LN-18細胞（人膠質母細胞瘤）

LN-18細胞係是一種人膠質母細胞瘤細胞係，於(yu) 1976年從(cong) 一名65歲的白人男性膠質母細胞瘤患者的右顳葉中分離。
LN-18細胞係以其上皮樣形態和貼壁生長特性著稱，增殖速度較快，適合用於(yu) 體(ti) 外實驗。LN-18細胞係因其獨特的生物學特性成為(wei) 研究膠質母細胞瘤的重要模型，提供了寶貴的實驗材料用於(yu) 相關(guan) 生物醫學研究。

LN-18細胞特性特征

• 致瘤性：LN-18細胞係在裸鼠體(ti) 內(nei) 能夠形成腫瘤，表明其具有致瘤性。

• 癌症基因狀態：TP53：突變型，具體(ti) 為(wei) TGT（Cys）到TCT（Ser）密碼子238突變；PTEN：野生型；p16/CDKN2A：已刪除；p14ARF：已刪除。

• 抗原表達：LN-18細胞表達HLA-A2、A9、B5、BW35和DRW3等抗原。
  

• 基因表達：LN-18細胞主要表達纖維連接蛋白（fibronectin）。

• 膠質纖維酸性蛋白（GFAP）和S100蛋白：對這兩(liang) 種蛋白呈陰性。

• 在Fas配體(ti) 刺激下，LN-18細胞會(hui) 在16小時內(nei) 發生凋亡。
  

• 嘌呤黴素以劑量依賴的方式殺死這些細胞。

• Bcl-2蛋白對Fas配體(ti) 誘導的細胞死亡提供保護，但對嘌呤黴素誘導的凋亡保護作用有限

LN-18細胞參數表

LN-18人膠質母細胞瘤培養教程

細胞傳代步驟

• 準備工作：在無菌條件下進行操作，確保所有器材和培養(yang) 基已準備妥當（如T25或T75培養(yang) 瓶）。

• 更換培養(yang) 液：每2-3天更換一次培養(yang) 液，即使未觀察到培養(yang) 基顏色變化。使用巴氏吸管輕輕吸取部分上清液，避免擾動細胞，加入等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基。

• 吸出原培養(yang) 液後，加入約2mL的PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液），輕輕晃動以潤洗細胞，然後吸出PBS。
  

• 加入約1mL的0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動以確保細胞完全浸潤。

• 將培養(yang) 瓶放入37℃的培養(yang) 箱中進行消化，觀察細胞是否開始變圓且之間出現間隙，通常消化時間為(wei) 3-5分鍾。

• 加入3mL含血清的培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打使細胞脫壁形成懸浮液。

• 收集細胞懸液並以1200rpm/min離心3分鍾，棄去上清。

• 加入新鮮培養(yang) 基，輕輕重懸細胞後轉移至新的培養(yang) 瓶中。

• 傳(chuan) 代比例：通常采用1:2至1:6的傳(chuan) 代比例，具體(ti) 可根據細胞密度進行調整。

凍存步驟

• 將細胞懸液調整至濃度為(wei) 0.5-1.0×10^6 cells/mL。
  

• 將凍存管放入-80℃冰箱預冷24小時，然後轉移至液氮儲(chu) 存以確保細胞的長期保存。

複蘇步驟

• 複蘇前準備：準備好含有10% FBS的完全培養(yang) 基，以便於(yu) 細胞複蘇後的培養(yang) 。

• 將凍存管在37℃水浴中迅速解凍，輕輕搖晃使細胞均勻分布。
  

• 加入4mL新鮮培養(yang) 基與(yu) 細胞懸液混合均勻。

• 在1000rpm下離心4分鍾，棄去上清液。

• 補加1-2mL新鮮培養(yang) 基，並將細胞轉移至新的培養(yang) 瓶中。

注意事項

• LN-18細胞對氧氣、細胞密度及營養(yang) 物質非常敏感，需定期檢查和更換培養(yang) 液，以防細胞死亡。

• 建議將培養(yang) 瓶平放，以增大空氣交換麵積，確保培養(yang) 液高度不超過3mm，從(cong) 而提供適宜的生長環境。