
A20細胞係(小鼠B細胞淋巴瘤細胞)
- 來源:B淋巴細胞;淋巴瘤
- 細胞特征:懸浮,聚團生長,圓形至多形細胞懸浮生長,單個(ge) 或部分小集合,少數細胞輕微貼壁
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
- 其他:A20細胞可以呈遞同種異體(ti) 抗原和蛋白質抗原
A20細胞是一種源自一隻老年BALB/cAnN小鼠(自發網狀細胞腫瘤)的B細胞淋巴瘤細胞係,首次於(yu) 1979年被鑒定。A20細胞具有二倍體(ti) 特征,其染色體(ti) 數目在33到38之間,模態數為(wei) 37。
A20細胞係懸浮生長、細胞呈球形,表麵光滑,中心部分較暗,而邊緣較明亮。
A20細胞特性特征
免疫球蛋白表達:表麵免疫球蛋白(sIg+)的表達水平依賴於(yu) 培養(yang) 條件。在Click培養(yang) 基中生長時,表麵免疫球蛋白表達很少;然而,在RPMI 1640培養(yang) 基中生長時,表達大量表麵免疫球蛋白。
抗原呈遞:A20細胞可以呈遞同種異體(ti) 抗原和蛋白質抗原,適合作為(wei) 轉染宿主用於(yu) 研究抗原呈遞機製。
基因表達:表達I-A+(MHC II類分子)和表麵免疫球蛋白(sIg+)。
標記表達:表達Fc受
致瘤性:A20細胞具有致瘤性
病毒檢測:A20細胞鼠痘病毒呈陰性
A20細胞參數表
細胞名稱 | A20細胞係(小鼠B細胞淋巴瘤細胞) |
細胞別稱 | A-20; |
別名 | ATCC TIB-208 |
來源 | BALB/cAnN小鼠自發性網狀細胞腫瘤 |
發現年份 | 1979年 |
細胞類型 | B細胞淋巴瘤細胞係 |
形態 | 淋巴母細胞樣,球狀,表麵光滑,中心部分較暗邊緣明顯 |
生長特性 | 懸浮生長;聚團,少數細胞輕微貼壁 |
致瘤性 | 具有致瘤性 |
基礎培養基 | RPMI-1640,0% FBS,0.05 mM β-巰基乙醇,1% 青黴素-鏈黴素 |
培養條件 | 37℃,95%空氣,5% CO2 |
傳代比例 | 建議1:2(首次傳代) |
培養密度 | 1×10^5-1×10^6 cells/mL |
換液頻率 | 每2-3天 |
抗原表達 | I-A+ (MHC II類分子) |
基因表達 | 表麵免疫球蛋白(sIg+) |
表麵標記 | Fc受體 |
免疫球蛋白表達 | 在Click培養基中低表達,在RPMI 1640中高表達 |
抗原呈遞能力 | 可呈遞同種異體抗原和蛋白質抗原 |
病毒檢測 | 鼠痘病毒陰性 |
應用 | 免疫學研究,轉染宿主,疫苗靶點選擇,抗腫瘤免疫機製研究,藥物篩選 |
保存方法 | 液氮長期保存;-80℃保存2個月有效 |
運輸條件 | 室溫3-5天有效(活細胞);幹冰運輸(凍存細胞) |
細胞鑒定 | 經過STR鑒定 |
培養教程
A20小鼠B細胞淋巴瘤細胞培養教程
A20細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的A20細胞。
在37℃水浴中快速解凍(約1-2分鍾)。
將A20細胞懸液緩慢轉移到含有6-9 mL完全培養(yang) 基的離心管中。
1000 rpm離心5分鍾,棄上清。
用新鮮完全培養(yang) 基重懸A20細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。
A20細胞傳代
每2-3天觀察A20細胞生長狀況。
當A20細胞密度達到1×10^6 cells/mL時進行傳(chuan) 代,建議傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2(首次傳(chuan) 代)。
收集A20細胞懸液,1000 rpm離心5分鍾。
棄上清,用新鮮完全培養(yang) 基重懸A20細胞。
將A20細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中。
A20細胞凍存
收集對數生長期的A20細胞。
1000 rpm離心5分鍾,棄上清。
用含5/10% DMSO的完全培養(yang) 基重懸A20細胞。
將A20細胞懸液分裝到凍存管中。
使用程序降溫盒,將A20細胞緩慢降溫至-80℃。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
注意事項
定期檢查A20細胞的形態和生長狀況,保持無菌操作,避免汙染。
不要讓A20細胞過度生長或密度過高,定期進行細胞鑒定,確保A20細胞特性未發生改變。
A20細胞生長監測
顯微鏡觀察:使用倒置顯微鏡定期觀察A20細胞形態和密度。A20細胞懸浮生長,形態為(wei) 球形,表麵光滑。
細胞計數:每2-3天進行細胞計數,記錄A20細胞密度變化,保持A20細胞密度在1×10^5-1×10^6 cells/mL之間。
培養(yang) 基顏色:觀察培養(yang) 基顏色變化,培養(yang) 基變黃表明需要更換新鮮培養(yang) 基。
細胞活力:使用台盼藍染色法檢測A20細胞活力,活A20細胞不著色,死A20細胞呈藍色。
生長曲線:繪製A20細胞生長曲線,監測A20細胞的對數生長期和平台期。
倍增時間:計算A20細胞倍增時間,正常A20細胞的倍增時間約為(wei) 48-72小時。
細胞聚集:觀察是否有A20細胞聚集現象,過度聚集可能影響A20細胞生長。
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STR鑒定及相關
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Mouse STR 2-1 | 15 |
Mouse STR 3-2 | 13,14 |
Mouse STR 4-2 | 21.3 |
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Mouse STR 6-7 | 11,12 |
Mouse STR 7-1 | 25.2 |
Mouse STR 8-1 | 12,13 |
Mouse STR 11-2 | 17 |
Mouse STR 12-1 | 16 |
Mouse STR 13-1 | 16.2,17.2 |
Mouse STR 15-3 | 22.3 |
Mouse STR 17-2 | 16,17 |
Mouse STR 18-3 | 15,16,18 |
Mouse STR 19-2 | 14 |
Mouse STR X-1 | 25 |
參考文獻
上一篇:EL4細胞係(小鼠淋巴瘤細胞係)