MDA-MB-175-VII細胞（人乳腺導管癌細胞）

MDA-MB-175VII是從(cong) 一名56歲黑人女性的胸腔積液中分離出的人乳腺導管癌細胞係，於(yu) 1973年首次分離。MDA-175上皮樣細胞被廣泛用於(yu) 癌症研究。

MDA-175細胞的核型為(wei) 84，染色體(ti) 計數在82到89之間，屬非整倍體(ti) 雌性（XX/XX/XXXX），染色體(ti) 數目從(cong) 超四倍體(ti) 至近四倍體(ti) 。所有正常染色體(ti) 至少有一個(ge) 拷貝，大多數染色體(ti) 每個(ge) 核型有三到四個(ge) 拷貝。標記染色體(ti) 包括del(1)p35)、der(7)t(1;7)(q11;q32)、未知、t(2q;?)和未知等位染色體(ti) 。N1染色體(ti) q臂的改變與(yu) M.J.Siciliano等人於(yu) 1979年在《癌症研究》中報道的結果一致，癌症研究39:99191979。

MDA-MB-175-VII細胞特性特征

• MDA-175細胞生長速度較快，但相對其他細胞係可能較慢
  

• 傾(qing) 向於(yu) 紮堆生長，堆與(yu) 堆之間有空間、貼壁速度快、難以消化

• MDA-175細胞具有轉移性，源自胸腔積液
  

• 同工酶表達：AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1-2; PGM1,2; PGM3,1-2
  

• 致瘤性：在裸鼠皮下接種10^7個(ge) 細胞後，21天內(nei) 100%（5/5）發展為(wei) 腫瘤
  

MDA-MB-175-VII細胞參數表

MDA-MB-175-VII人乳腺導管癌細胞培養教程

注意事項

• 推薦使用Leibovitz's L-15培養(yang) 基，該培養(yang) 基不需CO2。

• 若無無CO2培養(yang) 箱，可使用DMEM培養(yang) 基，並通入5% CO2。

• 專(zhuan) 用培養(yang) 基默認Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請聯係銷售備注更改。

• MDA175細胞生長慢，難消化。

培養教程

• 培養(yang) 基選擇：推薦使用Leibovitz's L-15培養(yang) 基，添加10% FBS和10 µg/ml胰島素；如果使用DMEM培養(yang) 基，則需5% CO2環境。

• 培養(yang) 條件：溫度：37°C；氣相：無CO2（使用Leibovitz's L-15培養(yang) 基時）。

• 傳(chuan) 代方法：傳(chuan) 代比例：1:2 至 1:6

• 頻率：每周換液2-3次。

• 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶或胰蛋白酶/EDTA溶液。

• 消化時間：1-3分鍾。

培養步驟

• 確保所有器材和試劑無菌。

• 預熱培養(yang) 基和胰蛋白酶溶液至37°C。

  
  

• 消化細胞：

• 棄去舊培養(yang) 基。

• 用PBS輕輕衝(chong) 洗MDA175細胞1-2次。

• 加入適量預熱的胰蛋白酶溶液。

• 置於(yu) 37°C孵育1-3分鍾，觀察MDA175細胞脫落情況。

  
  

• c. 收集細胞：

• 加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕吹打細胞，使其完全脫落。

• 將MDA175細胞懸液轉移至離心管中。

  
  

• d. 離心和重懸：

• 1000rpm離心5分鍾。

• 棄上清，用新鮮完全培養(yang) 基重懸MDA175細胞。

  
  

• e. 接種：

• 按1:2至1:6的比例將MDA175細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

• 加入適量完全培養(yang) 基。

• 輕輕搖晃培養(yang) 瓶，使MDA175細胞均勻分布。

  
  

• f. 培養(yang) ：

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中。

• 每天觀察MDA175細胞生長狀況。

注意事項

• MDA175細胞生長較快，傳(chuan) 代時應留少量細胞以保持良好狀態。

• MDA175細胞傾(qing) 向於(yu) 紮堆生長，堆與(yu) 堆之間有空間。

• 貼壁速度快，觀察時需要注意。

凍存方法

• 使用無血清細胞凍存液進行凍存。

複蘇操作

• 快速解凍MDA175細胞。

• 每10分鍾觀察一次，直到部分MDA175細胞貼壁。

• 輕輕倒出培養(yang) 基，用3ml新培養(yang) 基輕輕洗一次。

• 加入完全培養(yang) 基繼續培養(yang) 。

• 觀察MDA175細胞生長情況和形態，必要時重複此過程（稱為(wei) "二傳(chuan) "）。