NCI-H209人小細胞肺癌細胞係

NCI-H209是一種人小細胞肺癌（SCLC）細胞係，由Gazdar A F等人於(yu) 1979年建立。細胞來源於(yu) 一名55歲白人男性患者的骨髓轉移灶，采集於(yu) 治療前。
NCI-H209細胞形態為(wei) 圓形細胞，在懸浮液中形成大聚集體(ti) ；隻有聚集體(ti) 中的細胞具有活力；培養(yang) 基中通常含有大量細胞碎片。

NCI-H209細胞特征、分子與生化特征等

• NCI-H209細胞分子特征：表達未磷酸化的異常RB1蛋白，這是由於(yu) 密碼子706的單點突變（Cys->Phe）造成的，c-myc DNA序列未被擴增，合成與(yu) 正常肺組織相當量的p53 mRNA。

• NCI-H209細胞表達較高水平的4種生化標誌物：神經特異性烯醇化酶、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶（L-DOPA脫羧酶）、鈴蟾肽樣免疫活性。

• NCI-H209細胞具有致瘤性，能在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成具有典型小細胞肺癌組織學特征的可移植腫瘤；

• NCI-H209細胞具有骨髓轉移能力

• 同工酶譜:AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; Me-2,0; PGM1,1-2; PGM3,1

NCI-H209細胞具有以下染色體特征

• NCI-H209細胞是超二倍體(ti) 特性，模式染色體(ti) 數為(wei) 49，在28%的細胞中觀察到。

• 高倍性染色體(ti) 的出現頻率為(wei) 1.3%。

• 每個(ge) 細胞中普遍存在10-11個(ge) 共同的標記染色體(ti) 。

• 約有6個(ge) 額外的標記染色體(ti) ，但這些僅(jin) 在個(ge) 別細胞的核型中出現。

• 未在細胞中檢測到同源染色體(ti) 著色區（HSR）和微小染色體(ti) （DM）。

• B組染色體(ti) 表現出結構異常，而C組染色體(ti) 則保持配對狀態。

• 在所有NCI-H209中均觀察到X染色體(ti) 和Y染色體(ti) 各一個(ge) 拷貝。

NCI-H209細胞參數表

NCI-H209人小細胞肺癌細胞係培養教程

NCI-H209細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出NCI-H209細胞凍存管，迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。

• 解凍後立即將NCI-H209細胞懸液轉移到含預熱培養(yang) 基的離心管中。

• 以800rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H209細胞，並轉移到培養(yang) 瓶中。

常規培養

• 生長狀態：NCI-H209細胞以懸浮狀態生長，形成多細胞聚集體(ti) 。

• 培養(yang) 基更換：每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 細胞密度：保持NCI-H209細胞密度在1×10^5 - 1×10^6 cells/mL之間。

傳代

• 傳(chuan) 代比例通常為(wei) 1:2至1:3。

• 收集NCI-H209細胞懸液，800rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，用新鮮培養(yang) 基重懸NCI-H209細胞。

• 按所需比例分配到新的培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 隻有聚集體(ti) 中的NCI-H209細胞是有活力的，單個(ge) 分散的細胞可能不具有生存能力。

• 培養(yang) 基中通常含有大量NCI-H209細胞碎片，難以準確估計細胞存活率。

• 操作時需保持無菌環境，使用經過消毒的器材。

• 定期檢查NCI-H209細胞形態和生長狀況。

NCI-H209細胞凍存

• 收集對數生長期的NCI-H209細胞。

• 製備凍存液（90% FBS + 10% DMSO）。

• 調整NCI-H209細胞密度至1×10^6 cells/mL。

• 將NCI-H209細胞懸液分裝到凍存管中，置於(yu) -80°C冰箱過夜。

• 次日轉移到液氮中長期保存。

培養特性與注意事項

• 生長狀態：NCI-H209細胞是懸浮生長的細胞，以多細胞聚集體(ti) 形式存在。

• 活力細胞：隻有聚集體(ti) 中的NCI-H209細胞是有活力的，單個(ge) 分散的細胞可能不具有生存能力。

• 細胞碎片：培養(yang) 基中通常含有大量NCI-H209細胞碎片，難以準確估計細胞存活率。

培養條件控製

• 專(zhuan) 用培養(yang) 基：使用專(zhuan) 用的NCI-H209細胞培養(yang) 基，該培養(yang) 基已包含細胞生長所需的各種成分。

• 培養(yang) 環境：保持培養(yang) 環境在37°C，5% CO2的條件下。

• 細胞密度：維持NCI-H209細胞密度在1×10^5 - 1×10^6 cells/mL之間。

傳代和維護

• 觀察：定期觀察NCI-H209細胞生長狀態，根據細胞密度決(jue) 定傳(chuan) 代時間。

• 傳(chuan) 代：通過添加完全培養(yang) 基來維持NCI-H209細胞的生長狀態。

• 更換培養(yang) 基：每2-3天更換一次培養(yang) 基，以保證NCI-H209細胞有足夠的營養(yang) 。

避免汙染的措施

• 嚴(yan) 格遵守無菌操作規程，所有操作都在生物安全櫃中進行。

• 使用經過滅菌的培養(yang) 基、器皿和工具。

• 定期對培養(yang) 環境進行消毒。

• 操作前後都要徹底清潔工作台麵和手套。

• 避免使用含有抗生素的培養(yang) 基長期培養(yang) ，以防止潛在的耐藥性汙染。