12z細胞（永生化人子宮內(nei) 膜異位症細胞）

12Z細胞係是一種源自37歲女性患者子宮內(nei) 膜組織的永生化人子宮內(nei) 膜異位症細胞係。在患者腹腔鏡手術中提取了子宮內(nei) 膜樣組織，隨後通過SV40病毒轉染使細胞獲得永生化特性，能夠在體(ti) 外條件下無限增殖。12Z細胞屬於(yu) 轉化的上皮樣細胞，是研究子宮內(nei) 膜異位症病理機製的重要模型。12Z細胞廣泛用於(yu) 與(yu) 子宮內(nei) 膜異位症相關(guan) 的基因功能研究、疾病標誌物的鑒定以及潛在治療靶點的探索，具有重要的科研價(jia) 值。

12z細胞特性特征

• 基因表達：12Z細胞係表達多種與(yu) 子宮內(nei) 膜異位症相關(guan) 的基因和標誌物，包括雌激素受體(ti) α和β、孕激素受體(ti) 、N-鈣粘蛋白等。

• 細胞標誌物：12Z細胞表現出體(ti) 內(nei) 可見的子宮內(nei) 膜異位症病變標誌物的表達，包括SV40T抗原和其他上皮細胞特征。

12z永生化人子宮內膜異位症細胞參數表

12z細胞（永生化人子宮內膜異位症細胞）培養教程

12Z細胞解凍

• 準備預熱至37°C的完全培養(yang) 基（如DMEM/F12）以及T25培養(yang) 瓶。

• 使用37°C水浴快速解凍12Z細胞凍存管，避免細胞長時間暴露在非理想環境中。

• 將凍存的12Z細胞凍存管從(cong) 液氮中取出，迅速放入37°C水浴中，輕輕搖晃，直至細胞完全解凍（約1-2分鍾）。

• 將解凍後的細胞懸液轉移到盛有9 mL預熱培養(yang) 基的離心管中，以125 × g離心7分鍾，去除冷凍保護劑。

• 棄去上清液，將細胞重懸於(yu) 5 mL完全培養(yang) 基中，轉移至T25培養(yang) 瓶，放置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 每天通過顯微鏡觀察12Z細胞的形態、貼壁及匯合情況，確保其逐步恢複到健康狀態。

12Z細胞培養

• 采用DMEM/F12培養(yang) 基，加入10%胎牛血清（FBS）和1%青黴素-鏈黴素（P/S）。

• 在37°C、5% CO₂的恒溫培養(yang) 箱中培養(yang) 12Z細胞。

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基，去除代謝廢物並補充營養(yang) ，保持12Z細胞的生長狀態。

12Z細胞傳代

• 當12Z細胞匯合度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代操作。

• 去除舊的培養(yang) 基，用無鈣鎂PBS緩衝(chong) 液洗滌12Z細胞，去除殘餘(yu) 血清。

• 添加2-4 mL胰蛋白酶-EDTA溶液，置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化2-5分鍾。

• 觀察細胞間隙變大時，終止消化，加入完全培養(yang) 基中和胰蛋白酶。

• 輕輕吹打瓶壁使12Z細胞脫落，製成細胞懸液。

• 使用血球計數板計數細胞後，根據1:3至1:5的比例將細胞接種至新培養(yang) 瓶中。

12Z細胞凍存

• 配製含5% DMSO和95%完全培養(yang) 基的冷凍保存液，確保細胞在低溫下的存活率。

• 收集對數生長期的12Z細胞，以125 × g離心7分鍾，棄去上清液。

• 將細胞重懸於(yu) 冷凍培養(yang) 基中，調整細胞濃度為(wei) 2-5 × 10⁶個(ge) /mL。

• 分裝1 mL細胞懸液至凍存管，逐步降溫（如使用程序降溫盒）後，存放於(yu) -80°C過夜，最終轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• 無菌操作：操作過程中全程保持無菌環境，避免12Z細胞汙染。

• 記錄觀察：定期記錄12Z細胞的形態、貼壁狀態及生長速率。

• 培養(yang) 基質量：確保使用優(you) 質胎牛血清和培養(yang) 基，以提供充足營養(yang) 。