
NU-DUL-1細胞係源自1985年從(cong) 一名43歲白人男性的腹膜積液中分離,該患者被確診為(wei) 彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)。NU-DUL-1細胞係以懸浮方式生長,具有典型的淋巴母細胞形態。NU-DUL-1細胞係在研究未分化淋巴瘤的細胞生物學特性、基因組重排和分子機製方麵,具有重要的實驗價(jia) 值。
NU-DUL-1細胞係的染色體(ti) 核型為(wei) 亞(ya) 二倍體(ti) ,帶有複雜的染色體(ti) 異常,包括14號染色體(ti) 的易位,但與(yu) 11號或18號染色體(ti) 無關(guan) ,可能代表一種新的易位變異。此外,推測該細胞係Y染色體(ti) 缺失。基於(yu) 染色體(ti) 和遺傳(chuan) 分析,NU-DUL-1細胞係為(wei) 研究DLBCL中特殊的基因組重排提供了一個(ge) 新的模型。
NU-DUL-1細胞特性特征
抗原表達:LN-1+、LN-2+、LN-3+(抗HLA-Dr);BA-1+(CD24);CALLA(J5)+(CD10);BA-2-(CD9);OKM1-(髓係標誌物);Leu-7-(自然殺傷(shang) T細胞標誌物);
多個(ge) T細胞標誌物(如OKT-3、OKT-4等)呈陰性;EBNA-(愛潑斯坦-巴爾核抗原)陰性
免疫表型:NU-DUL-1細胞表達早期B細胞分化的標誌物,顯示出未分化淋巴瘤的特征。
sIg:NU-DUL-1細胞係對表麵免疫球蛋白(sIg)呈陰性。
NU-DUL-1細胞係還表現出與(yu) 惡性腦脊液的關(guan) 聯,表明其可能具有高度侵襲性或轉移性特征
NU-DUL-1細胞參數表
細胞名稱 | NU-DUL-1細胞(人彌漫性組織細胞性淋巴瘤) |
別稱 | NUDUL-1; NUDUL1 |
種屬 | 人 |
性別/年齡 | 男 / 43歲 |
組織來源 | 腹腔積液(來源於轉移部位:惡性腦脊液) |
疾病類型 | 彌漫性大B細胞淋巴瘤 |
細胞類型 | 淋巴細胞 |
形態特征 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
倍增時間 | 約30-36小時,每周2-3次 |
培養基和添加劑 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% P/S(抗生素) |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣,5%二氧化碳;濕度:70%-80% |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO 或推薦無血清凍存液(CX001) |
傳代比例/消化方法 | 建議1:2傳代,使用0.25%胰蛋白酶消化 |
生物安全等級 | BSL-1 |
抗原表達 | LN-1+、LN-2+、LN-3+(抗HLA-Dr)、BA-1+(CD24)、CALLA(J5)+(CD10)、BA-2-(CD9)、OKM1-、Leu-7-、EBNA-(陰性) |
基因表達 | sIg-(陰性),表達早期B細胞分化標誌物 |
保藏機構 | ATCC; CRL-2969; DSMZ; ACC |
用途 | 僅限於科學研究,不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。 |
備注 | 懸浮細胞,注意離心收集細胞懸液,請勿直接倒掉培養液;顯微鏡下確認細胞狀態。 |
培養教程
NU-DUL-1人彌漫性組織細胞性淋巴瘤培養教程
NU-DUL-1細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出NU-DUL-1細胞凍存管後,立即放入37℃的水浴中迅速解凍,持續1-2分鍾,輕輕搖晃以加速解凍過程。
準備完全培養(yang) 基:RPMI-1640培養(yang) 基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青黴素/鏈黴素(P/S)。
解凍完成後,緩慢將NU-DUL-1細胞懸液加入到5 mL預熱的完全培養(yang) 基中,確保混合均勻。
將混合後的NU-DUL-1細胞懸液在1000 RPM下離心3-5分鍾,棄去上清。
加入4-6 mL新鮮的完全培養(yang) 基,輕輕吹打混勻,以確保NU-DUL-1細胞均勻分布。
將NU-DUL-1細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中,並放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
NU-DUL-1細胞傳代操作
傳(chuan) 代時機:當NU-DUL-1細胞密度達到80%-90%時,需進行傳(chuan) 代。
棄去上清液,使用無鈣、無鎂的PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)緩衝(chong) 液洗滌NU-DUL-1細胞1-2次。
根據NU-DUL-1細胞狀態,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA混合溶液,消化1-2分鍾,並使用顯微鏡觀察細胞脫落情況。
當細胞大部分變圓脫落時,立即終止消化,加入含10% FBS的完全培養(yang) 基。
將消化後的NU-DUL-1細胞在1000 RPM下離心3-5分鍾,棄去上清。
重懸NU-DUL-1細胞於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,並根據所需的細胞密度,以1:2至1:5的比例分配至新培養(yang) 瓶。
NU-DUL-1細胞凍存步驟
使用90%胎牛血清和10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO)製備NU-DUL-1細胞的凍存液。
收集生長狀態良好的NU-DUL-1細胞,在1000 RPM下離心3-5分鍾,棄去上清。
將NU-DUL-1細胞重懸於(yu) 凍存液中,按1 mL/凍存管的量分裝。
逐步降低溫度,將凍存管置於(yu) 程序性降溫盒中,隨後放入液氮中長期保存。
注意事項
NU-DUL-1細胞為(wei) 懸浮細胞,操作時需避免直接傾(qing) 倒,建議通過離心收集以減少細胞損失。
保持NU-DUL-1細胞培養(yang) 環境的無菌操作,定期檢查培養(yang) 基的顏色和細胞生長情況,及時更換培養(yang) 基以維持良好的生長環境。
傳(chuan) 代時避免過度消化,確保NU-DUL-1細胞活性保持最佳狀態。
進行複蘇、凍存或傳(chuan) 代操作時,建議拍照記錄NU-DUL-1細胞狀態,確保操作的可追溯性。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 12,14 |
D7S820 | 11,13 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 8,13 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 10,13 |
TH01 | 9,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |