H3396細胞（人乳腺癌細胞係） （暫不提供）

H3396細胞係是從(cong) 一名患有晚期乳腺癌的女性患者的胸腔積液中分離。H3396細胞由美國國立衛生研究院國家癌症研究所的科學家們(men) 創建，為(wei) 研究乳腺癌的生物學特性及藥物反應提供了重要的實驗模型。

H3396細胞參數表

H3396人乳腺癌細胞係培養教程

H3396細胞的傳代

• 傳(chuan) 代頻率：H3396細胞需每2-3天換液一次，根據細胞的生長密度和狀態來決(jue) 定傳(chuan) 代時間。

• 去除舊培養(yang) 基：用吸管將H3396細胞培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基徹底吸盡。

• PBS衝(chong) 洗：加入3-4 ml無鈣鎂PBS，輕輕搖動培養(yang) 瓶以潤洗H3396細胞，持續10-20秒後吸走PBS。

• 胰酶消化：加入1 ml胰酶覆蓋H3396細胞層，輕輕搖勻胰酶，使其均勻接觸H3396細胞。

• 消化監控：將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱內(nei) 消化，觀察H3396細胞間隙逐漸增大，但細胞未完全脫落時停止消化。

• 終止消化：加入2-3 ml完全培養(yang) 基（含10% FBS）中和胰酶，輕輕混勻H3396細胞懸液。

• 細胞收集：將H3396細胞懸液轉移到離心管中，以900 rpm離心3-5分鍾，去除上清液。

• 重懸H3396細胞：用新鮮的完全培養(yang) 基重懸H3396細胞，輕輕吹打使其均勻分布。

• 補充培養(yang) 基：將重懸後的H3396細胞轉移到新的培養(yang) 瓶中，補足培養(yang) 基後，置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

H3396細胞的凍存與複蘇

凍存步驟

• 細胞收集：按傳(chuan) 代步驟收集H3396細胞，並進行離心，去除上清液。

• 重懸H3396細胞：用凍存液（92% FBS + 8% DMSO）重懸H3396細胞，控製細胞濃度為(wei) 200-300萬(wan) /ml。

• 分裝：將H3396細胞懸液分裝到凍存管中，並做好標簽標記。

• 程序降溫：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，先在4℃下放置30分鍾。

• 低溫保存：隨後將H3396細胞凍存管轉移至-80℃冰箱中過夜，最終儲(chu) 存在液氮中以長期保存。

複蘇步驟

• 快速解凍：將凍存的H3396細胞凍存管迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍，確保細胞完全融化。

• 重懸H3396細胞：將解凍的H3396細胞加入預熱的完全培養(yang) 基中，輕輕混勻。

• 離心：以900 rpm離心3-5分鍾，去除上清。

• 重懸與(yu) 培養(yang) ：用新鮮培養(yang) 基重懸H3396細胞後，轉移至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

H3396細胞培養中的注意事項

• 胰酶消化時間：不同品牌的胰酶活性差異較大，因此需密切監控消化時間，以防止H3396細胞過度消化導致損傷(shang) 。

• 操作輕柔：在消化和重懸H3396細胞過程中，操作需輕柔，防止機械損傷(shang) 對細胞造成不良影響。

• 汙染預防：操作過程中應嚴(yan) 格遵守無菌操作規程，確保H3396細胞培養(yang) 物不受汙染。

• 細胞狀態監測：定期檢查H3396細胞的形態和生長情況，確保細胞處於(yu) 健康狀態。