NCI-H2126細胞（人肺癌細胞）

NCI-H2126細胞係來源於(yu) 一位65歲白人男性非小細胞肺癌患者的胸腔積液（轉移部位），而非直接來自肺癌組織。NCI-H2126細胞是一種上皮樣細胞係，與(yu) 同一患者的EBV轉化淋巴母細胞係NCI-BL2126相關(guan) 。然而，NCI-H2126細胞係本身並非通過EBV轉化獲得永生性

核型特征

NCI-H2126細胞係是一種超三倍體(ti) 人類細胞係，核型模態數為(wei) 79，範圍在71到83之間。約20%的細胞具有79條染色體(ti) ，5.5%的細胞表現出更高的倍性。核型異常複雜，大多數細胞含有超過22條標記染色體(ti) ，許多標記染色體(ti) 具有複雜的結構重排。特征性重排包括雙拷貝的t（10qter--10q11.2::13C--13qter）和der（9）t（3;9）（p12;p22?），以及單拷貝的del（1）（p22）和i（1q）。每個(ge) 細胞中有兩(liang) 條正常的X染色體(ti) ，但未發現正常的Y染色體(ti) 和N1、N5、N14、N15染色體(ti) 。染色體(ti) N20和N22在每個(ge) 細胞中通常存在四個(ge) 或更多拷貝。

NCI-H2126細胞

• NCI-H2126細胞是貼壁生長，形態呈上皮細胞樣，在適宜的培養(yang) 條件下可以無限增殖。

• NCI-H2126細胞表現出多種酶的表達特征，包括：AK-1 (腺苷激酶1)、ES-D (酯酶D)、G6PD (葡萄糖-6-磷酸脫氫酶)、GLO-I (氧化還原酶I)、PGM1 (磷酸葡萄糖變位酶1)、PGM3 (磷酸葡萄糖變位酶3)

• NCI-H2126細胞具有遺傳(chuan) 不穩定性，容易發生基因突變和染色體(ti) 異常。
  

• NCI-H2126細胞表現出顯著的致瘤性，在裸小鼠模型中能夠形成腫瘤，並且具有在胸腔積液中的轉移能力。
  

• NCI-H2126細胞對某些抗腫瘤藥物表現出敏感性。
  

NCI-H2126細胞參數表

NCI-H2126細胞培養教程

細胞複蘇步驟

• 準備37°C預熱的完全培養(yang) 基。

• 從(cong) 液氮或-80°C冰箱中取出凍存的NCI-H2126細胞，在37°C水浴中快速解凍（約1分鍾）。

• 將解凍的NCI-H2126細胞懸液轉移到含5 ml預熱完全培養(yang) 基的15 ml離心管中。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄上清。

• 用2 ml完全培養(yang) 基重懸NCI-H2126細胞，轉移到T25培養(yang) 瓶中。

• 放入37°C，5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 24小時後觀察NCI-H2126細胞貼壁情況，並更換新鮮預熱的完全培養(yang) 基。

細胞傳代步驟

• 當NCI-H2126細胞生長至80%-90%匯合度時進行傳(chuan) 代。

• 吸棄舊培養(yang) 基，用1 ml PBS輕柔衝(chong) 洗NCI-H2126細胞一次。

• 加入1 ml 0.25%胰酶，37°C孵育1-2分鍾（具體(ti) 時間可能因細胞狀態而異）。

• 顯微鏡下觀察NCI-H2126細胞脫落情況，輕拍培養(yang) 瓶輔助脫落。

• 加入等體(ti) 積完全培養(yang) 基終止消化。

• 1000 rpm離心5分鍾，棄上清。

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸NCI-H2126細胞，按1:2或1:3比例傳(chuan) 代到新培養(yang) 瓶中。

注意事項

• 收到NCI-H2126細胞後，首次傳(chuan) 代建議按1:2比例傳(chuan) 代至T25培養(yang) 瓶。

• 運輸用的培養(yang) 基不宜再次用於(yu) NCI-H2126細胞培養(yang) ，應使用新配製的完全培養(yang) 基。

• 若有未貼壁的NCI-H2126細胞，需離心回收並重懸。

• 定期觀察NCI-H2126細胞形態，保持上皮細胞樣貼壁生長特性。

細胞凍存

• 凍存液配方：90%血清，10% DMSO

• 細胞密度：>1×10^6 cells/ml

• 緩慢降溫後轉入液氮中長期保存

細胞汙染處理

• 立即將汙染的NCI-H2126培養(yang) 瓶從(cong) 培養(yang) 箱中取出，以防止汙染擴散到其他細胞。

• 拍照記錄NCI-H2126細胞汙染情況，並在24小時內(nei) 聯係供應商或銷售人員，報告汙染問題。

• 不要嚐試挽救被汙染的NCI-H2126細胞，以免汙染物擴散或產(chan) 生抗性菌株。

• 對培養(yang) 箱進行徹底清潔和消毒，防止交叉汙染。

• 使用備用的未汙染NCI-H2126細胞重新開始培養(yang) 。

• 審查實驗室操作規程，找出可能的汙染源，並采取預防措施避免未來汙染。

活細胞與死亡細胞的區分

• 形態觀察

• 活NCI-H2126細胞：呈現正常的細胞形態，貼壁牢固，邊界清晰。

• 死NCI-H2126細胞：變圓，從(cong) 培養(yang) 瓶表麵脫落，漂浮在培養(yang) 基中。

• 貼壁能力

• 活NCI-H2126細胞：能夠牢固地貼附在培養(yang) 瓶表麵。

• 死NCI-H2126細胞：失去貼壁能力，漂浮在培養(yang) 基中。

• 細胞膜完整性

• 活NCI-H2126細胞：細胞膜完整，不透光。

• 死NCI-H2126細胞：細胞膜破裂，在顯微鏡下可能呈現顆粒狀或透明狀。

• 染色法

• 台盼藍染色：活NCI-H2126細胞不著色，死細胞呈藍色。

• FDA-PI雙染：活NCI-H2126細胞呈綠色熒光，死細胞呈紅色熒光。

• 細胞活力測定：使用MTT、CCK-8等試劑可以定量評估NCI-H2126細胞活力。

• 生長和增殖能力

• 活NCI-H2126細胞能夠正常分裂和增殖。

• 死NCI-H2126細胞不會(hui) 增殖，數量不會(hui) 增加。