
DMS53細胞是一種來源於(yu) 54歲未接受治療的白人男性患有小細胞肺癌的細胞係,分離自縱隔活檢組織。DMS53細胞表現出典型的上皮樣形態,應用於(yu) 小細胞肺癌的研究,尤其是在探索癌症生物學特性及藥物篩選領域。DMS53細胞在早期傳(chuan) 代時曾受到牛支原體(ti) Acholeplasma laidlawii的汙染,但在冷凍保存前通過抗血清和卡那黴素衍生物得以清除。
DMS53細胞特性特征
致瘤性:在皮下移植裸鼠實驗中,DMS53細胞展示了顯著的致瘤性,當接種107個(ge) 細胞時,腫瘤在21天內(nei) 以100%的發生率形成(5隻裸鼠中全部發生腫瘤)。
抗原表達:表達Leu 7和My23抗原。表達HLA I類和II類抗原,這使其在免疫反應研究中具有重要意義(yi) 。
基因表達:表達多種激素和生長因子,包括促腎上腺皮質激素、降鈣素、人絨毛膜促性腺激素、胰高血糖素、生長激素、17-β-雌二醇、甲狀腺釋放激素、催產(chan) 素、甲狀旁腺素和生長抑素樣免疫反應性。
表達標記:Bombesin、表皮生長因子(EGF)、轉化生長因子β(TGF-β)和乙酰膽堿的表達
DMS53人肺癌細胞參數表
細胞名稱 | DMS53細胞(人小細胞肺癌細胞) |
別名 | DMS-53; DMS53; Darmouth Medical School 53 |
來源 | 54歲未治療白人男性患者肺部活檢組織 |
性別 | 男性 |
年齡 | 54歲 |
形態 | 上皮樣,貼壁生長;也可以懸浮生長 |
細胞類型 | 小細胞肺癌細胞係 |
致瘤性 | 在裸鼠皮下接種107個細胞後,腫瘤發展率100%(5/5) |
抗原表達 | Leu 7;My23;HLA I類和II類抗原 |
基因表達特征 | 促腎上腺皮質激素、降鈣素、人絨毛膜促性腺激素等 |
表達標記 | Bombesin、表皮生長因子(EGF)、轉化生長因子β(TGF-β)和乙酰膽堿的表達 |
培養基類型 | Waymouth's MB 752/1 + 10% 胎牛血清(FBS) |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
傳代周期 | 每3-4天一次 |
凍存液配方 | 90% FBS + 10% DMSO |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:空氣95%,二氧化碳5% |
細胞檢測 | 支原體、細菌、真菌檢測陰性 |
用途限製 | 僅供科研使用,未經許可不得用於其他目的 |
培養教程
DMS53人肺癌細胞培養教程
DMS53細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出DMS53細胞的凍存管,立即放入37℃的水浴中,輕輕搖動,確保DMS53細胞迅速解凍(通常1-2分鍾內(nei) 完成)。
解凍後,將1 mL DMS53細胞懸液轉移至含4 mL培養(yang) 基的離心管中(培養(yang) 基可使用Waymouth's MB 752/1,添加10%胎牛血清[FBS])。
在1000 rpm下離心3-4分鍾,去除上清液,保留DMS53細胞。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基將DMS53細胞重懸,確保細胞分散均勻。
將重懸後的DMS53細胞轉移到培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,加入約8 mL新鮮培養(yang) 基。
將DMS53細胞置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
次日更換培養(yang) 基,檢查DMS53細胞的貼壁情況及生長狀態。
DMS53細胞傳代步驟
當DMS53細胞密度達到80%-90%時,可以進行傳(chuan) 代操作。
棄去培養(yang) 基後,用無鈣鎂的PBS衝(chong) 洗DMS53細胞1-2次,去除殘餘(yu) 培養(yang) 液。
向培養(yang) 瓶中加入1 mL胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%胰酶-0.53 mM EDTA),確保DMS53細胞表麵被消化液均勻覆蓋。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,觀察1-2分鍾,直至DMS53細胞變圓、開始脫落時,輕輕敲打瓶壁以加速脫落。
使用新鮮培養(yang) 基終止消化,輕柔地將DMS53細胞吹打懸浮。
在1000 rpm下離心4分鍾,去除上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸DMS53細胞,確保分散均勻。
將DMS53細胞懸液按1:2比例分到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,加入8 mL新鮮培養(yang) 基。
將DMS53細胞置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中繼續培養(yang) ,定期檢查生長情況。
DMS53細胞凍存步驟
當DMS53細胞生長狀態良好、細胞密度適中時,收集細胞進行凍存。
將DMS53細胞與(yu) 培養(yang) 液一起轉移到無菌離心管中,在1000 rpm下離心4分鍾。
棄去上清後,用PBS衝(chong) 洗DMS53細胞並計數,確保細胞濃度在5×10⁶至1×10⁷/mL之間。
使用無血清凍存液將DMS53細胞懸浮,按細胞密度5×10⁶至1×10⁷/mL的標準配置。
將1 mL DMS53細胞懸液裝入凍存管,做好標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,逐步降低至-80℃,通常在24小時後將DMS53細胞轉移至液氮罐中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 10 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 33.2 |
FGA | 20 |
Penta D | 10 |
Penta E | 13 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 12 |
vWA | 15,17 |