼壁生長 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 37°C,5% CO2 |
培養參數 | 推薦傳代比例 1:2-1:3;推薦換液頻率 2~3次/周;倍增時間 ~48-80小時 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
細胞解凍溫度 | 37°C水浴,快速解凍 |
生物安全等級 | 1 |
致瘤性 | 在無胸腺裸鼠中可形成腫瘤 |
轉移性 | 具有肝髒轉移性 |
植板率 | 4.30% |
受體表達 | 表達蕈毒堿膽堿受體 |
分子標記 | 表達表麵糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72 |
酶活性 | 缺乏左旋多巴胺脫羧酶(DDC)活性 |
VIP受體活性 | 極低 |
胃泌素受體 | 缺乏 |
基因表達 | 陽性表達 c-myc, c-erb-B2;陰性表達 N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 胃泌素釋放肽 |
未擴增或重排基因 | N-myc, L-myc, myb, EGF受體基因 |
保藏機構 / 建係時間 | ATCC; CRL-5822 / 1976年 |
應用領域 | 胃癌研究,藥物篩選,信號通路研究 |
培養教程
NCI-N87人胃癌細胞培養教程
NCI-N87細胞複蘇步驟
在37°C水浴中預熱完全培養(yang) 基30分鍾,以備NCI-N87細胞使用。
將凍存的NCI-N87細胞從(cong) 液氮中取出,放入-80°C冰箱數分鍾以過渡。
在37°C水浴中快速解凍NCI-N87細胞,時間約1-2分鍾。
將解凍的NCI-N87細胞懸液轉移到含有5 mL預熱完全培養(yang) 基的15 mL離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清。
用1 mL完全培養(yang) 基重懸NCI-N87細胞。
將NCI-N87細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中,並補充適量的完全培養(yang) 基。
將NCI-N87細胞置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
NCI-N87細胞傳代
傳(chuan) 代比例:1:2至1:4
傳(chuan) 代周期:5-7天
貼壁時間:由於(yu) NCI-N87細胞貼壁較慢,建議在複蘇或傳(chuan) 代後讓細胞貼壁48小時再進行後續實驗操作。
NCI-N87細胞換液頻率
每周換液2-3次,以避免NCI-N87細胞過密生長和培養(yang) 基pH值變化。
定期觀察培養(yang) 基顏色,如果變黃則表明pH值降低,需要及時更換培養(yang) 基。
NCI-N87細胞培養的特殊注意事項
培養(yang) NCI-N87細胞時可能會(hui) 有漂浮細胞和碎片,屬正常現象。
換液時可輕輕吸除上層漂浮細胞和碎片,但避免完全去除,以免影響貼壁的NCI-N87細胞。
傳(chuan) 代時可使用PBS輕輕衝(chong) 洗NCI-N87細胞表麵以去除大部分漂浮物。
NCI-N87細胞貼壁較慢,傳(chuan) 代後需要足夠時間貼壁。
可能觀察到較大的"囊泡",這是NCI-N87細胞的特征之一。
NCI-N87細胞凍存
凍存液配方:95%完全培養(yang) 液 + 5% DMSO
保存條件:建議使用液氮進行長期保存NCI-N87細胞。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 8,12 |
D1S1656 | 16 |
D2S441 | 11,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 14 |
D5S818 | 12,13 |
D6S1043 | 12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14,15 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 16,21 |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 14,14.2 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 14,15 |
DYS391 | 10 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 12 |
Penta E | 5 |
TH01 | 7,9 (PubMed=27102572) |
9 (AddexBio=C0023002/4674; ATCC=CRL-5822; CCRID; Cosmic-CLP=908461; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
TPOX | 9,11 |
vWA | 15,16 |
參考文獻
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