EL4細胞係（小鼠淋巴瘤細胞係）

EL4細胞係是一種T淋巴細胞來源的小鼠淋巴瘤細胞係，在1970年通過在C57BL/6小鼠體(ti) 內(nei) 應用9,10-二甲基-1,2-苯並蒽誘導淋巴瘤建立，廣泛應用於(yu) 免疫學和腫瘤學研究。

EL4細胞特性特征

• 抗原表達: H-2b、Thy-1.2

• 對藥物的反應:對0.1 mM皮質醇具有抗性；對20 μg/mL PHA敏感。

亞係信息

• EL4.IL-2: 產(chan) 生高水平白介素-2（IL-2）。

• EL4.IL-2: 對0.1 mM 5-溴-2'-脫氧尿苷（BUdR）具有抗性。

• EL4.BU.1.OUAr.1.1: 對0.1 mM 5-溴-2'-脫氧尿苷和1 mM哇巴因具有抗性。

• 病毒檢測: EL4細胞缺乏鼠痘病毒（陰性）。

EL4小鼠淋巴瘤細胞參數表

EL4小鼠淋巴瘤細胞培養教程

EL4細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的EL4細胞，立即放入37℃水浴中解凍。

• 解凍後，將細胞懸液轉移至含4 mL預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以1000 rpm離心3-5分鍾，棄上清液。

• 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸EL4細胞。

• 將細胞轉移到培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，添加適量培養(yang) 基。

常規培養

• EL4細胞為(wei) 懸浮生長細胞，不需要胰酶消化。

• 保持細胞密度在2 x 10^5 ~ 4.0 x 10^5個(ge) 細胞/mL。

• 每2-3天更換培養(yang) 基或傳(chuan) 代一次。

EL4細胞傳代方法

• 當EL4細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。

• 傳(chuan) 代比例建議為(wei) 1:2 - 1:4。

• 收集細胞懸液，1000 rpm離心3-5分鍾。

• 棄上清液，用新鮮培養(yang) 基重懸EL4細胞。

• 將細胞按所需密度分配至新的培養(yang) 瓶中。

換液步驟

• 收集EL4細胞懸液，1000 rpm離心3-5分鍾。

• 棄上清液，用新鮮預熱的完全培養(yang) 基重懸細胞。

• 將EL4細胞轉移回培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 使用凍存液：50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO。

• 調整EL4細胞密度至1 x 10^6 ~ 1 x 10^7個(ge) 活細胞/mL。

• 將細胞懸液分裝至凍存管中，每管1 mL。

• 使用程序降溫盒或-80℃冰箱緩慢降溫，24小時後轉入液氮中長期保存。

常見問題及解決方案:

• 細胞聚集:

• EL4細胞雖然為(wei) 懸浮生長，但在培養(yang) 過程中可能出現細胞聚集。

• 解決(jue) 方案：輕輕吹打EL4細胞懸液，使用細胞篩網過濾去除大的細胞團，適當調整細胞密度。

  
  

• 細胞沉降:

• EL4細胞在培養(yang) 中可能會(hui) 出現部分細胞沉降。

• 解決(jue) 方案：定期輕搖培養(yang) 瓶，使用旋轉培養(yang) 係統或搖床保持細胞懸浮狀態。

  
  

• 細胞活力下降:

• 長期培養(yang) 或處理不當可能導致EL4細胞活力下降。

• 解決(jue) 方案：定期檢測細胞活力，避免過度消化或機械損傷(shang) ，保持細胞的完整性。

  
  

• 細胞異質性增加:

• 長期培養(yang) 可能導致EL4細胞群體(ti) 中的異質性增加。

• 解決(jue) 方案：定期進行單克隆分離，使用流式細胞儀(yi) 進行細胞分選以保持細胞群體(ti) 的純度。

  
  

• 細胞汙染:

• 細菌或真菌汙染可能影響EL4細胞的生長狀態。

• 解決(jue) 方案：嚴(yan) 格遵守無菌操作規程，定期檢查培養(yang) 環境和設備的無菌狀態，適當添加抗生素，及時處理受汙染的細胞。